本文選題：電針 + 中毼��； 參考：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：[目的]探討電針對去氧乙烯基環(huán)己烯(VCD)致原發(fā)性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢功能的保護(hù)和改善效應(yīng),并探討其可能機(jī)制。[方法]1 電針對VCD致POI模型大鼠卵巢功能的保護(hù)效應(yīng)和機(jī)制研究選取動(dòng)情周期規(guī)則的32只雌性SD大鼠(10-12周),隨機(jī)分為空白組、模型組、電針組和捆綁組(8只/組),空白組正常飼喂,模型組、電針組和捆綁組使用VCD(160mg/kg,腹腔注射,連續(xù)15d)造模。模型組只進(jìn)行造模；電針組在造模同時(shí),予以電針中毼和天樞穴15d,并在造模用藥結(jié)束后繼續(xù)電針干預(yù)15d(隔次交替針刺中毼和天樞穴；中毼穴直刺7～10mm,天樞穴直刺3～5mm,然后接SDZ-V型華佗牌電子針療儀,調(diào)連續(xù)波,電針頻率為1～3Hz,電流強(qiáng)度0.1～1mA,電針中毼、天樞時(shí)以穴位周圍肌肉顫動(dòng)為度),共30d,每次電針時(shí)間為20min,前2周5次/周,后2周3次/周；捆綁組在造模同時(shí)和造模后進(jìn)行捆綁干預(yù)(共30d,每次捆綁體位、每次捆綁時(shí)間、捆綁頻次、捆綁總次數(shù)均與電針組相同)。期間,觀察各組大鼠的存活情況、一般情況、體重變化、動(dòng)情周期變化,大鼠動(dòng)情周期紊亂表示卵巢功能不全模型成功,在模型組造模成功后,將四組大鼠麻醉后取材,稱重并計(jì)算各組大鼠性腺濕重和性腺指數(shù),酶聯(lián)免疫法檢測血清AMH、inhibinB,放射免疫法檢測血清FSH、LH、E2、P、T,顯微鏡下觀察卵巢組織形態(tài)和卵泡數(shù)量,RT-PCR法檢測卵巢組織中AMH mRNA相對表達(dá)量,Western blotting法檢測卵巢組織中AMH蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白含量。2 電針對VCD致POI模型大鼠卵巢功能的改善效應(yīng)和機(jī)制研究選取動(dòng)情周期規(guī)則的58只雌性SD大鼠(10-12周),分為空白組(8只),模型組、電針組、捆綁組、它莫西芬組和玉米油組(10只/組),空白組正常飼喂,其余各組使用VCD (160mg/kg,腹腔注射,連續(xù)15d)造模。造模成功后,各組進(jìn)行干預(yù)治療1月,電針組予以電針中毼和天樞穴(針刺方式、頻次和電針參數(shù)同實(shí)驗(yàn)一中電針組),捆綁組予以捆綁干預(yù)(捆綁方式、頻次同實(shí)驗(yàn)一中捆綁組),它莫西芬組以枸櫞酸它莫西芬干預(yù)(1mg/kg體重,皮下注射,前2周每周5次,后2周每周3次),玉米油組以玉米油進(jìn)行干預(yù)(0.3ml/次,皮下注射,前2周每周5次,后2周每周3次),觀察大鼠的存活情況、一般情況、體重變化、動(dòng)情周期變化,在1個(gè)月干預(yù)結(jié)束后,將六組大鼠麻醉后取材,稱重并計(jì)算各組大鼠性腺濕重和性腺指數(shù),酶聯(lián)免疫法檢測血清AMH、inhibinB,放射免疫法檢測血清FSH、LH、E2，，顯微鏡下觀察卵巢組織形態(tài)和卵泡數(shù)量,Western blotting法檢測卵巢組織中AMH蛋白表達(dá)量,RT-PCR法檢測卵巢組織中AMH mRNA、IGF-1和IGF-1R mRNA相對表達(dá)量。[結(jié)果]1 保護(hù)效應(yīng)及可能機(jī)制1.1大鼠存活情況至取材時(shí),空白組、模型組、電針組和捆綁組各組大鼠分別是8只、7只、8只和7只。1.2大鼠一般情況空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間一般情況良好(進(jìn)食飲水正常,活動(dòng)度好,體毛顏色光亮),模型組、電針組和捆綁組在造模期間一般情況差,造模用藥結(jié)束后,逐漸轉(zhuǎn)好,電針組大鼠一般情況好于模型組和捆綁組。1.3大鼠體重變化情況空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間體重逐周增加,模型組、電針組和捆綁組大鼠在造模期間體重逐周降低,至15d時(shí)降至最低,停止注射造模藥物后,各組大鼠體重逐漸回升,其中以電針組在電針干預(yù)期間增速最快,之后,模型組、電針組和捆綁組大鼠體重增長速度近似于空白組,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),電針組大鼠體重高于模型組、捆綁組,低于空白組。1.4大鼠動(dòng)情周期變化空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)情周期正常規(guī)律。模型組、電針組和捆綁組大鼠在0～15d VCD造模期間,分別有1只(1/7,14.29%)大鼠、0只(0/8,0%)大鼠、0只(0/7,0%)大鼠出現(xiàn)動(dòng)情周期的紊亂；在15～30d時(shí),模型組、電針組和捆綁組各組大鼠分別有1只(1/7,14.29%)大鼠、1只(1/8,12.5%)大鼠、2只(2/7,28.57%)大鼠出現(xiàn)動(dòng)情周期紊亂；至70d時(shí),模型組、電針組、捆綁組全部大鼠動(dòng)情周期紊亂。1.5大鼠性腺濕重和性腺指數(shù)a.卵巢濕重和卵巢指數(shù)：經(jīng)過15d的VCD造模,至初次使用造模藥物后70d,模型組大鼠卵巢濕重和卵巢指數(shù)低于空白組(左側(cè)：15.43±3.21 vs 52.12±13.80；右側(cè)：16.43±3.60 vs 48.50±8.85；卵巢指數(shù)：0.12±0.02 vs 0.35±0.06)；電針組卵巢濕重和卵巢指數(shù)高于模型組(左側(cè)：29.13±7.20 vs 15.43±3.21；右側(cè)：28.63±6.43 vs 16.43±3.60；卵巢指數(shù)：0.20±0.04 vs 0.12±0.02),電針組卵巢指數(shù)高于捆綁組(0.20±0.04 vs 0.16(0.02))。b.子宮濕重和子宮指數(shù)：經(jīng)過15d的VCD‘造模,至初次使用造模藥物后70d,模型組大鼠子宮濕重低于空白組(535.43±121.38 vs 756.75±142.31)；電針組子宮濕重高于模型組、捆綁組(694.38±160.79 vs 535.43±121.38 vs 541.14±85.27)；四組間子宮指數(shù)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。1.6血清性激素水平經(jīng)過15d的VCD造模,至初次使用造模藥物后70d,電針組大鼠血清AMH高于模型組和捆綁組、低于空白組(6.10±1.43 vs 3.25±1.71 vs 2.96±1.78 vs 12.03±4.29):電針組大鼠血清InhibinB高于模型組和捆綁組、低于空白組(20.09±3.10 vs 14.57±2.46 vs14.06(2.43)vs 29.13±6.73)；電針組大鼠血清FSH低于模型組和捆綁組、高于空白組(3.17±0.87 vs 4.98±1.08 vs 4.83±1.05 vs 2.04±0.64):電針組大鼠血清LH低于模型組和捆綁組、高于空白組(7.04±1.62 vs 10.46±1.73 vs9.88±1_38 vs 5.25±1.68):電針組大鼠血清E2高于模型組和捆綁組、低于空白組(19.94±4.64 vs12.44±6.16 vs 13.02±5.24 vs 28.47±6.76)；電針組大鼠血清P高于模型組,與捆綁組無差異,低于空白組(2.76±1.23 vs 1.O(0.97) vs 2.06±1.60 vs 6.22±1.43):電針組血清T與模型組、捆綁組無差異,高于空白組(0.108(0.19)vs 0.269±0.171 vs 0.230±0.198 vs 0.066±0.045).1.7卵巢組織形態(tài)和卵泡數(shù)量與空白組相比,模型組、電針組和捆綁組大鼠卵巢顏色暗紅,形態(tài)小,呈萎縮狀,顯微鏡下電針組大鼠卵泡損傷程度較模型組、捆綁組輕。電針組大鼠卵巢原始級卵泡數(shù)高于模型組和捆綁組、低于空白組(6.50±1.20 vs 4.00±1.41 vs 3.29±1.11 vs 9.50±1.60):電針組大鼠卵巢初級卵泡數(shù)高于模型組和捆綁組、低于空白組(5.13±1.89 vs 2.86±1.35vs 4.00±2.45 vs 5.75±1.39):電針組大鼠卵巢竇狀卵泡數(shù)與模型組、捆綁組無明顯差異,低于空白組(2.38±1.30 vs 2.57±1.51 vs 2.14±1.07 vs 6.63±2.50):電針組大鼠卵巢閉鎖卵泡數(shù)低于模型組和捆綁組、高于空白組(4.75±2.66 vs 8.86±2.41 vs 7.7l±3.04 vs2.63±1.41)。1.8卵巢組織中AMHmRNA相對表達(dá)量經(jīng)過15d的VCD造模,至初次使用造模藥物后70d,電針組卵巢組織AMH mRNA相對表達(dá)量高于模型組和捆綁組,低于空白組(2以△CT值：0.590±0.021vs 0.383±0.098 vs0.293±0.129 vs 1.073±0.120)。1.9卵巢組織中AMH蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白含量經(jīng)過15d的VCD造模,至初次使用造模藥物后70d,電針組卵巢組織AMH蛋白表達(dá)量高于模型組,與捆綁組相當(dāng),低于空白組(蛋白表達(dá)灰度值：0.289±0.26 vs 0.134±0.020 vs 0.219±0.048 vs 0.390±0.066)；電針組卵巢組織Bax蛋白相對表達(dá)量低于模型組,與捆綁組相當(dāng),高于空白組(蛋白表達(dá)灰度值：0.271±0.078 vs 0.398±0.025 vs0.299±0.036 vs 0.139±0.011)；電針組卵巢組織Bcl-2蛋白相對表達(dá)量高于模型組,與捆綁組相當(dāng),低于空白組(蛋白表達(dá)灰度值：0.264±0.090 vs 0.120±0.022 vs 0.225±0.036vs 0.414±0.087)。2 改善效應(yīng)及可能機(jī)制2.1大鼠存活情況至取材時(shí),空白組、模型組、電針組、捆綁組、它莫西芬組和玉米油組各組大鼠分別是8只、7只、7只、7只、7只和7只。2.2大鼠一般情況空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間一般情況良好(進(jìn)食飲水正常,活動(dòng)度好,體毛顏色光亮),其余各組在造模期間一般情況差,在等待模型成功期間,逐漸轉(zhuǎn)好,治療干預(yù)期間,電針組大鼠一般情況好于模型組和捆綁組,與它莫西芬組相當(dāng)。2.3大鼠體重變化情況空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間體重逐周增加,其余各組大鼠在造模期間體重逐周降低,至15d時(shí)降至最低,停止注射造模藥物后,各組大鼠體重逐漸回升,各組大鼠體重增加速率大致一致,至取材時(shí),電針組和它莫西芬組大鼠體重略高于模型組、捆綁組和玉米油組,低于空白組。2.4大鼠動(dòng)情周期變化空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)情周期正常規(guī)律。模型組、電針組、捆綁組、它莫西芬組和玉米油組大鼠在0-15d VCD造模期間,分別有1只(1/7,14.29%)大鼠、0只(0/7,0%)大鼠、0只(0/7,0%)、1只(4/7,57.14%)大鼠、1只(1/7,14.29%)大鼠出現(xiàn)動(dòng)情周期的紊亂,至70d時(shí),所有造模大鼠均動(dòng)情周期紊亂；在70～98d治療干預(yù)期間,空白組大鼠動(dòng)情周期規(guī)律,除電針組有1只大鼠出現(xiàn)了正常動(dòng)情周期(2個(gè)周期),剩余大鼠及模型組、捆綁組、它莫西芬組、玉米油組所有大鼠均動(dòng)情周期紊亂。2.5大鼠性腺濕重和性腺指數(shù)a.卵巢濕重和卵巢指數(shù)：經(jīng)過1個(gè)月的治療干預(yù),電針組卵巢濕重和卵巢指數(shù)與模型組間無差異(左側(cè)：16.71±5.31 vs 14.86±4.06；右側(cè)：18.71±5.31 vs 17.00±6.16；卵巢指數(shù)：0.126±0.042 vs 0.118±0.039),電針組卵巢濕重和卵巢指數(shù)與捆綁組、它莫西芬組間無差異(左側(cè)：16.71±5.31 vs 13.43±8.01 vs 20.00±6.08;右側(cè)：18.71±5.31 vs15.00±6.56 vs 21.86±12.71；卵巢指數(shù)：O.126±0.042 vs 0.103±0.047 vs 0.147±0.055).b.子宮濕重和子宮指數(shù)：經(jīng)過1個(gè)月的治療干預(yù),電針組子宮濕重和子宮指數(shù)與模型組間無差異(子宮濕重：605.71±121.60 vs 541.00±122.72；子宮指數(shù)：2.26±0.36vs1.99±0.51；電針組子宮濕重和子宮指數(shù)與捆綁組、它莫西芬組間無差異(子宮濕重：605.71±121.60 vs 611.00±78.39 vs 583.86±123.86;子宮指數(shù)：2.25(0.13)vs 2.26±0.36vs 2.05±0.46)。2.6血清性激素水平經(jīng)過1個(gè)月的治療干預(yù),電針組大鼠血清AMH高于模型組和捆綁組、與它莫西芬組相當(dāng),低于空白組(8.63±2.87 vs 2.73±1.34 vs 2.57±0.86 vs 9.40±3.29 vs 12.23± 3.96):電針組大鼠血清InhibinB高于模型組和捆綁組、與它莫西芬組相當(dāng),低于空白組(19.75±3.31 vs 13.29±3.6 vs 12.78±2.23 vs 20.09±2.72 vs 24.45±6.80);電針組大鼠血清FSH低于模型組和捆綁組、與它莫西芬組相當(dāng),高于空白組(4.30(0.72)vs 46.08±0.74 vs 5.92±0.72 vs 4.18±0.94 vs 2.77±1.16);電針組大鼠血清LH低于模型組和捆綁組、與它莫西芬組相當(dāng),高于空白組(7.29±1.62 vs 12.50±1.09 vs 13.34±1.42 vs 7.33±1.48 vs 5.39(1.34))；電針組大鼠血清E2高于模型組和捆綁組、與它莫西芬組相當(dāng),低于空白組(17.83±4.71 vs 10.93±4.71 vs 9.74±3.66 vs 18.36±5.42 vs 26.02±2.72)。2.7卵巢組織形態(tài)和卵泡數(shù)量：與空白組相比,模型組、電針組、捆綁組、它莫西芬組和玉米油組大鼠卵巢顏色暗紅,形態(tài)小,呈萎縮狀,顯微鏡下電針組大鼠卵泡損傷程度較模型組、捆綁組輕,與它莫西芬組相當(dāng)。電針組大鼠卵巢原始卵泡數(shù)與模型組、捆綁組和它莫西芬組間沒有差異,低于空白組(2.29±0.76 vs 1.86±0.69 vs 1.0(1.0) vs 2.14±1.21 vs 8.88±2.10);電針組大鼠卵巢初級卵泡數(shù)與模型組、捆綁組和它莫西芬組間沒有差異,低于空白組(3.86±1.35 vs 2.86±1.07 vs 2.7l±1.25 vs 3.14±1.21 vs 5.63±1.41);電針組大鼠卵巢竇狀卵泡數(shù)與模型組、捆綁組、它莫西芬組和空白組間沒有差異(2.43±1.40 vs 2.57±1.27 vs 2.14±0.90 vs 2.0(2.0) vs 2.50±1.19);電針組大鼠卵巢閉鎖卵泡數(shù)低于模型組和捆綁組、與它莫西芬相當(dāng),高于空白組(7.14±2.41 vs 10.14±1.68 vs 9.71±2.29 vs 6.57±1.72 vs 3.63±1.41)。2.8卵巢組織中AMH蛋白含量：經(jīng)過1個(gè)月的干預(yù),電針組大鼠卵巢組織AMH蛋白含量高于模型組、捆綁組,與它莫西芬組相當(dāng),低于空白組(蛋白表達(dá)灰度值：0-304±0.059 vs 0.119±0.039 vs 0.140 ±0.073 vs 0.328±0.050 vs 0.432±0.0571).2.9卵巢組織中AMH、IGF-1和IGF-1R mRNA相對表達(dá)量：經(jīng)過1個(gè)月的干預(yù),電針組大鼠卵巢組織AMH mRNA相對表達(dá)量高于模型組、捆綁組,與它莫西芬組相當(dāng),低于空白組(2-△△CT值：0.69±0.59 vs 0.13±0.02 vs 0.15±0.08 vs 0.71±0.31 vs 1.26±0.21);電針組大鼠卵巢組織IGF-1相對表達(dá)量與模型組、捆綁組、它莫西芬組和空白組間無差異(2-△△CT值:1.38±0.64 vs 1.96±0.52 vs 1.40±0.16 vs 1.10 ±0.20 vs 0.95±0.08):電針組大鼠卵巢組織IGF-1R mRNA相對表達(dá)量低于模型組、捆綁組,與它莫西芬組、空白組相當(dāng)(2-△△CT值:0.78±0.13 vs 1.86±0.30 vs 1.02±0.11 vs 0.80±0.20 vs 0.73±0.25).[結(jié)論]1 電針對VCD致POI模型大鼠的卵巢功能有一定的保護(hù)作用和改善作用。2 電針對卵巢功能的保護(hù)作用和改善作用是電針自身效應(yīng),而非電針過程中由捆綁產(chǎn)生的應(yīng)激效應(yīng)。3 電針對卵巢功能的保護(hù)作用可能是通過上調(diào)卵巢顆粒細(xì)胞抑制凋亡因子Blc-2蛋白的表達(dá),下調(diào)促凋亡因子Bax蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。4 電針對卵巢功能的改善作用可能是通過下調(diào)卵巢組織中IGF-1R mRNA的表達(dá),進(jìn)而影響IGF-1/IGF-1R軸來實(shí)現(xiàn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R245

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10 王曦;牛欣;羅致誠;;增齡與雄性大鼠氮氧化物及血清性激素水平變化的關(guān)系[A];全國中醫(yī)藥科研與教學(xué)改革研討會(huì)論文集[C];2002年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 馮衛(wèi)東;大鼠研究顯示孕期壓力或可代代相傳[N];科技日報(bào);2014年

2 奇 云;解讀大鼠基因有助人類攻克疑難病癥[N];大眾科技報(bào);2004年

3 張?zhí)煨?克隆大鼠意義重大[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

4 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;用大鼠還是用小鼠？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

5 記者 藍(lán)建中;日本研究:骨髓移植使大鼠血管“返老還童”[N];新華每日電訊;2010年

6 記者 姜澎;聰明大鼠 解密大腦記憶功能[N];文匯報(bào);2009年

7 萬姍姍　記者 王春;轉(zhuǎn)基因“聰明大鼠”學(xué)得快記得牢[N];科技日報(bào);2009年

8 記者 曹繼軍 顏維琦 通訊員 孫國根;大鼠基因功能圖譜被成功繪制[N];光明日報(bào);2014年

9 記者 白毅 通訊員 孫國根;大鼠基因功能圖譜繪制成功[N];中國醫(yī)藥報(bào);2014年

10 記者 孫國根;將大鼠基因的功能“對號入座”[N];健康報(bào);2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 付德明;氯沙坦對慢性心力衰竭大鼠β_1腎上腺素能受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與心功能的調(diào)節(jié)及其機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

2 楊少兵;N-甲基-D-天冬氨酸受體2B亞基鎮(zhèn)痛疫苗應(yīng)用于大鼠的安全性評價(jià)[D];華中科技大學(xué);2009年

3 蓋建芳;低出生體重對大鼠腎臟和血壓的影響及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2009年

4 史敏;慢性間歇性低壓低氧抗大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎作用及其免疫學(xué)機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

5 安平;柴夏煎對甲亢大鼠的影響及作用機(jī)理研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

6 周宜;從大鼠性周期的分子變化探討柴胡止血液的作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 張慶紅;白細(xì)胞介素2和雌激素受體在大鼠垂體前葉的相互關(guān)系研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

8 張海峰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對大鼠急性肝功能衰竭治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

9 常薪霞;鹽酸小檗堿對高脂飲食誘導(dǎo)的SD大鼠非酒精性脂肪肝的療效及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 頊紅雨;早期應(yīng)激對海馬學(xué)習(xí)、記憶功能的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李寧;鉛、鎘、鉻、汞對大鼠聽力的損傷及銅、錳、鋅、硒的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2008年

2 王瑩;慢性腎衰竭大鼠全段甲狀旁腺激素與心肌肌鈣蛋白的相關(guān)性分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

3 鄧旭輝;養(yǎng)精種子湯對缺氧雄性大鼠生殖機(jī)能的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

4 夏長青;活血降脂靈對早期動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的抗氧化應(yīng)激作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

5 王海燕;運(yùn)動(dòng)對SD大鼠與GK大鼠骨骼肌中COUP-TF Ⅰ與COUP-TFⅡ基因表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

6 吉星;知母提取物的成分分析及對T2DM大鼠干預(yù)代謝組學(xué)初探[D];廣東藥學(xué)院;2010年

7 曾志;促紅細(xì)胞生成素對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];暨南大學(xué);2011年

8 汪春彥;金蕎麥對克雷伯桿菌肺炎大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王媛媛;胡蘆巴總皂苷對大鼠脂肪肝的預(yù)防作用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

10 徐莉;康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠大腦可塑性機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

本文編號：1833370