本文選題：燒傷 + 海水��； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：研究背景我國實(shí)行改革開放以來,航海事業(yè)迅速發(fā)展,隨著我國海軍走向深藍(lán),各種反恐作戰(zhàn)、打擊海盜、海上救援等活動日益增多,海上作業(yè)人員遭受意外創(chuàng)傷、燒傷、海難的風(fēng)險隨之增加。燒傷患者遭受海水浸泡后不僅心、肝、肺、腎等重要器官會發(fā)生明顯病理學(xué)改變,燒傷創(chuàng)面也同樣可以加重?fù)p傷。以往實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)對海水浸泡后大鼠燒傷創(chuàng)面的內(nèi)皮細(xì)胞損傷、微循環(huán)障礙等進(jìn)行研究,提出了早期創(chuàng)面處理原則及方案,雖然實(shí)驗(yàn)證實(shí)淡水沖洗能夠減輕損害程度,但方法仍顯不足。海水浸泡加深創(chuàng)面的主要原因?yàn)楦邼B、高鈉、高氯、高含菌量、低溫、偏堿性等特殊的理化性質(zhì),其加重了燒傷創(chuàng)面微循環(huán)障礙,加重的組織水腫程度,使創(chuàng)面進(jìn)行性加深,壞死范圍增大,治療難度增加。燒傷后大量清水腫液漏出導(dǎo)致的局部組織水腫,組織腫脹使細(xì)胞間隙增大,對細(xì)胞間的物質(zhì)交換造成阻礙。壓迫局部微血管對組織灌注造成阻礙,引起創(chuàng)面缺血低氧,阻礙創(chuàng)面愈合。壓迫創(chuàng)傷局部的淋巴管,使回流障礙,加重組織水腫。負(fù)壓施加于創(chuàng)面后,可以及時地清除滲出物,減少局部滲出液體在創(chuàng)面的積聚。同時負(fù)壓作用于燒傷創(chuàng)面,可有效地減少滲出的血清和水腫液漏出到燒傷創(chuàng)面的淤滯帶和凝固帶,從而減輕局部組織水腫,防止燒傷創(chuàng)面的進(jìn)行性加深。燒傷創(chuàng)面循環(huán)障礙以及所引起的組織缺血缺氧是影響創(chuàng)面愈合的原因之一,微血管栓塞、血流不暢,導(dǎo)致氧氣及修復(fù)創(chuàng)面所需營養(yǎng)難以到達(dá)損傷創(chuàng)面,而創(chuàng)面細(xì)胞破壞產(chǎn)生的碎片及炎癥物質(zhì)不能及時被轉(zhuǎn)運(yùn)出來。有動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)負(fù)壓封閉引流治療后局部創(chuàng)面血管的直徑擴(kuò)大、血管的分布密度增加,負(fù)壓創(chuàng)面血流灌注增加,且創(chuàng)傷修復(fù)的不同過程中血流量有不同的變化。肝素是一種氨基葡聚糖(GAG),在體內(nèi)及體外均可發(fā)揮強(qiáng)效抗凝血作用,肝素抗凝、溶栓的機(jī)理是通過與抗凝血酶結(jié)合及激活肝素輔助因子,催化滅活多種凝血因子,產(chǎn)生抗凝活性。臨床觀察發(fā)現(xiàn),肝素應(yīng)用于燒傷創(chuàng)面后可加快缺血組織血液供應(yīng)的恢復(fù)。在使用24小時后即有血管再生征象,首先在燒傷后發(fā)白的皮膚表面出現(xiàn)散在細(xì)小紅點(diǎn),隨著紅點(diǎn)數(shù)量及密度的增加,逐漸形成血管床,并逐漸建立血液循環(huán),燒傷后發(fā)生瘀滯、栓塞的缺血組織逐漸被血供豐富的肉芽組織取代。本研究在以上此理論及實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)上,設(shè)計動物實(shí)驗(yàn),將封閉負(fù)壓引流及肝素溶液濕敷治療技術(shù)應(yīng)用于海水浸泡的新西蘭大白兔燙傷創(chuàng)面。通過觀察病理學(xué)改變、微血管計數(shù)、創(chuàng)面愈合時間、組織含水量等指標(biāo),為研究海水浸泡后燙傷創(chuàng)面的病理改變以及負(fù)壓封閉引流、肝素灌洗對其產(chǎn)生的影響提供實(shí)驗(yàn)參考,也為臨床治療海水浸泡燒傷創(chuàng)面的治療提供新的思路及參考。目的探討負(fù)壓封閉引流聯(lián)合肝素溶液灌洗對兔燙傷合并海水浸泡創(chuàng)面病理改變及愈合過程的影響。方法1、實(shí)驗(yàn)動物及分組方法:清潔級新西蘭大白兔20只,體重2.0kg-2.5kg,雌雄不限,兔齡3到4個月。按照體重使用隨機(jī)數(shù)字表分為4組,分別在第1、3、5、7天取材,每組5只。2、致傷及實(shí)驗(yàn)方法:術(shù)前24小時以3%戊巴比妥納溶液根據(jù)體重作耳緣靜脈麻醉,用量為30 mg/kg。80 g/L硫化鈉溶液進(jìn)行背部脫毛。麻醉后將各組動物四肢固定,將已脫毛區(qū)域使用記號筆畫線標(biāo)記,用4cm×4cm大小36層經(jīng)99 ℃恒溫水浴浸泡的紗布平鋪于燙傷部位,時間持續(xù)17s,造成實(shí)驗(yàn)動物4個1%TBSA深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面(病理切片證實(shí))。根據(jù)抽簽隨機(jī)分組,將其中3個創(chuàng)面給予海水浸泡2小時,另外1個創(chuàng)面在空氣中暴露2小時。處理方法:暴露組創(chuàng)面給予常規(guī)換藥治療(a組,對照組)。海水浸泡的3組創(chuàng)面分別給予常規(guī)換藥治療(b組)、單純負(fù)壓吸引治療(c組)、負(fù)壓吸引合并肝素治療(d組)。負(fù)壓引流創(chuàng)面(c、d組)每日給予生理鹽水沖洗1次。d組創(chuàng)面沖洗后,經(jīng)管路給予5000U/ml肝素溶液3ml浸濕負(fù)壓引流敷料,濕敷1小時后啟動負(fù)壓吸引裝置,繼續(xù)封閉負(fù)壓吸引治療。壓力設(shè)定在-100mmHg,模式設(shè)置為負(fù)壓吸引持續(xù)5分鐘,間隔2分鐘。3、檢測指標(biāo)及方法:分別于傷后的第1、3、5、7天抽取5只動物,3%戊巴比妥納麻醉后打開敷料,觀察創(chuàng)面腫脹及壞死組織脫落情況;各創(chuàng)面切取組織標(biāo)本分別進(jìn)行光鏡病理學(xué)觀察、免疫組化觀察、電鏡觀察;切取組織利用干濕比重法測量創(chuàng)面組織含水量。取材后各創(chuàng)面繼續(xù)取材前治療方式處理至傷后第14天,所有創(chuàng)面常規(guī)換藥并飼養(yǎng)至創(chuàng)面愈合。4、統(tǒng)計學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)均用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,數(shù)值用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,計量資料的比較采用重復(fù)測量方差分析,多重比較用LSD法(方差不齊用DunnettT3法)。等級資料用數(shù)值變量(N)表示,兩個樣本之間的比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。以P0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1、創(chuàng)面大體觀察燙傷后第1天,各實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面均有不同程度水腫,常規(guī)換藥組(a組)創(chuàng)面表面較干燥,海水浸泡組(b組)創(chuàng)面較為干枯,創(chuàng)面有加深傾向,切開取材時見痂下組織水腫明顯。常規(guī)封閉負(fù)壓引流組(c組)及聯(lián)合治療組(d組)創(chuàng)面表面較另兩組顯濕潤。傷后第3天觀察,各組創(chuàng)面仍有腫脹,a、b組創(chuàng)面基底可見壞死組織附著,b組創(chuàng)面基底可見明顯壞死灶,c、d組創(chuàng)面表層壞死組織較少,基底較新鮮、紅潤,但取材切開時見組織內(nèi)水腫仍較明顯。傷后第5天,a組創(chuàng)面表面結(jié)有薄層痂皮,b組創(chuàng)面加深明顯,表面壞死組織結(jié)成厚痂皮,c、d組創(chuàng)面基底較濕潤,無明顯痂皮,d組創(chuàng)面壞死組織較c組少,并更為紅潤。傷后第7天觀察,見a組創(chuàng)面壞死組織逐漸溶痂,少量液化壞死組織附著,b組創(chuàng)面壞死組織較厚,可見少量膿性分泌物,c、d組創(chuàng)面壞死組織部分脫落,基底較新鮮,部分創(chuàng)面上皮化。傷后第14天,a組創(chuàng)面愈合約55%,殘余創(chuàng)面結(jié)痂、干燥,b組創(chuàng)面基底仍有較厚的痂皮附著,基底仍略水腫,c組創(chuàng)面大部分愈合,新生表皮新鮮,殘余創(chuàng)面結(jié)有薄層痂皮。d組創(chuàng)面約80%愈合,痂皮脫落,殘余少量創(chuàng)面。2、創(chuàng)面組織病理學(xué)觀察(HE染色)傷后第1天HE染色觀察,見各組創(chuàng)面表皮均有脫落及壞死,真皮較水腫,炎癥細(xì)胞浸潤,可見微血管擴(kuò)張及少量炎癥細(xì)胞浸潤,以b組最明顯,可見大量紅細(xì)胞外滲到組織間。傷后第3天觀察,見a、b組創(chuàng)面組織仍水腫明顯,微血管仍擴(kuò)張,管腔內(nèi)可見大量栓塞的紅細(xì)胞,真皮層組織壞死,炎癥細(xì)胞浸潤明顯,c、d組創(chuàng)面膠原纖維水腫程度較a、b組輕,d組切片炎癥細(xì)胞浸潤程度及紅細(xì)胞外滲情況較其他組輕。傷后第5天觀察,見各組創(chuàng)面組織水腫均較前減輕,a、b、c組切片內(nèi)仍可見大量炎癥細(xì)胞浸潤,膠原纖維水腫伴壞死,可見破裂血管及外滲紅細(xì)胞聚集,d組創(chuàng)面炎癥細(xì)胞較少,膠原纖維水腫程度較輕。傷后第7天觀察,可見各組創(chuàng)面組織內(nèi)炎癥細(xì)胞較前減少,仍可見血管擴(kuò)張、充血,各組創(chuàng)面均可見新生血管。c、d組新生血管較a、b組多,d組創(chuàng)面及毛囊內(nèi)出現(xiàn)新生鱗狀上皮。3、電子顯微鏡觀察a組切片內(nèi)可見血管腔內(nèi)紅細(xì)胞皺縮、堆積,內(nèi)皮細(xì)胞尚完整,內(nèi)皮細(xì)胞的間隙增寬,細(xì)胞內(nèi)線粒體中出現(xiàn)空泡,可見較完整核糖體。b組切片內(nèi)觀察見毛細(xì)血管基膜部分消失,血管管腔內(nèi)可見明顯皺縮變形的紅細(xì)胞,內(nèi)皮間隙明顯增大,細(xì)胞間的邊界不清,部分內(nèi)皮細(xì)胞壞死,部分內(nèi)皮細(xì)胞呈凋亡表現(xiàn),殘存內(nèi)皮細(xì)胞的胞質(zhì)明顯減少。c組切片內(nèi)可見毛細(xì)血管內(nèi)皮基膜較完整,細(xì)胞間隙增寬,可觀察到細(xì)胞間連接打開。部分內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象,內(nèi)有空泡,可見自噬體形成。d組切片內(nèi)觀察到毛細(xì)血管基膜完整,腔內(nèi)可見散在紅細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞尚完整,染色質(zhì)聚集到核膜下,細(xì)胞間隙增寬。4、創(chuàng)面組織含水量各組創(chuàng)面組織不同時間點(diǎn)的組織含水量統(tǒng)計結(jié)果顯示,a、b、c、d各分組間之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,(F=94.07,P0.05)。不同時相點(diǎn)間各組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=236.3,P0.05)。在傷后第1天,a組創(chuàng)面含水量最低,表明海水浸泡后的三組創(chuàng)面水腫程度高于單純燙傷組。傷后第3天,各組創(chuàng)面組織含水量達(dá)到峰值,后逐漸下降。至傷后第5天,c、d兩組創(chuàng)面組織含水量下降至接近第1天水平,其中d組下降最明顯且含水量最低,b組含水量在各組間相比仍最高,c、d組含水量已經(jīng)低于a組。5、創(chuàng)面血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor)表達(dá)陽性率免疫組化染色切片觀察結(jié)果顯示,VEGF的表達(dá)主要分布于血管、毛囊及創(chuàng)面基底部的細(xì)胞中。在傷后第1天,b組創(chuàng)面內(nèi)VEGF表達(dá)陽性程度最高,分析原因可能是組織損傷程度最高引起。從第3天開始,可觀察到c、d兩組創(chuàng)面VEGF陽性程度快速增加,視野內(nèi)顆粒呈棕黃色的細(xì)胞明顯增多,d組VEGF陽性表達(dá)的細(xì)胞密度最高,并持續(xù)至第5天。至第7天觀察時,a、b組VEGF表達(dá)略有減弱,c、d組內(nèi)仍呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)。6、微血管密度(micro-vascular density,MVD)檢測組織內(nèi)微血管密度(MVD)變化規(guī)律類似于VEGF表達(dá)規(guī)律,其CD31染色的陽性信號主要定位于胞漿中。傷后第1天觀察,見各組創(chuàng)面血管密度無明顯差異,第3-7天觀察見各組創(chuàng)面血管密度均逐漸增加,d組各時相點(diǎn)MVD均最高,b組最低,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=123.36,P0.05)。在微血管生成時間上看,d組新生血管出現(xiàn)最早,且高峰值最高,b組微血管生成較晚且密度低。不同時間點(diǎn)間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=952.75,P0.05)。結(jié)論1、海水浸泡可加重兔燙傷創(chuàng)面內(nèi)皮細(xì)胞損傷,加重微循環(huán)障礙。2、負(fù)壓封閉引流治療聯(lián)合肝素溶液濕敷治療,可有效地減輕海水浸泡后燙傷創(chuàng)面的組織水腫程度,改善組織微循環(huán),加快壞死組織的清除,促進(jìn)新生血管的生長,是治療海水浸泡后燒燙傷創(chuàng)面的有效手段。
[Abstract]:The results showed that there was no obvious pathological change in the wound of burn wound , such as high - permeability , high - sodium , high - chlorine , high - contained bacteria , low - temperature and alkaline - alkalinity . A new method for the treatment of burn wound in rabbits with seawater immersion was carried out . The results showed that heparin was used in the treatment of burn wound . The results showed that heparin was used in the treatment of burn wound . The results showed that the surface of the wound surface was more dry than that of the other two groups . The results showed that the surface of the wound surface was more dry than that of the other two groups . The results showed that there was a large number of inflammatory cell infiltration in the wound surface of the group , the edema of the dermis , the infiltration of inflammatory cells , the visible microvessels and the infiltration of small amount of inflammatory cells . The results showed that the capillary basement membrane was complete and the cell gap was widened . The results of the statistical data show that there was a significant difference between the groups at different time points in the tissues of the wound tissue . There was significant difference between the two groups ( F = 236.3 , P0.05 ) . On the first day after the injury , the water content of the wounds in group a and d was higher than that in the first day after injury . At the time of microvessel formation , the first and highest peak values were observed in d group , and the microvessels in group b were very late and the density was low . There was significant difference between different time points ( F = 952.75 , P0.05 ) . Conclusion 1 . Seawater immersion can aggravate the injury of endothelial cells in rabbits with scald , increase microcirculation disturbance . 2 . Negative pressure closed drainage treatment combined with heparin solution wet compress treatment , can effectively reduce the degree of tissue edema after seawater immersion , improve the microcirculation of tissue , accelerate the removal of necrotic tissue , promote the growth of neovascularization , and is an effective means to treat burn and scald wound after seawater immersion .
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R644

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5 溫皇鼎;負(fù)壓封閉引流聯(lián)合含氧液沖洗治療人靜脈性潰瘍和兔創(chuàng)傷后慢性感染性創(chuàng)面的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 冀凌云;中藥“蚓黃散”外治糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面對相關(guān)因子的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

7 李國瑞;負(fù)壓封閉引流對兔顱骨外露創(chuàng)面愈合影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

8 石定;阿魏酸促進(jìn)糖尿病大鼠慢性創(chuàng)面血管化及其作用機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

9 程星;皮膚軟組織感染病原學(xué)特征及創(chuàng)面難愈合原因分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

10 顏俊杰;中藥熏洗促進(jìn)創(chuàng)面愈合的臨床觀察[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年

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本文編號：2017362