【摘要】：目的探討電針內(nèi)關穴對大鼠體外循環(huán)(CPB)后心肌線粒體超微結(jié)構(gòu)和氧化應激反應的影響。方法成年SD大鼠60只,4~6月齡,體重320~420 g,雌雄不限,采用隨機數(shù)字表法,將大鼠隨機分為4組(n=15):假手術(shù)組(S組)、模型組(M組)、內(nèi)關穴組(EA組)和非穴組(EAN組)。采用尾動脈插管灌注,右頸靜脈插管引流建立CPB模型。S組僅行麻醉和動靜脈插管;M組行CPB 2 h;EA組和EAN組行CPB 2 h,且在CPB期間實施電針刺激,其中EA組取雙側(cè)內(nèi)關穴,EAN組取雙側(cè)內(nèi)關穴旁開0.5 cm處。麻醉復蘇后2 h,處死動物留取左心室心肌組織。透射電鏡下觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu),行線粒體損傷程度評分;采用黃嘌呤氧化法檢測心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法檢測心肌丙二醛(MDA)含量,高效液相色譜法測定心肌三磷酸腺苷(ATP)含量;采用差速離心法分離線粒體后,用二氯雙氫熒光素染色,在激光共聚焦顯微鏡下檢測線粒體活性氧簇(ROS)水平。結(jié)果與S組比較,其余3組線粒體損傷評分升高,心肌SOD活性和ATP含量下降,心肌MDA含量和線粒體ROS水平升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與M組比較,EAN組線粒體損傷評分,心肌SOD活性、MDA和ATP含量,線粒體ROS水平差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),EA組線粒體損傷評分下降,心肌SOD活性和ATP含量升高,心肌MDA含量和線粒體ROS水平下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與EAN組比較,EA組線粒體損傷評分下降,心肌SOD活性和ATP含量升高,心肌MDA含量和線粒體ROS水平下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論電針內(nèi)關穴可減輕大鼠CPB后心肌線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷,改善缺血心肌的能量代謝,其機制可能與減輕心肌線粒體氧化應激水平有關。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of electroacupuncture at Neiguan point on myocardial mitochondrial ultrastructure and oxidative stress after cardiopulmonary bypass (CPB) in rats. Methods 60 adult SD rats were randomly divided into 4 groups (n = 15): sham operation group (S group), model group (M group), Neiguan point group (EA group) and non-point group (EAN group). The CPB model was established by caudal artery intubation and right jugular vein drainage. Group S was treated only with anesthesia and arteriovenous intubation. Group M was treated with CPB 2 h EA group and EAN group with CPB 2 h, and with electroacupuncture stimulation during CPB. In the EA group, the bilateral Neiguan acupoints were taken at the side of Neiguan acupoints for 0.5 cm in the EAN group. Two hours after anaesthesia and resuscitation, the animals were sacrificed and left ventricular myocardial tissue was taken. The ultrastructure of myocardial tissue was observed under transmission electron microscope and the degree of mitochondrial damage was evaluated. The activity of superoxide dismutase (SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in myocardium were detected by xanthine oxidation method and thiobarbituric acid method respectively. The content of adenosine triphosphate (ATP) in myocardium was determined by high performance liquid chromatography (HPLC), and the (ROS) level of mitochondria was detected under confocal laser microscope after mitochondria were isolated by differential centrifugation and stained with dichlorodihydrofluorescein. Results compared with group S, the score of mitochondrial damage increased, the activity of SOD and ATP decreased, the content of MDA and ROS of mitochondria increased in the other three groups (P0.05), and compared with the group M, the score of mitochondrial damage in the other three groups was significantly higher than that in group M. There was no significant difference in myocardial SOD activity and ATP content, and there was no significant difference in mitochondrial ROS level (P0.05) in EA group, mitochondrial damage score decreased, myocardial SOD activity and ATP content increased, myocardial MDA content and mitochondrial ROS level decreased. The difference was statistically significant (P0.05); compared with the EAN group, the mitochondrial injury score of EA group decreased, myocardial SOD activity and ATP content increased, myocardial MDA content and mitochondrial ROS level decreased, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion electroacupuncture at Neiguan point can reduce the damage of myocardial mitochondria ultrastructure and improve the energy metabolism of ischemic myocardium after CPB in rats. The mechanism may be related to the reduction of oxidative stress level of myocardial mitochondria.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心血管病研究所手術(shù)麻醉室;
【基金】：廣西自然科學基金資助項目(編號:2013GXNSFBA019124)
【分類號】：R245

【參考文獻】

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本文編號：2224966