【摘要】：目的:觀察肝祖細胞(HPCs)移植后不同濃度四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的急性肝衰竭小鼠模型肝臟修復(fù)情況,評價HPCs對肝損傷的修復(fù)能力,為評估HPCs移植療效建立理想的肝衰竭模型。方法:96只ICR小鼠隨機分為空白對照組、陰性對照組(0.1%CCl4組、0.5%CCl4組、2.0%CCl4組、10.0%CCl4組)和實驗組(0.1%CCl4+HPCs組、0.5%CCl4+HPCs組、2.0%CCl4+HPCs組和10.0%CCl4+HPCs組)�？瞻讓φ战M小鼠灌胃給予生理鹽水,陰性對照組和實驗組小鼠灌胃給予不同劑量CCl4。CCl4造模后1d,將實驗組和陰性對照組小鼠常規(guī)麻醉后切開腹腔,實驗組小鼠經(jīng)脾臟注射HPCs,陰性對照組小鼠注射等劑量無菌生理鹽水。動態(tài)觀察小鼠生命體征,監(jiān)測其存活率;采血檢測小鼠血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性;取肝臟計算肝臟指數(shù);HE染色觀察各組小鼠肝臟組織病理學(xué)變化;Hoechst33342標(biāo)記外源性HPCs,激光共聚焦顯微鏡檢測移植HPCs在肝臟中的分布情況及肝臟標(biāo)志蛋白細胞角蛋白18(CK18)和白蛋白(ALB)的表達。結(jié)果:與空白對照組比較,0.1%和0.5%CCl4組小鼠存活率、肝臟指數(shù)、AST和ALT活性無明顯變化(P0.05)。病理學(xué)檢測,肝細胞有自我修復(fù)作用,HPCs移植治療的效果不明顯。與2.0%CCl4組比較,2.0%CCl4+HPCs組小鼠AST和ALT活性及肝臟指數(shù)降低(P0.01),存活率增加(P0.01);病理學(xué)檢測可見肝細胞再生和大量外源性肝細胞,CK18和ALB表達與內(nèi)源性肝細胞相當(dāng),HPCs移植治療有效。10.0%CCl4組和10.0%CCl4+HPCs組小鼠2d內(nèi)全部死亡,無法評估HPCs的治療效果。結(jié)論:HPCs移植可提高急性肝衰竭模型小鼠存活率,改善AST和ALT活性,對肝損傷具有較強的修復(fù)能力;且2.0%CCl4誘導(dǎo)的ICR小鼠急性肝衰竭模型能有效反映HPCs移植治療的效果。
[Abstract]:Aim: to observe the liver repair of acute hepatic failure mice induced by carbon tetrachloride (CCl4) at different concentrations after transplantation of hepatic progenitor cells (HPCs), and to evaluate the repair ability of HPCs on liver injury, so as to establish an ideal liver failure model for evaluating the effect of HPCs transplantation. Methods Ninety-six ICR mice were randomly divided into control group, negative control group (0.1l4 group, 0.5l4 group, 2.0l4 group, 10.0l4 group) and experimental group (0.1l4 HPCs group, 0.5l4 HPCs group, 2.0l4 HPCs group and 10.0l4 HPCs group). Mice in blank control group were given normal saline by stomach, mice in negative control group and experimental group were given different doses of CCL _ 4 by intragastric perfusion for 1 day. Mice in experimental group and negative control group were treated with routine anesthesia and were treated intraperitoneally. Mice in the experimental group were injected with HPCs through spleen, and mice in the negative control group were injected with the same dose of aseptic saline. The vital signs and survival rate of mice were observed dynamically, and the activities of aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (alt) in serum were measured. The hepatic histopathological changes of mice in each group were observed by HE staining. HPCs were labeled with Hoechst33342. The distribution of transplanted HPCs in the liver and the expression of cytokeratin 18 (CK18) and cytokeratin 18 (CK18) were detected by confocal laser microscopy. The expression of albumin (ALB). Results: compared with the blank control group, the survival rate, liver index and alt activity of mice in 0.1% and 0.5l4 groups were not significantly changed (P0.05). Pathological examination showed that the effect of HPCs transplantation was not obvious. Compared with 2.0l4 group, the activity of AST and alt and liver index in 2.0l4 HPCs group were decreased (P0.01), the survival rate was increased (P0.01), and histopathological examination showed that hepatocyte regeneration and the expression of CK18 and ALB in a large number of exogenous hepatocytes were similar to those of endogenous hepatocytes. The mice in 10.0l4 group and 10.0l4 HPCs group died within 2 days. The therapeutic effect of HPCs could not be evaluated. Conclusion the transplantation of 2.0l4 can improve the survival rate of mice with acute liver failure, improve the activities of AST and alt, and can repair the liver injury, and the model of acute liver failure induced by 2.0l4 can effectively reflect the effect of transplantation.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室兒科學(xué)重慶市重點實驗室重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院干細胞研究室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助課題(81100309)
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 楊永平;周霖;馬威;王華明;馬雪梅;馮永毅;王福生;蘇淑慧;王春平;安林靜;齊冬穎;劉道踐;;肝細胞移植治療重型肝炎臨床觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

2 劉長海;華春秀;歸改霞;劉錦輝;李賀文;夏西超;;和厚樸酚對小鼠四氯化碳肝損傷的保護作用[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

3 趙曉彪;明玉玲;陳平;;肝切除術(shù)后肝臟再生的研究進展[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

4 閻向東,童英,鄭珊,高珊,熊小燕;急性四氯化碳致大、小鼠肝損害程度的比較[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2005年08期

5 Giada Pietrosi;Giovanni Battista Vizzini;Salvatore Gruttadauria;Bruno Gridelli;;Clinical applications of hepatocyte transplantation[J];World Journal of Gastroenterology;2009年17期

6 ;Embryonic hepatocyte transplantation for hepatic cirrhosis:Efficacy and mechanism of action[J];World Journal of Gastroenterology;2012年04期

7 童方念;羅超;羅丹;吳藝芳;駱明旭;王漢琴;孫設(shè)宗;王玨;朱名安;趙萬紅;;山奈酚對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護作用[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年06期

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 苗明三;苗艷艷;魏榮銳;;大棗多糖對CCl_4所致大、小鼠肝損傷模型的保護作用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2011年09期

2 張敏;劉振文;張玲霞;;肝細胞移植的臨床應(yīng)用及前景[J];傳染病信息;2010年06期

3 胡敏;;肝臟干細胞與肝臟再生[J];傳染病信息;2011年03期

4 宋閩寧;宋嶼娜;陳福;駱梅蘭;;大鼠急性與慢性肝衰竭肝性腦病模型對照研究[J];東南國防醫(yī)藥;2006年05期

5 何萍;黃仁彬;林軍;陳祝英;李雪芬;羅殿中;;乙肝轉(zhuǎn)陰散對小鼠四氯化碳急性肝損傷的保護作用[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年05期

6 ;Advances in cell sources of hepatocytes for bioartificial liver[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2012年06期

7 王媛媛;聶青和;;細胞移植在肝衰竭治療中的應(yīng)用價值[J];實用肝臟病雜志;2013年01期

8 Sundaram Ravikumar;Murugesan Gnanadesigan;;Hepatoprotective and antioxidant activity of a mangrove plant Lumnitzera racemosa[J];Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine;2011年05期

9 吳桐菲;楊艷玲;;精氨酸血癥的臨床與分子遺傳學(xué)研究進展[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2013年11期

10 Jin-Feng Yang;Hong-Cui Cao;Qiao-Ling Pan;Jiong Yu;Jun Li;Lan-Juan Li;;Mesenchymal stem cells from the human umbilical cord ameliorate fulminant hepatic failure and increase survival in mice[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2015年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 劉金霞;新型乙型肝炎病毒載體的構(gòu)建及初步應(yīng)用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

2 竇志華;復(fù)方五仁醇膠囊藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2007年

3 季茹;肝臟脫細胞生物支架的制備及誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞肝向分化的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 潘小平;永生化人肝星狀細胞系的建立及其對肝細胞功能與肝祖細胞分化的影響[D];浙江大學(xué);2013年

5 臧金鋒;HGF/c-Met相關(guān)信號通路在大鼠肝臟祖細胞增殖中的作用[D];蘇州大學(xué);2014年

6 袁淑芳;骨髓間充質(zhì)干細胞治療大鼠急性肝衰竭的作用研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

7 蔡雄;混合型肝細胞—膽管細胞癌發(fā)生機制及臨床意義的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 向?qū)?細胞周期因子FoxM1促進肝臟再殖的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊欣;乙肝轉(zhuǎn)陰顆粒對化學(xué)性肝損傷和慢性肝纖維的保護作用及其機制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 劉颯華;兔脾內(nèi)肝細胞移植的磁共振活體示蹤研究[D];南華大學(xué);2011年

3 楊玲玲;大鼠同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療急性肝衰竭的實驗研究[D];南昌大學(xué);2011年

4 魏蘋;新的肝細胞生長因子-HPPCn的分離純化及其生物學(xué)活性的研究[D];合肥工業(yè)大學(xué);2007年

5 趙錦燕;粗葉懸鉤子抗肝損傷類活性成分對CCl_4損傷大鼠肝細胞的影響[D];福建中醫(yī)學(xué)院;2008年

6 何貴清;原代大鼠肝細胞脾內(nèi)移植聯(lián)合CsA治療急性肝衰竭的實驗研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2009年

7 趙磊;骨髓間充質(zhì)干細胞向肝細胞分化的誘導(dǎo)和肝細胞極化分子表達與調(diào)節(jié)[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

8 盧丹;赤芍保肝退黃藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2010年

9 馮淵;經(jīng)大鼠脾動脈肝細胞移植的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

10 潘金鋒;基于分子分型的肝細胞腺瘤臨床及病理特征分析[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 彭福江;屈丹丹;郭亞兵;;臭氧化鹽水對四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷的保護作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年03期

2 陳偉;林冠文;張青;;和厚樸酚誘導(dǎo)人非霍奇金淋巴瘤Raji細胞凋亡及其可能機制[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年11期

3 陳衛(wèi)華;郭松超;;肝臟損傷動物模型及觀察指標(biāo)研究現(xiàn)狀[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年01期

4 張燕玲;薛小平;;山萘酚的作用機理研究[J];化學(xué)與生物工程;2011年12期

5 劉偉萍;金國平;陳培波;王彥平;何偉;裴廣軍;張洪權(quán);;山藥水提物對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的改善作用[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年05期

6 金黎明;楊艷;劉萬順;韓寶芹;田文杰;范圣第;;氨基葡萄糖對CCl_4所致小鼠肝損傷的改善作用[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年01期

7 王向軍;;五味草水提物與醇提物預(yù)處理對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護作用[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年01期

8 周霖,薛毅瓏,田磊,李雁凌,張佐云;大規(guī)模豬肝細胞低溫保存方法的建立[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2003年09期

9 林英;朱曦;么改琦;阿拉塔;楊燕琳;;重組人生長激素對腸源性內(nèi)毒素血癥大鼠急性肝損傷的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

10 龔慧賓;沈中陽;宋紅麗;鄭衛(wèi)萍;董沖;宋曉靜;張靜;;骨髓間充質(zhì)干細胞促進大鼠80%肝切除后殘肝再生及修復(fù)作用的研究[J];天津醫(yī)藥;2011年02期

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 江軍;急性肝衰竭的治療進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2000年04期

2 吳其愷,楊大國,張炳堯,何清,樂曉華;促肝細胞生長素顆粒劑對大鼠急性肝衰竭的防護作用(摘要)[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2000年S1期

3 張春平;肥胖婦女亞急性肝衰竭[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2003年12期

4 呂颯,劉沛;急性肝衰竭時腦水腫的發(fā)病機制[J];國外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊;2004年03期

5 韓國榮;余敏敏;唐迅;楊龍濤;岳欣;吳凱華;;妊娠合并急性肝衰竭10例分析[J];江蘇醫(yī)藥;2006年03期

6 劉芳;陳少紅;范新娟;唐芳;趙國強;;急性肝衰竭模型構(gòu)建及細胞移植途徑初探[J];南華大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

7 黃瑜;陳永平;許爛漫;高峰;王曉東;;動態(tài)監(jiān)測Toll樣受體4 CD14在大鼠急性肝衰竭中的變化[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2007年02期

8 王曉今;;急性肝衰竭的病因及預(yù)后[J];肝臟;2007年S1期

9 王吉耀;徐傳濤;;急性肝衰竭的治療進展[J];臨床肝膽病雜志;2007年05期

10 王方;張小崗;云升浩;張靜;;搶救急性肝衰竭患者成功1例[J];實用肝臟病雜志;2009年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 許爛漫;陳永平;王曉東;黃瑜;高峰;;血管內(nèi)皮生長因子在急性肝衰竭大鼠中的變化及意義[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

2 張南;鄧國宏;王宇明;;重慶地區(qū)急性肝衰竭病因和結(jié)局分析[A];病毒性肝炎慢性化、重癥化基礎(chǔ)與臨床研究進展學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

3 許爛漫;陳永平;王曉東;黃瑜;高峰;;血管內(nèi)皮生長因子在急性肝衰竭大鼠中的變化及意義[A];第十八次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

4 許爛漫;陳永平;王曉東;黃瑜;高峰;;血管內(nèi)皮生長因子在急性肝衰竭大鼠中的變化及意義[A];第二屆傳染病診治高峰論壇暨2009年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

5 李汛;何燦明;王魯文;龔作炯;;組蛋白去乙酰化酶2在急性肝衰竭大鼠的表達[A];全國第3屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

6 王寶恩;;急性肝衰竭[A];2000年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

7 吳其愷;楊大國;張炳堯;何清;樂曉華;;促肝細胞生長素顆粒劑對大鼠急性肝衰竭的防護作用(摘要)[A];第九次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

8 唐錫爾;;急性肝衰竭研究進展[A];浙江省中醫(yī)藥學(xué)會肝病專業(yè)委員會2006年年會暨慢性乙型肝炎診治研討會論文集[C];2006年

9 高澤立;;急性肝衰竭肝細胞損傷機制與治療進展[A];廣東省肝臟病學(xué)會2007年年會論文集[C];2007年

10 郭利民;;急性肝衰竭并發(fā)MODS的治療[A];第一屆全國人工肝及血液凈化學(xué)術(shù)年會暨全國人工肝及血液凈化攻關(guān)協(xié)作組成立大會論文集[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前3條

1 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍傳染病研究所 張緒清 毛青;急性肝衰竭 救治理念獲更新[N];健康報;2012年

2 蕭紅;急性肝衰竭的診治[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2009年

3 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院急診科 教授 羅學(xué)宏;感冒藥致急性肝衰竭一例[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 徐旭雯;粒細胞集落刺激因子治療急性肝衰竭的實驗研究[D];中南大學(xué);2006年

2 劉鳳超;急性肝衰竭模型鼠肝細胞凋亡機制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

3 郝彥琴;骨髓間充質(zhì)干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 姜雪強;脂氧素對急性肝衰竭的保護作用及其作用機制探討[D];華中科技大學(xué);2011年

5 李俊剛;可回復(fù)永生化人胎肝細胞系的建立及其移植預(yù)防小鼠急性肝衰竭[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

6 周一鳴;干細胞分化及其對急性肝衰竭大鼠治療的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

7 余立敏;茵陳澤蘭方對急性肝衰竭大鼠肝損傷及肝再生的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張海鳴;甲狀腺激素對急性肝衰竭大鼠肝細胞的保護作用[D];江蘇大學(xué);2010年

2 馬俊苓;生長激素對大鼠急性肝衰竭的影響其機制的初步探討[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

3 周鵬程;微囊懸浮型流化床式生物人工肝治療急性肝衰竭豬的血清代謝組學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2012年

4 趙欣;急性肝衰竭小鼠腸黏膜通透性變化機制及微生態(tài)制劑的保護作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

5 李憲;血液灌流聯(lián)合血液濾過治療犬急性肝衰竭的實驗研究[D];暨南大學(xué);2010年

6 黃建偉;四氯化碳構(gòu)建犬急性肝衰竭模型及血液凈化效果探索[D];暨南大學(xué);2010年

7 奉婷;臍帶間充質(zhì)干細胞對急性肝衰竭的修復(fù)及移植途徑的優(yōu)化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

8 焦明靜;過氧化物酶體增殖物激活受體α對急性肝衰竭的保護作用與機制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

9 劉志紅;非生物型人工肝對急性肝衰竭炎性介質(zhì)的清除作用與生存影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

10 王凱;非生物型組合人工肝治療急性肝衰竭動物高顱壓的實驗研究[D];鄭州大學(xué);2006年

，

本文編號：2119528