【摘要】：背景:心肌梗死是日常和手術(shù)后患者的頭號(hào)死因。隨著治療的進(jìn)步,梗死后再灌注損傷的防治成為最大障礙。在圍手術(shù)期,麻醉醫(yī)生對(duì)心肌缺血再灌注損傷(Ischemia Reperfusion Injury,IRI)的及時(shí)準(zhǔn)確處理,將有助于改善患者的預(yù)后。研究發(fā)現(xiàn),靜脈麻醉藥異丙酚(propofol)預(yù)處理(preconditioning)具有心臟保護(hù)作用,機(jī)制與抗氧化、調(diào)節(jié)ROS/NO信號(hào)通路、炎癥和免疫調(diào)節(jié)、激活保護(hù)性信號(hào)通路等相關(guān),但特異性靶點(diǎn)和上游激活分子仍不清楚。內(nèi)源性大麻素(endocannabinoids)系統(tǒng)在心臟本身、循環(huán)系統(tǒng)和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)都廣泛存在,能夠調(diào)節(jié)心臟缺血再灌注損傷。異丙酚可抑制內(nèi)源性大麻素降解酶——脂肪酸酰胺水解酶(FAAH),提高內(nèi)源性大麻素水平。本研究擬研究?jī)?nèi)源性大麻素系統(tǒng)在異丙酚預(yù)處理致心臟保護(hù)效應(yīng)中的作用和機(jī)制。第一部分異丙酚對(duì)心肌內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的影響目的:內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)包括內(nèi)源性大麻素、大麻素受體(CB1R、CB2R、TRPV1、新型血管型GPCR等)和代謝相關(guān)蛋白和酶類(lèi)。本研究旨在觀察:(1)異丙酚預(yù)處理能否減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷;(2)異丙酚對(duì)基礎(chǔ)條件下和缺氧/復(fù)氧后心肌細(xì)胞內(nèi)源性大麻素(AEA和2-AG)釋放的影響;(3)異丙酚預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷后外周血AEA和2-AG水平的影響;(4)異丙酚預(yù)處理對(duì)缺氧/復(fù)氧后心肌細(xì)胞CB1R和CB2R受體表達(dá)影響。方法:實(shí)驗(yàn)一、觀察異丙酚預(yù)處理對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后細(xì)胞凋亡和內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)代謝的影響。采用課題組改良乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)方法,缺氧12小時(shí)/復(fù)氧4小時(shí),建立心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型。實(shí)驗(yàn)分為四組:control(對(duì)照組);propofol(單純給予異丙酚孵育);H/R(缺氧/復(fù)氧組);propofol+H/R(異丙酚預(yù)處理組,異丙酚50μM,缺氧前1小時(shí)開(kāi)始孵浴至缺氧結(jié)束)。觀察指標(biāo):細(xì)胞凋亡率(流式細(xì)胞儀Annexin V/PI法)、細(xì)胞培養(yǎng)液ECs水平(包括2-花生四烯酸甘油(2-arachidonoylglycerol,2-AG)和N-花生四烯酸氨基乙醇(anandamide,AEA),UPLC-MS/MS法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液2-AG和AEA濃度)、ECs受體CB1R、CB2R mRNA(Real-time PCR)和蛋白質(zhì)水平(Western Blot)情況。實(shí)驗(yàn)二、觀察異丙酚預(yù)處理對(duì)心肌缺血再灌注損傷后外周血內(nèi)源性大麻素水平的影響。采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支致心肌缺血再灌注損傷模型。異丙酚預(yù)處理方式為缺血前1小時(shí),首先靜脈注射10mg/kg異丙酚,后39mg/kg·hr靜脈持續(xù)泵注。實(shí)驗(yàn)分sham(假手術(shù)組)、propofol(單純給予異丙酚)、i/r(缺血/再灌注損傷組)和propofol+i/r(異丙酚預(yù)處理組)四組,觀察外周血內(nèi)源性大麻素水平的變化(uplc-ms/ms法)。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一、異丙酚預(yù)處理能夠減少缺氧/復(fù)氧后心肌細(xì)胞凋亡。缺氧/復(fù)氧后,心肌細(xì)胞釋放aea和2-ag短暫增加。異丙酚預(yù)處理能夠增加細(xì)胞培養(yǎng)液中內(nèi)源性大麻素水平。缺氧/復(fù)氧可導(dǎo)致心肌細(xì)胞cb1r、cb2rmrna和蛋白質(zhì)水平升高,異丙酚對(duì)此無(wú)影響。實(shí)驗(yàn)二、異丙酚缺血前預(yù)處理升高大鼠心肌缺血再灌注損傷后外周血aea和2-ag濃度,但維持時(shí)間短暫。結(jié)論:異丙酚預(yù)處理能夠減少心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷,并促進(jìn)離體和在體心肌缺氧/缺血后內(nèi)源性大麻素的釋放。第二部分調(diào)控內(nèi)源性大麻素代謝對(duì)異丙酚預(yù)處理致心肌細(xì)胞保護(hù)的影響目的:通過(guò)給予內(nèi)源性大麻素降解酶faah抑制劑urb597或轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑vdm11提高內(nèi)源性大麻素水平,觀察異丙酚預(yù)處理的心肌保護(hù)效應(yīng)是否依賴(lài)于心肌細(xì)胞內(nèi)源性大麻素水平的升高。方法:采用心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型,實(shí)驗(yàn)分為八組:control、propofol、h/r、propofol+h/r、faah抑制劑urb597+h/r(單純給予1μmurb597預(yù)處理,缺氧前1.5小時(shí)孵育至缺氧結(jié)束)、urb597+propofol+h/r、內(nèi)源性大麻素轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑vdm11+h/r(單純給予1μmvdm11預(yù)處理,缺氧前1小時(shí)孵育至缺氧結(jié)束);vdm11+propofol+h/r。觀察指標(biāo):細(xì)胞活力(cck法)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞培養(yǎng)液ldh濃度、氧化損傷情況(mda、sod)、活性氧簇ros水平(h2dcfda+流式細(xì)胞儀檢測(cè))、no水平(daf-fmda+流式細(xì)胞儀檢測(cè))。結(jié)果:異丙酚預(yù)處理能夠減輕缺氧/復(fù)氧導(dǎo)致的心肌細(xì)胞活力下降和細(xì)胞凋亡,并可減少ldh漏出。較缺氧/復(fù)氧組,異丙酚可降低細(xì)胞mda濃度,升高sod濃度,并降低細(xì)胞ros和no水平。urb597或vdm11預(yù)處理能夠減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷。異丙酚和urb597、異丙酚和vdm11在減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷方面不存在協(xié)同作用。結(jié)論:提高內(nèi)源性大麻素水平有助于減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷,異丙酚心肌細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)依賴(lài)于內(nèi)源性大麻素的釋放。第三部分異丙酚預(yù)處理心肌保護(hù)效應(yīng)的大麻素受體機(jī)制目的:通過(guò)給予大麻素受體CB1R、CB2R特異性抑制劑,觀察異丙酚心臟保護(hù)效應(yīng)是由哪種受體介導(dǎo)的。方法:采用大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支致缺血再灌注損傷模型,研究分為七組:sham、I/R(單純?nèi)毖俟嘧p傷組)、propofol+I/R、CB1R拮抗劑AM251+I/R(AM251預(yù)注射組,缺血前1.5小時(shí)靜脈注射,1mg/kg)、AM251+propofol+I/R、CB2R拮抗劑AM630(AM630預(yù)注射組,缺血前1.5小時(shí)靜脈注射,1mg/kg)、AM630+propofol+I/R。觀察指標(biāo):心肌梗死面積(Evans blue+TTC染色法)、組織病理學(xué)檢查、心肌損傷酶cTn I、氧化損傷指標(biāo)(外周血MPO和SOD)、炎癥損傷指標(biāo)(外周血IL-1β、TNFα、sICAM-1、IL-10)。結(jié)果:異丙酚預(yù)處理可減少心肌梗死面積,降低cTn I水平、降低外周血MPO、IL-1β、TNFα、sICAM-1水平,升高SOD和IL-10濃度。AM251預(yù)處理具有輕微的心肌損傷改善作用,不能對(duì)抗異丙酚的心肌保護(hù)效應(yīng)。AM630預(yù)處理加重心肌缺血再灌注損傷,且能夠逆轉(zhuǎn)異丙酚的心肌保護(hù)效應(yīng)。結(jié)論:異丙酚預(yù)處理主要通過(guò)大麻素CB2R發(fā)揮心臟保護(hù)效應(yīng)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R614

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊慶國(guó);異丙酚與惡心嘔吐[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2001年01期

2 嚴(yán)明;異丙酚的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2002年03期

3 王云;異丙酚-芬太尼靜脈復(fù)合麻醉在婦產(chǎn)科小手術(shù)中的應(yīng)用[J];青海醫(yī)藥雜志;2003年03期

4 劉金金;芬太尼聯(lián)合異丙酚麻醉的臨床效果[J];山西醫(yī)藥雜志;2005年05期

5 王強(qiáng) ,陳紹洋;異丙酚麻醉引起的夢(mèng)、幻想以及情緒變化[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);1998年04期

6 麻偉青,孫彥,劉齊貴,徐貴麗;異丙酚麻醉于腹腔鏡膽囊切除術(shù)對(duì)機(jī)體一氧化氮的影響[J];臨床薈萃;2000年19期

7 楊曉華;異丙酚可激活補(bǔ)體[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2000年05期

8 李家寬;異丙酚用于小兒氣管異物取出術(shù)麻醉[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2000年07期

9 張晉蓉;異丙酚中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2001年06期

10 趙巖,方青南,白仲宣,劉燕,劉紅;異丙酚在雷夫諾爾引產(chǎn)術(shù)中麻醉50例臨床觀察[J];井岡山醫(yī)專(zhuān)學(xué)報(bào);2001年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 袁振紅;孟麗巍;龔秀萍;李潔;姚洪娟;;異丙酚對(duì)血小板聚集的影響[A];2003年全國(guó)微循環(huán)與血液流變學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2003年

2 宋建宏;;關(guān)于異丙酚在臨床中的應(yīng)用[A];第二十一屆航天醫(yī)學(xué)年會(huì)暨第四屆航天護(hù)理年會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2005年

3 徐禮鮮;;異丙酚輸注不良事件[A];全國(guó)第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

4 賀賽琳;李安民;張志文;傅相平;;藍(lán)斑核 2-腎上腺素受體在鼠異丙酚催眠反應(yīng)中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

5 付深省;聶艾格;曹克慎;鄭小泳;李振超;;異丙酚在無(wú)抽搐電休克治療麻醉中的應(yīng)用[A];二零零四年度全國(guó)精神病專(zhuān)業(yè)第八次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 張冰;葉麗莎;李軍;連慶泉;許瓏瓏;;異丙酚影響認(rèn)知功能的特性分析[A];2007年浙江省麻醉學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

7 謝玉波;;異丙酚對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白的影響[A];2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)麻醉學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 陳銘;朱晶;陳小剛;;異丙酚、芬太尼用于無(wú)痛內(nèi)鏡檢查的應(yīng)用[A];江西省第四次中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2011年

9 賀賽琳;李安民;張志文;傅相平;;異丙酚麻醉中皮層體感誘發(fā)電位變化的作用機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

10 魏光輝;涂生芬;王小毅;張華;吳盛德;柏林;袁心剛;何文飛;楊飛;;低氧狀態(tài)下異丙酚對(duì)未成熟中樞神經(jīng)系統(tǒng)影響的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 本報(bào)記者 唐聞佳;異丙酚“殺手”還是良藥[N];文匯報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫海靜;內(nèi)源性大麻素在異丙酚預(yù)處理致心臟保護(hù)效應(yīng)中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

2 林春水;異丙酚單次劑量和恒速靜脈注射在犬腦的攝取和分布[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

3 徐志新;血容量變化對(duì)血漿異丙酚濃度影響的試驗(yàn)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2004年

4 姚俊巖;經(jīng)腹主動(dòng)脈局部灌注異丙酚對(duì)脊髓缺血再灌注損傷作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

5 蓋成林;頸內(nèi)動(dòng)脈輸注異丙酚麻醉的可行性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

6 楊靜;異丙酚對(duì)大鼠皮層及皮層下中樞自發(fā)腦電和神經(jīng)遞質(zhì)釋放的影響[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

7 王江;體外循環(huán)中諸多因素對(duì)異丙酚血藥濃度影響的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

8 陶濤;異丙酚在成年神經(jīng)再生中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

9 周青山;異丙酚對(duì)嬰幼兒體外循環(huán)心臟手術(shù)患者心肌保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2004年

10 蔡勁松;異丙酚對(duì)全腦缺血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王暉;年齡因素對(duì)異丙酚與BIS量效關(guān)系的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 李培;異丙酚群體藥動(dòng)學(xué)及微透析采樣影響因素研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李瑩;基于衍生化—微順序注射光纖傳感異丙酚分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

4 宋丹;地西泮—異丙酚不同劑量配比對(duì)犬麻醉效果研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 陸潔;異丙酚生物樣品含量測(cè)定前處理方法的比較及其它影響因素的考察[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2007年

6 歐陽(yáng)銘文;靶控輸注異丙酚的腦攝取研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2001年

7 王增壽;異丙酚體內(nèi)濃度測(cè)定及其藥代動(dòng)力學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2006年

8 涂生芬;異丙酚和咪達(dá)唑侖對(duì)急性心肌梗死大鼠心臟功能的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2002年

9 羅瑞昌;復(fù)方異丙酚亞微乳劑的研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2007年

10 范瑩盈;經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈單次注射異丙酚藥效學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：2363814