本文選題：辣椒素 + 胃動(dòng)力　； 參考：《西南醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:通過(guò)研究不同劑量、不同作用時(shí)間的辣椒素(Capsaicin,Cap)對(duì)慢性應(yīng)激性(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠胃酚紅排空率的影響,并檢測(cè)胃竇組織的及腦組織辣椒素受體(transient receptor potential vanilloid subtype 1,TRPV1)、降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)、神經(jīng)降壓素(Neurotensin,NT)的表達(dá)以及血清胃動(dòng)素(motilin,MTL)水平,探討Cap對(duì)慢性應(yīng)激大鼠胃動(dòng)力的作用及機(jī)制。方法:(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組:SD大鼠120只,隨機(jī)抽取20只作為正常對(duì)照組(A組),SD大鼠100只建立CUMS模型。造模成功后,將其隨機(jī)分為空白對(duì)照組(B組)、溶劑對(duì)照組(C組)、Cap 0.04mg/kg組(D組)、Cap 0.4mg/kg組(E組)、Cap 4mg/kg組(F組),每組各20只。為了探索不同時(shí)期Cap對(duì)CUMS大鼠胃動(dòng)力的影響,將實(shí)驗(yàn)分為I期、II期,I期為1周,II期為2周。按相應(yīng)時(shí)期,A組、B組、C組、D組、E組、F組隨機(jī)分為2個(gè)小組,即I期分為A1組、B1組、C1組、D1組、E1組、F1組(Cap 1周),II期分為A2組、B2組、C2組、D2組、E2組、F2組(Cap 2周),每組SD大鼠10只。(2)CUMS模型的建立:SD大鼠20只,隨機(jī)分成正常組、模型組各10只。正常組自由進(jìn)食進(jìn)水,連續(xù)3w。模型組每天隨機(jī)安排一種刺激,包括:禁水、禁食、夾尾、水平搖晃、冰水游泳、熱水游泳、轉(zhuǎn)換晝夜節(jié)律、制動(dòng)、潮濕墊料,相鄰2d的刺激不重復(fù),每種刺激重復(fù)2-3次,連續(xù)3w。(3)Cap制劑的配制:稱(chēng)取cap100mg(98.37%的cap粉末101.66mg)、cap10mg(98.37%的cap粉末10.17mg)、cap1mg(98.37%的cap粉末1.02mg),分別加入含1ml吐溫80的生理鹽水99ml中混勻后,配成濃度為1mg/ml、0.1mg/ml、0.01mg/ml的cap制劑。對(duì)照溶劑:1ml吐溫80加入99ml生理鹽水中混勻配成溶劑。(4)cap干預(yù)實(shí)驗(yàn)方法:造模完成后,每日給予各組大鼠不同溶液,a組無(wú)處理,b組蒸餾水灌胃,c組給予對(duì)照溶劑灌胃,d組cap0.04mg/kg灌胃,e組cap0.4mg/kg灌胃、f組cap4mg/kg灌胃,給藥后所有大鼠常規(guī)喂養(yǎng),各組大鼠按分期喂養(yǎng)后,所有大鼠禁食24h,于翌日晨給予濃度為50mg/dl的酚紅溶液2ml/鼠灌胃,30min后麻醉處死大鼠。(5)檢測(cè)指標(biāo):(1)收集胃內(nèi)容物,測(cè)定胃酚紅排空率。(2)心臟取血2ml,4℃離心后提取上清液,用elisa法檢測(cè)血漿mtl水平。(3)顯微鏡下觀察大鼠胃粘膜損傷情況并進(jìn)行病理組織學(xué)評(píng)分。(4)取胃竇、腦組織后分別用elisa和免疫組化方法檢測(cè)trpv1、cgrp、nt的表達(dá)。結(jié)果:1、模型驗(yàn)證:(1)動(dòng)物一般情況:正常組大鼠一般狀況良好,活動(dòng)靈敏,進(jìn)食進(jìn)水正常,大小便正常;cums模型組大鼠精神狀態(tài)較差,消瘦萎靡,倦怠懶動(dòng),毛發(fā)污濁,進(jìn)食進(jìn)水減少,大便干結(jié)量少。(2)胃酚紅排空率:正常組與cums模型組胃酚紅排空率分別為80.36%±3.27%、65.83%±3.90%,cums模型組的胃酚紅排空率顯著低于正常組(p0.05),造模成功。2.cap干預(yù)的結(jié)果:(1)動(dòng)物一般情況:實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組大鼠無(wú)死亡,其中a1組、a2組大鼠一般狀況良好,活動(dòng)靈敏,進(jìn)食進(jìn)水正常,大小便正常;b1組、c1組、b2組、c2組大鼠精神狀態(tài)較差,消瘦萎靡,倦怠懶動(dòng),毛發(fā)污濁,進(jìn)食進(jìn)水減少,大便干結(jié)量少。d1組、e1組、f1組大鼠一般精神狀態(tài)較差,消瘦萎靡,倦怠懶動(dòng),毛發(fā)污濁,進(jìn)食進(jìn)水減少,大便干結(jié)量少。d2組大鼠一般狀況稍好,活動(dòng)稍遲緩,消瘦,進(jìn)食進(jìn)水正常,大小便正常。e2組大鼠一般狀況稍好,活動(dòng)稍遲緩,消瘦,進(jìn)食進(jìn)水正常,大小便正常。f2組一般狀況欠佳,活動(dòng)遲緩,消瘦,進(jìn)食進(jìn)水正常,大小便正常。(2)大鼠胃酚紅排空率:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為79.54%±2.98%、69.37%±4.21%、68.15%±3.67%、65.58%±7.50%、66.58%±5.31%、62.52%±5.34%;a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為78.61%±4.04%、67.14%±3.44%、66.95%±3.93%、92.68%±2.31%、86.24%±2.75%、79.53%±2.24%。其中在i期實(shí)驗(yàn)中,a1組胃酚紅排空率顯著高于該期其余各組(p0.05),其余各組相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在ii期實(shí)驗(yàn)中,d2組、e2組、f2組胃酚紅排空率顯著高于b2組、c2組(p0.05),且d2組胃酚紅排空率顯著高于e2組(p0.05),e2組胃酚紅排空率顯著高于f2組(p0.05)。在相同cap劑量下d2組顯著高于d1組(p0.05),e2組顯著高于e1組(p0.05),f2組顯著高于f1組(p0.05)。(3)elisa法檢測(cè)結(jié)果:(1)胃竇組織trpv1表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為63.62±9.45pg/ml、269.38±11.07pg/ml、274.67±10.92pg/ml、138.16±12.10pg/ml、147.60±15.18pg/ml、150.62±11.95pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為59.42±7.05pg/ml、273.06±13.98pg/ml、271.57±11.59pg/ml、73.89±6.53pg/ml、99.50±5.94pg/ml、130.44±7.63pg/ml。其中在i期中,a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),而d1組、e1組、f1組之間相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在ii期中,a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。在相同cap劑量下d1組顯著高于d2組(p0.05),e1組顯著高于e2組(p0.05),f1組顯著高于f2組(p0.05)。(2)下丘腦組織trpv1表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為61.67±6.74pg/ml、284.06±6.88pg/ml、288.01±9.76pg/ml、154.48±8.53pg/ml、159.48±10.14pg/ml、151.77+13.25pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為64.20±6.14pg/ml、284.50±5.45pg/ml、285.71±8.48pg/ml、78.52±6.31pg/ml、108.21±4.27pg/ml、132.26±4.19pg/ml。其中在i期,a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),而d1組、e1組、f1組之間相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在ii期中,a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。在相同cap劑量下d1組顯著高于d2組(p0.05),e1組顯著高于e2組(p0.05),f1組顯著高于f2組(p0.05)。(3)胃竇組織cgrp表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為80.16±7.43pg/ml、218.66±10.24pg/ml、224.13±11.60pg/ml、110.37±8.90pg/ml、164.97±14.52pg/ml、197.67±10.04pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為84.01±6.58pg/ml、220.79±9.71pg/ml、223.04±12.01pg/ml、110.79±8.74pg/ml、143.21±9.20pg/ml、182.93±9.31pg/ml。其中在i期,a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),且d1組顯著低于e1組(p0.05),e1組顯著低于f1組(p0.05)。在ii期中,a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。在相同cap劑量下e1組顯著高于e2組(p0.05),f1組顯著高于f2組(p0.05)。(4)下丘腦組織cgrp表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為78.14±9.34pg/ml、219.64±9.28pg/ml、227.55±6.56pg/ml、109.88±7.29pg/ml、174.64±8.23pg/ml、206.78±6.81pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為82.69±7.22pg/ml、224.64±9.66pg/ml、232.55±4.97pg/ml、106.07±8.42pg/ml、156.79±5.39pg/ml、176.41±8.60pg/ml。在i期中,a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),且d1組顯著低于e1組(p0.05),e1組顯著低于f1組(p0.05)。在ii期中,a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。在相同cap劑量下e1組顯著高于e2組(p0.05),f1組顯著高于f2組(p0.05)。(5)胃竇組織nt表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為78.35±7.73pg/ml、247.40±8.25pg/ml、256.21±9.36pg/ml、108.72±10.18pg/ml、146.03±12.65pg/ml、170.56±8.08pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為82.08±8.09pg/ml、243.80±6.44pg/ml、251.41±7.33pg/ml、107.93±8.43pg/ml、136.13±7.73pg/ml、174.40±7.04pg/ml。在i期中,a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),且d1組顯著低于e1組(p0.05),e1組顯著低于f1組(p0.05)。在ii期中,a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。(6)下丘腦組織nt表達(dá)結(jié)果:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為91.59±7.79pg/ml、258.62±6.42pg/ml、261.42±8.08pg/ml、107.29±4.73pg/ml、134.40±8.74pg/ml、183.06±6.11pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為91.09±6.28pg/ml、262.89±6.37pg/ml、264.68±7.38pg/ml、111.38±2.94pg/ml、146.48±4.19pg/ml、190.67±3.75pg/ml。在i期a1組顯著低于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組顯著低于b1組、c1組(p0.05),且d1組顯著低于e1組(p0.05),e1組顯著低于f1組(p0.05)。在ii期中a2組顯著低于其余各組(p0.05),d2組、e2組、f2組顯著低于b2組、c2組(p0.05),且d2組顯著低于e2組(p0.05),e2組顯著低于f2組(p0.05)。(4)大鼠血漿mtl水平:a1組、b1組、c1組、d1組、e1組、f1組分別為169.44±8.07pg/ml、71.73±8.54pg/ml、73.30±9.67pg/ml、115.46±9.96pg/ml、114.64±10.61pg/ml、105.27±9.23pg/ml,a2組、b2組、c2組、d2組、e2組、f2組分別為172.68±7.49pg/ml、75.48±10.03pg/ml、69.22±8.92pg/ml、152.93±5.66pg/ml、135.67±11.92pg/ml、130.34±12.84pg/ml。在i期實(shí)驗(yàn)中,a1組mtl水平明顯高于其余各組(p0.05),d1組、e1組、f1組均高于b1組、c1組(p0.05),且d1組、e1組mtl水平明顯高于f1組(p0.05),而d1組與e1組相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在ii期實(shí)驗(yàn)中,a2組mtl水平明顯高于其余各組(P0.05),D2組、E2組、F2組均高于B2組、C2組(P0.05),且D2組MTL顯著高于E2組(P0.05),E2與F2組相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在相同Cap劑量下D1組顯著低于D2組(P0.05),E1組顯著低于E2組(P0.05),F1組顯著低于F2組(P0.05)。(5)胃粘膜病理組織學(xué)檢查:胃粘膜病理組織損傷積分(Masuda標(biāo)準(zhǔn)方法)A1組、B1組、C1組、D1組、E1組、F1組分別為0.5±0.71、4.7±1.50、4.3±1.33、4.2±1.03、3.8±0.92、4.0±1.41,A2組、B2組、C2組、D2組、E2組、F2組分別為0.3±0.48、4.1±1.45、4.5±1.35、2.1±0.74、2.5±0.85、2.4±0.84。在I期實(shí)驗(yàn)中,A1組顯著低于其余各組(P0.05),其余各組之間相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在II期實(shí)驗(yàn)中,A2組顯著低于其余各組。D2組、E2組、F2組顯著低于B2、C2組(P0.05),D2組、E2組、F2組之間相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而在相同Cap劑量下,D1組顯著高于D2組(P0.05),E1組顯著高于E2組(P0.05),F1組顯著高于F2組(P0.05)。結(jié)論:1)CUMS能成功建立大鼠胃動(dòng)力障礙模型,且能上調(diào)TRPV1的表達(dá)。(2)CUMS大鼠攝入0.04mg/(kg·d)-4mg/(kg·d)Cap 1周對(duì)其胃動(dòng)力無(wú)促進(jìn)作用。(3)CUMS大鼠攝入0.04mg/(kg·d)-4mg/(kg·d)Cap 2周對(duì)其胃動(dòng)力有明顯促進(jìn)作用,以0.04mg/(kg·d)效果最佳。(4)短期(1周及2周)攝入不同劑量Cap可使CUMS大鼠上調(diào)的TRPV1表達(dá)下移,并調(diào)節(jié)CGRP、NT腦腸肽的表達(dá),促進(jìn)MTL的釋放。(5)CUMS大鼠攝入0.04mg/(kg·d)-4mg/(kg·d)Cap對(duì)胃粘膜有保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R57

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本文編號(hào)：1868477