【摘要】：布比卡因是臨床局部麻醉和疼痛治療的常用藥物,但可引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡,從而產(chǎn)生神經(jīng)毒性,導(dǎo)致感覺和運(yùn)動(dòng)障礙,給患者的生產(chǎn)生活帶來明顯不良影響。醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明實(shí)施椎管內(nèi)麻醉的患者中有30%的患者發(fā)生了或輕或重的周圍神經(jīng)損傷,其中有0.01%的患者發(fā)生了嚴(yán)重的神經(jīng)損傷并發(fā)癥馬尾綜合/ 征。一項(xiàng)大樣本多中心前瞻性研究調(diào)查結(jié)果顯示,41,251例行蛛網(wǎng)膜下腔阻滯麻醉,35,379例行硬膜外麻醉和1,474例腰硬聯(lián)合麻醉的手術(shù)患者,嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)損傷并發(fā)癥的發(fā)生率約為1.8/10,000。在Rorarius等研究中有219例患者在蛛網(wǎng)膜下腔阻滯麻醉下行剖宮產(chǎn)術(shù),其使用的局麻藥均為重比重的布比卡因,此類患者短暫性神經(jīng)病學(xué)綜合征的發(fā)生率約為8.8%。外周神經(jīng)阻滯麻醉后發(fā)生神經(jīng)損傷并發(fā)癥的可能性比較大,Capdevila等研究結(jié)果顯示1416例行外周神經(jīng)阻滯麻醉的患者有3例發(fā)生了神經(jīng)損傷并發(fā)癥。為減少圍術(shù)期并發(fā)癥的發(fā)生和加速麻醉后的恢復(fù),特別是高齡患者的日益增多,臨床上神經(jīng)阻滯麻醉的應(yīng)用越來越多,局麻藥引起周圍神經(jīng)毒性損傷的報(bào)道也隨之增多。局麻藥周圍神經(jīng)毒性損傷的確切機(jī)制尚未完全闡明,但目前較為一致的觀點(diǎn)認(rèn)為：高濃度,大劑量的局麻藥作用于神經(jīng)組織和細(xì)胞時(shí),以及當(dāng)局麻藥與神經(jīng)長時(shí)間和近距離的接觸后,引起神經(jīng)毒性反應(yīng)的發(fā)生率明顯增高目前,相關(guān)學(xué)者根據(jù)所了解的局麻藥的周圍神經(jīng)毒性作用機(jī)制,研究藥物防治其周圍神經(jīng)毒性損傷,并由此探尋新的防治途徑,為進(jìn)一步深入進(jìn)行該領(lǐng)域的研究提供參考。姜黃素是一種低分子量多酚化合物,具有多方面的藥理作用,在基因和細(xì)胞信號通路等多水平上具有抗氧化應(yīng)激、抗炎以及調(diào)節(jié)凋亡等方面的作用,其作用機(jī)制可能有調(diào)節(jié)腦神經(jīng)遞質(zhì)如γ-氨基丁酸、5-羥色胺、乙酰膽堿和多巴胺等的生成和釋放、調(diào)控機(jī)體生理反應(yīng)如下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸的應(yīng)激狀態(tài)、增加親神經(jīng)營養(yǎng)因子的濃度等以增加神經(jīng)細(xì)胞和組織再生的可能性,激活腦內(nèi)多種信號傳導(dǎo)通路引發(fā)級聯(lián)反應(yīng),觸發(fā)相關(guān)的多種反應(yīng),減少神經(jīng)元凋亡,降低體內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(reactive oxygen species) ROS水平,抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng),從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。Zhuang等的研究結(jié)果表明在大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的體外模型中,姜黃素可以減輕第三丁基過氧化氫誘導(dǎo)產(chǎn)生的神經(jīng)細(xì)胞損傷作用,發(fā)現(xiàn)姜黃素預(yù)處理組的神經(jīng)細(xì)胞凋亡陽性率明顯減少,增強(qiáng)了Bcl-2/Bax和Fos表達(dá)水平,抑制了JUN和核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子NF-KB表達(dá)水平,大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞存活率明顯上升,細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ROS)的生成明顯降低,還原型谷胱甘肽(GSH)含量增加。該研究結(jié)果說明姜黃素在體外可以通過抗氧化過脂質(zhì)反應(yīng),減少自由基的生成和蓄積來減少氧化應(yīng)激發(fā)生時(shí)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡和壞死。在孕鼠培養(yǎng)原代大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)中,Lin MS等發(fā)現(xiàn)姜黃素對SD大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞有神經(jīng)保護(hù)作用,其可能的機(jī)制包括P13K和MAPK信號傳導(dǎo)通路被激活,引起ANTES在星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)水平明顯升高,同時(shí),星形膠質(zhì)細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase, iNOS)的活性降低,從而減少神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。研究表明,Aβ誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),引起線粒體結(jié)構(gòu)破壞和功能紊亂,凋亡相關(guān)蛋白(如細(xì)胞色素C、caspase-3、caspase-9和Bax等)的活化,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。姜黃素預(yù)處理可以活化神經(jīng)細(xì)胞抗氧化酶系并提高其表達(dá)水平,降低Aβ誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),穩(wěn)定線粒體膜電位,觸發(fā)一系列的神經(jīng)保護(hù)反應(yīng),從而減弱Aβ導(dǎo)致的神經(jīng)損傷。在中樞神經(jīng)系統(tǒng),姜黃素仍有廣泛的作用靶點(diǎn),其神經(jīng)保護(hù)作用可能與促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平、Nrf2的核內(nèi)轉(zhuǎn)移和調(diào)節(jié)腦內(nèi)多種信號級聯(lián)反應(yīng)等有關(guān),但至今其確切機(jī)制仍未闡明。因此,其他蛋白基因、細(xì)胞因子或信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等是否參與了姜黃素的神經(jīng)保護(hù)作用仍需要進(jìn)一步的深入研究。SH-SY5Y細(xì)胞是人類神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞亞系中結(jié)構(gòu)和形態(tài)以及生化特性、比較穩(wěn)定的一類神經(jīng)終端分化細(xì)胞,適合在體外長時(shí)間培養(yǎng),而且臨床上神經(jīng)系統(tǒng)疾病大都與神經(jīng)元細(xì)胞調(diào)亡有關(guān),所以SH-SY5Y細(xì)胞常用于構(gòu)建神經(jīng)細(xì)胞損傷模型,廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制和預(yù)防的研究。在本實(shí)驗(yàn)中,SH-SY5Y細(xì)胞繁殖速度快,具有神經(jīng)瘤樣細(xì)胞特點(diǎn),細(xì)胞形態(tài)小而圓,軸突較短,細(xì)胞質(zhì)較少,有呈簇狀生長的樹突樣突起,細(xì)胞生長狀態(tài)良好,能為下一步細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定的細(xì)胞來源。因此,本研究采用人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞構(gòu)建布比卡因損傷模型。已有研究證實(shí),細(xì)胞內(nèi)和線粒體產(chǎn)生的ROS在局麻藥所致的神經(jīng)組織和細(xì)胞損傷中起到非常重要的病理生理作用,ROS的爆發(fā)性增高可能是導(dǎo)致神經(jīng)組織細(xì)胞急性損傷的主要因素之一。局麻藥引起人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞ROS水平急速升高的可能原因與ATP生成減少,單磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)通路的激活有關(guān)。有研究表明姜黃素能作用于細(xì)胞內(nèi)的抗氧化系統(tǒng),增強(qiáng)抗氧化蛋白PRDX3 (Peroxiredoxin3)的表達(dá)�？寡趸鞍譖RDX3屬于Peroxiredoxin抗氧化蛋白超家族,其催化活性和蛋白基因序列與其它抗氧化劑完全不同,因此它在清除活性氧族過程中所起到的作用也不同,所以成為近年來研究的熱點(diǎn)。最新研究表明,該家族在細(xì)胞抗氧化、調(diào)控與過氧化氫相關(guān)的細(xì)胞通路、影響細(xì)胞分化和增殖、免疫反應(yīng)及神經(jīng)細(xì)胞凋亡等方面具有多重功能,在細(xì)胞抗氧化防御體系及維持線粒體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)過程中發(fā)揮重要作用�？寡趸鞍譖RDX3是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類硫氧還蛋白依賴性過氧化物還原酶,它在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成后經(jīng)過線粒體定位信號轉(zhuǎn)運(yùn)至線粒體,而后存在于細(xì)胞線粒體基質(zhì)內(nèi),是線粒體特有的過氧化物酶,其主要作用是通過硫氧還蛋白還原過氧化物或超氧化物達(dá)到清除線粒體內(nèi)過氧化物的目的,從而減少ROS的產(chǎn)生。其生物學(xué)功能還包括調(diào)控細(xì)胞的活力；維持對氧自由基的敏感性；調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)過氧化氫的濃度；促發(fā)細(xì)胞因子信號的級聯(lián)放大反應(yīng)等。在應(yīng)激條件下,PRDX3表達(dá)水平增高,細(xì)胞內(nèi)過多的氧自由基分子被清除。體外研究表明,小鼠巨噬細(xì)胞PRDX3表達(dá)水平在過氧化物的刺激下上升,巨噬細(xì)胞在抗氧化能力明顯改善。Nonn等在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)234567胸腺瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染PRDX3蛋白后,組織對缺氧的耐受能力和抵抗藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞凋亡的能力顯著提高,而培養(yǎng)細(xì)胞自身的凋亡率沒有改變,該實(shí)驗(yàn)證明了PRDX3的強(qiáng)抗氧化作用。但姜黃素的抗氧化應(yīng)激作用是否通過增加PRDX3蛋白的表達(dá)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,目前尚不清楚。蘇氨酸-絲氨酸蛋白激酶B (Threonine-serine protein kinase B, Akt)信號通路是由磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)始動(dòng)的生物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,Akt是鼠類胸腺瘤病毒V-Akt致癌基因的同源物,因與蛋白激酶A和蛋白激酶C高度同源,故也稱為蛋白激酶B(protein kinase B, PKB)。Akt通過最小識別序列識別其下游底物,其磷酸化位點(diǎn)包括2個(gè)結(jié)構(gòu)相似的AGC激酶、p90核糖體蛋白s6激酶(90 kDa ribosomal s6 kinase, p90RSK)和p70核糖體蛋白s6激酶(70 kDa ribosomal s6 kinase, p70S6K)。Akt處于該通路的中心環(huán)節(jié),其功能涉及細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期調(diào)控、凋亡啟動(dòng)、血管生成、端粒酶活性和細(xì)胞侵襲性等諸方面,并在保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞功能障礙和凋亡過程中發(fā)揮重要的作用。其保護(hù)神經(jīng)元存活的機(jī)制主要包括：(1)通過神經(jīng)營養(yǎng)素如神經(jīng)生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子等減少神經(jīng)細(xì)胞生長錐萎陷等細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變,從而抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡;(2)通過磷酸化作用激活下游底物胱天蛋白酶(caspase)、p53、CREB和FHKRL1等減少細(xì)胞凋亡；(3)通過線粒體途徑調(diào)控神經(jīng)細(xì)胞凋亡；(4)通過紅細(xì)胞生成素(erythropoietin, EPO)/紅細(xì)胞生成素受體((erythro-poietin receptor, EPOR)系統(tǒng)抑制神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。Bhavana等體外研究結(jié)果顯示激活A(yù)kt信號通路能減輕谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡。有在體實(shí)驗(yàn)表明激活A(yù)kt信號通路能減輕糖尿病大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡。國內(nèi)丁正年等人的相關(guān)研究證實(shí),Akt信號通路與布比卡因誘導(dǎo)大鼠成神經(jīng)細(xì)胞瘤2a細(xì)胞凋亡的保護(hù)機(jī)制有關(guān)。因此,我們推測Akt信號通路可能與布比卡因的神經(jīng)損傷作用密切相關(guān)。本科研小組構(gòu)建布比卡因損傷人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞模型,通過細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞內(nèi)ROS水平以及線粒體膜電位等指標(biāo)的變化明確姜黃素的神經(jīng)保護(hù)作用；同時(shí)探討Akt信號通路的激活是否與姜黃素的神經(jīng)保護(hù)作用有關(guān),而且運(yùn)用小干擾RNA等分子生物學(xué)技術(shù)研究PRDX3蛋白在姜黃素減輕布比卡因所致的SH-SY5Y細(xì)胞的損傷中的作用。本研究明確其機(jī)制有利于今后減輕圍手術(shù)期患者應(yīng)用局麻藥后神經(jīng)毒性損傷,也為臨床麻醉防治局麻藥神經(jīng)損傷提供了新的靶點(diǎn)和思路,為臨床防治局麻藥神經(jīng)損傷提供新的理論依據(jù)。第1章布比卡因損傷SH-SY5Y細(xì)胞模型的構(gòu)建目的構(gòu)建布比卡因損傷SH-SY5Y細(xì)胞模型。方法體外培養(yǎng)SHSY5Y細(xì)胞,分為6組,C組為對照組(未經(jīng)藥物處理),Bup0.5～Bup2.5組(分別用0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mM布比卡因的培養(yǎng)液處理24h)。觀察細(xì)胞形態(tài),采用MTT法檢測細(xì)胞活力,TUNEL檢測細(xì)胞凋亡,確定布比卡因的適宜濃度,建立布比卡因細(xì)胞損傷模型。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析,細(xì)胞活力和凋亡率組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。 P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果布比卡因處理24h后,各實(shí)驗(yàn)組不同濃度的布比卡因?qū)H-SY5Y細(xì)胞活力均有明顯影響,細(xì)胞活力明顯下降,且隨劑量增加,細(xì)胞活力下降明顯增加。Bupi0.5～Bupi2.5組細(xì)胞活力分別下降至82%、70%、53%、43%和25%。各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在布比卡因處理后細(xì)胞凋亡率明顯增加,且隨著濃度的增加,細(xì)胞凋亡率也明顯增加。Bup0.5～Bup2.5組細(xì)胞凋亡率分別為20%、26%、37%51%和62%。0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mM。結(jié)論布比卡因?qū)H-SY5Y細(xì)胞有損傷作用,且隨濃度的增加,損傷程度加重。在本實(shí)驗(yàn)中,我們測得布比卡因LD50為1.477 mM,所以我們選擇1.5mM布比卡因建立SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型。第2章姜黃素對布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用目的確定對布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷有保護(hù)作用的姜黃素濃度。方法體外培養(yǎng)SHSY5Y細(xì)胞,分為12組,C組為對照組(未經(jīng)藥物處理),Bup組(各組Bup濃度均為1.5mM),Bup+Cur0.5組,Bup+Cur1.0組, Bup+Cur2.0組,Bup+Cur5組,Bup+Cur10組(在布比卡因培養(yǎng)液處理細(xì)胞之前加入姜黃素處理24h),Curo.5組,Curl.o組,Cur2.o組,Cur5組,Cur1o組(僅加入姜黃素處理24h)。觀察細(xì)胞形態(tài),采用MTT法檢測細(xì)胞活力,TUNEL檢測細(xì)胞凋亡,確定布姜黃素對布比卡因神經(jīng)毒性的保護(hù)作用,并確定有保護(hù)作用的姜黃素濃度。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析,組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果姜黃素預(yù)處理24h后,對各實(shí)驗(yàn)組SH-SY5Y細(xì)胞活力均有明顯影響。Bup+CuT0.5～Bup+Cur10組細(xì)胞活力分別為70%,90%,75%,60%,52%。Cur0.5～Cur10組細(xì)胞活力分別為98%,99%,85%,65%,58%。對照組、Cur1.0組、Bup組和Bup+Cur10組細(xì)胞凋亡率分別為10%,11%,32%和20%。與Bup組比較,Bup+Cur1.0組細(xì)胞凋亡率明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1 μM和2μM的姜黃素預(yù)處理24h后明顯減輕布比卡因?qū)е碌募?xì)胞活力降低,5μM和10 μM的姜黃素沒有細(xì)胞保護(hù)作用。而且1 μM和2 μM的姜黃素的神經(jīng)保護(hù)作用無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但與對照組比較,姜黃素濃度為2μM時(shí)細(xì)胞毒性明顯增加,所以我們確定姜黃素對布比卡因神經(jīng)毒性有保護(hù)作用,并選擇姜黃素濃度為1μM進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。第3章Akt信號通路在姜黃素減輕布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷中的作用目的探討Akt信號通路是否與姜黃素對布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用有關(guān)。方法體外培養(yǎng)SHSY5Y細(xì)胞,分為6組,C組為對照組(未經(jīng)藥物處理),Bup組,Cur組,Bup+Cur組,Bup+Tri組,Bup+Cur+Tri組(在布比卡因培養(yǎng)液予以Akt特異性阻斷劑triciribine 1μM處理30min,再入姜黃素處理布比卡因培養(yǎng)液24h)。采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞ROS水平和線粒體膜電位、TUNEL檢測細(xì)胞凋亡、蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2、 caspase-9表達(dá)水平,檢測PRDX3蛋白表達(dá)水平和mRNA水平,并進(jìn)行了PRDX3免疫熒光檢測。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析,組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果姜黃素預(yù)處理24h后,布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷減輕。Bup組p-Akt/Akt約為0.3,與Bup+Cur組比較,明顯降低；Bup組Bcl-2/Bax值約為0.55,與Bup+Cur組比較,明顯降低；Bup組Casepase-9/GAPDH約為1.8,與Bup+Cur組比較,明顯升高降低。與Bup+Cur組比較,Bup+Cur+Tri組p-Akt/Akt值約為0.6,明顯降低;Bup+Cur+Tri組Bcl-2/Bax值約為0.6,顯著降低；Bup+Cur+Tri組Casepase-9/GAPDH約為2.1,顯著升高。與Bup組比較,Bup+Cur組線粒體ROS水平明顯降低；與Bup+Cur組比較,Bup+Cur+Tri組線粒體ROS水平明顯升高。與C組比較,Bup組和Bup+Tri組PRDX3蛋白表達(dá)水平和mRNA水平均明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與Bup組比較,Bup+Cur組PRDX3蛋白表達(dá)水平和mRNA水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與Bup+Cur組比較,Bup+Cur+Tri組PRDX3表達(dá)蛋白水平和mRNA水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論Akt信號通路的激活與姜黃素減輕布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷有關(guān)。第4章PRDX3蛋白在姜黃素減輕布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷中的作用目的探討姜黃素對布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用是否與增強(qiáng)抗氧化蛋白PRDX3有關(guān)方法采用小干擾mRNA技術(shù)培養(yǎng)Prdx3siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞,分為3組,Prdx3siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞(對照組C組)、Prdx3siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞+Bup組(Bup組),Cur+Prdx3siRNA細(xì)胞+Bup (Bup+Cur組)。Cur組加入加入姜黃素處理24h,除去姜黃素后再加入1.5mM布比卡因24h。采用TUNEL檢測細(xì)胞凋亡、蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測PRDX3 Bcl-2, Bax和caspase-9蛋白表達(dá)水平,q-PCR檢測PRDX3mRNA表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析,組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果與C組比較,Bup組PRDX3表達(dá)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Bup+Cur組PRDX3表達(dá)略有減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與C組比較,Bup組Bax蛋白表達(dá)水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Bup+Cur組蛋白表達(dá)水平略有減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與C組比較,Bup組Bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Bup+Cur組蛋白表達(dá)水平略有減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與C組比較,Bup組caspase-9蛋白表達(dá)水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Bup+Cur組蛋白表達(dá)水平略有減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 姜黃素對布比卡因誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用與抗氧化蛋白PRDX3表達(dá)水平增強(qiáng)有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614

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本文編號：2183189