發(fā)布時(shí)間：2018-04-04 08:51

  本文選題：煮沸骨　切入點(diǎn)：感染骨　出處：《鄭州大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：小腿遭受直接暴力撞擊和壓軋的機(jī)會(huì)較多,交通傷、機(jī)械傷、戰(zhàn)創(chuàng)傷等致傷因素常導(dǎo)致大段脛骨開放性粉碎性骨折伴有大面積皮膚軟組織缺損,骨折段內(nèi)有多個(gè)較完整的骨段或多個(gè)較大骨折塊,骨外露,污染嚴(yán)重者,術(shù)后發(fā)生骨感染的可能性極大,一旦發(fā)生骨感染,易演變?yōu)槁怨歉腥?治療非常困難。只有將感染的骨段整段及其周圍炎性組織等感染病灶一并徹底切除,才有可能徹底根治。取出大段游離感染骨后,不僅造成大段骨缺損,而且,感染創(chuàng)面還需要較長(zhǎng)一段時(shí)間才能治愈。骨移植是治療骨缺損的常用方法,帶血管的自體骨移植被譽(yù)為修復(fù)骨缺損的“金標(biāo)準(zhǔn)”,在臨床上得到廣泛應(yīng)用,但自體骨取骨來(lái)源及取骨量有限。同種異體骨是一種比較理想的骨移植替代物,但其存在排斥反應(yīng)、交叉感染、因感染導(dǎo)致手術(shù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)。骨搬移技術(shù)對(duì)于大段骨缺損,尤其是靠近膝關(guān)節(jié)平面或脛骨下端血運(yùn)較差部位的骨缺損,不宜應(yīng)用。目前,相關(guān)研究還涉及人工骨移植、組織工程骨移植、轉(zhuǎn)基因工程、誘導(dǎo)膜技術(shù)等,這些方法都有各自的適應(yīng)證和優(yōu)缺點(diǎn)。有些技術(shù)還處于動(dòng)物或體外實(shí)驗(yàn)階段,臨床上尚未得到廣泛應(yīng)用。目前,臨床上絕大多數(shù)將取出的大段感染骨丟棄,而再用于修復(fù)骨缺損的相關(guān)研究甚少。通過(guò)兔脛骨感染動(dòng)物模型,取其大段感染脛骨體外滅菌處理后,異位包埋于肌肉豐富的知名血管處,探索其再血管化可行性。通過(guò)臨床病例證實(shí)在控制小腿創(chuàng)面感染的同時(shí),將大段游離感染骨體外滅菌后異位再血管化,二期行帶血管蒂骨段回植修復(fù)骨缺損的可行性,從而達(dá)到游離感染骨再利用之目的。方法：20只健康6月齡中國(guó)白兔隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各10只,將兔麻醉后仰臥位固定于動(dòng)物試驗(yàn)臺(tái)上,常規(guī)消毒鋪巾。于兔左下肢脛骨粗隆下2.5cm處,采用1.5mm鉆頭鉆孔至髓腔,髓腔內(nèi)填塞紗布條。使用微量加樣器抽取等量制備好的金黃色葡萄球菌懸液和無(wú)菌生理鹽水,分別注入髓腔內(nèi)紗布條中,骨蠟封閉鉆孔處。通過(guò)兩組兔術(shù)區(qū)不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)解剖學(xué)觀察、組織病理學(xué)切片觀察、微生物學(xué)檢測(cè)等方法來(lái)評(píng)價(jià)兔脛骨骨感染模型制備效果。結(jié)果：解剖學(xué)觀察：實(shí)驗(yàn)組兔左下肢切口處有膿性分泌物溢出,對(duì)照組皮膚切口逐漸愈合,無(wú)紅腫滲出；組織病理學(xué)切片觀察：隨著時(shí)間的延續(xù),實(shí)驗(yàn)組骨組織切片由大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榇罅康牧馨图?xì)胞浸潤(rùn),對(duì)照組逐漸變?yōu)檎５墓墙M織；微生物學(xué)檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后2周、4周時(shí)取膿性分泌物、髓腔內(nèi)容物及骨組織培養(yǎng)均提示有金黃色葡萄球菌生長(zhǎng),而對(duì)照組無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。結(jié)論：將紗布條塞入兔脛骨髓腔內(nèi),注射0.3m1中等濃度(3×108cfu/ml)金黃色葡萄球菌懸液,可制備有效的脛骨骨感染模型。第二部分：大段感染骨滅菌后異位血管化的實(shí)驗(yàn)研究方法：將180只健康6月齡中國(guó)白兔分為煮沸骨組、抗生素浸泡骨組、自體正常骨組各60只。截取兔感染側(cè)脛骨2.0 cm骨段,分別經(jīng)煮沸和含抗生素鹽水浸泡處理后,置于對(duì)側(cè)大腿隱動(dòng)脈處的股直肌與股內(nèi)側(cè)肌間隙內(nèi),1.0克氏針固定于股骨上。自體正常骨組脛骨段僅用無(wú)菌生理鹽水浸泡處理,余步驟同前。三組分別于術(shù)后0、4、6、8、10、12周各處死10只兔子,通過(guò)對(duì)CD34和VEGF免疫組化染色等方法,檢測(cè)異位血管化骨內(nèi)微血管密度及VEGF蛋白表達(dá)量的相對(duì)灰度值,間接反映異位骨再血管化程度。結(jié)果：三組術(shù)后移植骨植入部位感染情況分析：煮沸骨組與自體正常骨組術(shù)后感染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),兩組與抗生素浸泡骨組感染率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；三組術(shù)后血管化分析：浸泡骨組和自體正常骨組CD34陽(yáng)性血管數(shù)及VEGF蛋白表達(dá)量的相對(duì)灰度值均在術(shù)后8周達(dá)到峰值,兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而煮沸骨組在術(shù)后10周達(dá)到峰值,但與自體正常骨組術(shù)后8周數(shù)值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：感染骨經(jīng)煮沸、抗生素浸泡處理后,可達(dá)到滅菌效果。抗生素浸泡骨和自體正常骨均在術(shù)后第8周完成再血管化,煮沸骨在術(shù)后第10周完成再血管化。第三部分：大段感染骨滅菌后異位血管化與骨活性的實(shí)驗(yàn)研究方法：取實(shí)驗(yàn)第二部分煮沸骨段和自體正常骨段6個(gè)不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)白兔樣本,通過(guò)BMP-2和Ⅰ型膠原蛋白免疫組化染色,檢測(cè)異位血管化骨內(nèi)BMP-2和Ⅰ型膠原蛋白的灰度值。再選取40只健康6月齡中國(guó)白兔,隨機(jī)分為煮沸骨組和自體正常骨組各20只,按實(shí)驗(yàn)第二部分相同處理方法后,進(jìn)行14、16周2個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)的BMP-2和Ⅰ型膠原蛋白的灰度值檢測(cè),間接反映異位血管化骨的骨活性以及與血管化之間的關(guān)系。結(jié)果：自體正常骨組BMP-2和Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量的灰度值在術(shù)后10周達(dá)到峰值,煮沸骨組術(shù)后16周達(dá)到峰值,其數(shù)值與自體正常骨組術(shù)后10周比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：自體正常骨在術(shù)后第10周轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨?煮沸骨在術(shù)后第16周轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨�。第四部分：大段游離感染性脛骨異位再血管化二期回植臨床研究方法：臨床中,我們選擇合適的病例,將大段感染性骨段取出后進(jìn)行體外滅菌處理,然后異位寄養(yǎng)于大腿前外側(cè)部旋股外側(cè)動(dòng)脈附近之股直肌與股外側(cè)肌間隙,待其再血管化完成后,二期以旋股外側(cè)動(dòng)靜脈為血管蒂,切取帶蒂再血管化骨皮瓣,游離移植至原位修復(fù)大段骨缺損。通過(guò)血管造影、X線、核素骨掃描等觀察異位骨段血管化以及回植后骨段愈合情況。結(jié)果：抗生素浸泡骨異位血管化術(shù)后4個(gè)月余、煮沸骨11個(gè)月余行DSA顯示,回植骨周圍有大量血管。分別于兩組骨回植術(shù)后6個(gè)月、8個(gè)月行X線檢查示：骨折線模糊。回植術(shù)后1個(gè)月、2個(gè)月行核素骨掃描及PET-CT結(jié)果顯示：移植骨骨代謝活躍。結(jié)論：大段感染骨體外滅菌后,在異位再血管化的過(guò)程中,與其周圍組織血管形成交通吻合,待感染創(chuàng)面治愈后,可切取帶知名血管蒂的復(fù)合組織瓣二期回植原位修復(fù)骨缺損,達(dá)到了感染廢棄骨段再利用之目的,為大段骨感染性缺損的治療提供新術(shù)式。
[Abstract]:Bone transplantation is a common method to treat bone defects . Methods : 20 healthy 6 - month - old Chinese white rabbits were randomly divided into experimental group and control group .
Histologic section observation : With the continuation of the time , the bone tissue sections of the experimental group were gradually transformed into a large number of lymphocytes infiltrated by a large amount of neutrophil infiltration , and the control group gradually changed into normal bone tissue ;
The results showed that there was no significant difference between the two groups ( P0.05 ) .
The results showed that there was no significant difference between the two groups ( P0.05 ) . The results showed that the bone graft and the autogenous normal bone reached the peak value at the 10th week after operation .

【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R246.9
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本文編號(hào)：1709241