本文選題：動(dòng)脈粥樣硬化　切入點(diǎn)：斑塊穩(wěn)定性　出處：《山東大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：研究背景： 動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)作為心腦血管疾病的病理基礎(chǔ),目前已經(jīng)成為威脅人類尤其是中老年人健康的最重要的疾病,由此導(dǎo)致的心腦血管意外發(fā)生率和死亡率極高,即使是在幸免的存活者中也仍然存在極高的致殘率。動(dòng)脈粥樣硬化所涉及的致病因素極多,且其病理過程復(fù)雜,盡管此前已有諸多學(xué)說試圖解釋其發(fā)病機(jī)理,但其具體的發(fā)病及進(jìn)展機(jī)制至今仍未明確。 諸多研究已經(jīng)證實(shí),動(dòng)脈粥樣硬化所致的臨床急性缺血事件更多與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān),而非動(dòng)脈管腔的狹窄程度。不穩(wěn)定斑塊破裂出血,并繼發(fā)導(dǎo)致血栓形成已經(jīng)成為臨床急性心血管事件的主要病理機(jī)制。由此引入了易損斑塊(Vulnerable Plaque)的概念,其作為具有極強(qiáng)破裂傾向的斑塊,特點(diǎn)包括纖維帽在各種因素下逐漸變薄、壞死脂質(zhì)核心逐漸增大、以巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的斑塊內(nèi)活性炎癥狀態(tài)、平滑肌細(xì)胞逐漸減少以及膠原含量逐漸減少。并以此為依據(jù)引入易損指數(shù),易損指數(shù)可以定量地評(píng)估斑塊易損性,其定義為：易損指數(shù)＝(脂質(zhì)占斑塊面積百分比+巨噬細(xì)胞占斑塊面積百分比)／(膠原占斑塊面積百分比+平滑肌細(xì)胞占斑塊面積百分比)。因此,探尋影響AS斑塊穩(wěn)定性的各種危險(xiǎn)因素,并尋求能有效地穩(wěn)定易損斑塊的干預(yù)靶點(diǎn),積極避免斑塊破裂及繼發(fā)的心腦血管事件成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。 既往研究證實(shí)血清淀粉樣蛋白A (serum amyloid A, SAA)家族由SAA1、 SAA2、SAA3及SAA4四個(gè)家族成員構(gòu)成。作為家族最主要組成成分的SAA1是SAA家族中表達(dá)最廣泛、活性最強(qiáng)、反應(yīng)最敏感的亞型。雖然在常態(tài)下SAA1表達(dá)水平較低,但在急性期狀態(tài)下其血清濃度在極短時(shí)間內(nèi)升高1000倍。血清SAA1主要由肝細(xì)胞合成并分泌,而其他組織細(xì)胞同樣具有局部分泌SAA1的功能。在AS斑塊內(nèi),SAA1可以由巨噬細(xì)胞合成分泌。此外,SAA在細(xì)胞膜上可能存在的受體包括：B型清道夫受體1(Scavenger receptor class B member1, SR-B I)、甲酰肽樣受體1(formyl peptide receptor like-1, FPRL1)、Toll樣受體(toll-like receptor, TLR)等。在不同細(xì)胞上SAA根據(jù)結(jié)合受體的類型,可能發(fā)揮不同的生物學(xué)作用。 近年來(lái),隨著對(duì)SAA1的深入研究,人們發(fā)現(xiàn)SAA1與AS之間存在密切的聯(lián)系。SAA1可在AS斑塊進(jìn)展的全程出現(xiàn),并且血清SAA1的濃度與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的發(fā)生成顯著正相關(guān)。最新相關(guān)臨床研究則發(fā)現(xiàn),血清SAA1的水平可以作為一個(gè)獨(dú)立的預(yù)測(cè)因素評(píng)估心血管急性事件的發(fā)生。這提示我們,SAA1對(duì)AS病程所發(fā)揮的作用可能不僅僅局限于斑塊的形成階段,而是通過某種作用機(jī)制進(jìn)一步影響AS斑塊的穩(wěn)定性,并最終影響心血管急性事件的發(fā)生。影響AS斑塊穩(wěn)定性的因素是多方面的,涉及到巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)、脂質(zhì)沉積、平滑肌增殖遷移,細(xì)胞外基質(zhì)降解及內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙等諸多環(huán)節(jié)。此前的研究一方面顯示,SAA1可增加脂質(zhì)沉積,加速脂核形成,通過促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的趨化和粘附,增加了AS斑塊中的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),這表明SAA1具有減弱斑塊穩(wěn)定性的作用；而另一些研究則表明SAA能增加平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖,同時(shí)能刺激細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)增加,這又從另外方面表明SAA1具有增加斑塊穩(wěn)定性的作用。由此可見,SAA對(duì)AS斑塊穩(wěn)定性的影響是多方面的,甚至可能是雙向的,基于以往的研究無(wú)法推斷SAA對(duì)AS斑塊穩(wěn)定性的影響,目前尚存在以下問題亟待探討和解決：①SAA1對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的具體影響；②SAA1對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)成分的影響；③SAA1發(fā)揮作用的信號(hào)通路。 研究目的： 1.通過轉(zhuǎn)染SAA1慢病毒,明確SAA1高表達(dá)對(duì)AS斑塊穩(wěn)定性的影響； 2.探討SAA1慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)斑塊內(nèi)脂質(zhì)、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及膠原的影響； 3.通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)明確SAA1對(duì)膠原表達(dá)的影響及其相關(guān)信號(hào)通路。 研究方法： 1.SAA1高表達(dá)慢病毒的構(gòu)建 獲取目的基因后,經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增后將目的基因片段與慢病毒載體plenti6.3-MSC-IRES-EGFP連接,構(gòu)建成plenti6.3-SAA1-IRES-EGFP,并經(jīng)轉(zhuǎn)化、包裝后測(cè)定慢病毒的滴度,用于實(shí)驗(yàn)。 2.動(dòng)物飼養(yǎng)及建模 將100只6-8周齡的雄性ApoE-/-小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,給予頸動(dòng)脈套管。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)8周后,隨機(jī)將剩余的95只ApoE-/-小鼠分為4組:Control組(n=23)、lenti-null組(n=25、low-lenti-SAA1組(n=23)及high-lenti-SAA1組(n=24)。Lenti-null組給予1x107TU空慢病毒載體,low-lenti-SAA1組給予1×107TUSAA1高表達(dá)慢病毒,high-lenti-SAA1組1×109TUSAA1高表達(dá)慢病毒,control組給予相同體積生理鹽水。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)4周后,小鼠空腹12小時(shí),稱體重,以0.8%戊巴比妥麻醉,打開胸腔,心臟取血,置于-80度冰箱保存,以備后續(xù)檢測(cè)。以生理鹽水灌洗心臟和主動(dòng)脈,沖洗出殘余血液。部分動(dòng)物繼以4%多聚甲醛固定直至肝臟變硬,收集小鼠套管近端的頸動(dòng)脈,以4%多聚甲醛浸泡24小時(shí)。其余部分動(dòng)物的頸動(dòng)脈標(biāo)本置于-80度冰箱保存。 3.酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 以ELISA法檢測(cè)血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、甘油三脂及TNF-α、IL-6的濃度。 4.頸動(dòng)脈油紅O染色 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈進(jìn)行5μm連續(xù)切片,每10張取1張用于油紅O染色,病變的嚴(yán)重程度用斑塊占頸動(dòng)脈斑塊面積的百分比來(lái)表示。 5.組織免疫組織化學(xué)染色 對(duì)冰凍切片行SAA1、α-SMC actin、MOMA-2、膠原I、膠原Ⅲ、TGF-β1、MMP1、MMP8免疫組化染色觀察SAA高表達(dá)對(duì)斑塊SAA、α-SMC actin、 MOMA-2、膠原I、膠原Ⅲ、TGF-β1、MMP1、MMP8的影響。 6. Western blot檢測(cè) 定量稱取凍存組織,或收集細(xì)胞,提取蛋白,采用western blot法,以GAPDH為內(nèi)參檢測(cè)SAA1、膠原I、膠原Ⅲ、TGF-β1、MMP1、MMP8、MMP2、MMP9的表達(dá)；以相應(yīng)非磷酸化狀態(tài)為內(nèi)參檢測(cè)p-p38、ERK1/2、JNK、Smad2、Smad3的表達(dá)。 7.實(shí)時(shí)定量PCR (real-time PCR)檢測(cè) 定量稱取凍存組織,Trizol法提取總RNA,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后以18S為內(nèi)參檢測(cè)SAA1的表達(dá),以確定SAA1高表達(dá)慢病毒的轉(zhuǎn)染效果。 8.免疫熒光染色 重組SAA1蛋白刺激平滑肌細(xì)胞后,免疫熒光法檢測(cè)膠原I、膠原III、MMP1和MMP8的表達(dá)。 9.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)值均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn),正態(tài)分布的計(jì)數(shù)資料應(yīng)用Student t檢驗(yàn),多組采用方差分析(ANOVA),非正態(tài)分布的資料行Mann-Whitney檢驗(yàn)。設(shè)P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 研究結(jié)果： 1.各組小鼠的一般情況 Control組(n=23)、lenti-null組(n=25)、low-lenti-SAA1組(n=23)及high-lenti-SAA1組(n=24) ApoE-/-小鼠的體重及血清TC、TG、LDL-C和HDL-C的水平濃度無(wú)差異(P0.05)。表明SAA1高表達(dá)慢病毒的局部轉(zhuǎn)染,沒有影響小鼠體內(nèi)整體的脂質(zhì)代謝。 2. plenti6.3-SAA1-IRES-EGFP慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)血清SAA1及其他炎癥因子表達(dá)的影響 Control組、lenti-null組、1ow-lenti-SAA1組的血清SAA1表達(dá)幾乎沒有變化,high-lenti-SAA1組的血清SAA1表達(dá)略高于前三組,但尚未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；這四個(gè)組的炎癥因子TNF-α、IL-6在血清中的分泌表達(dá)也未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。表明慢病毒的局部轉(zhuǎn)染,沒有引起小鼠體內(nèi)顯著的炎癥反應(yīng)。 3. plenti6.3-SAA1-IRES-EGFP;慢病毒轉(zhuǎn)染后SAA1在頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)表達(dá)的檢測(cè) SAA1的免疫組化結(jié)果顯示, control組和lenti-null組的陽(yáng)性染色面積無(wú)差異(P0.05), low-lenti-SAA1組和high-lenti-SAA1組的SAA1陽(yáng)性染色區(qū)域顯著高于lenti-null組及control組(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示,control組和lenti-null組的SAA1表達(dá)量無(wú)差異(P0.05), low-lenti-SAA1組和high-lenti-SAA1組的SAA1表達(dá)量顯著高于lenti-null組及control組(P0.05)。Real-time PCR的檢測(cè)結(jié)果與蛋白檢測(cè)結(jié)果一致。這一結(jié)果表明SAA1高表達(dá)慢病毒成功達(dá)到了使SAA1在斑塊內(nèi)表達(dá)的目的。 4. SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)脂質(zhì)聚集的影響 小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片油紅O染色顯示,lenti-null組及l(fā)ow-lenti-SAA1組與control組相比,脂質(zhì)含量未見顯著改變；high-lenti-SAA1組與control組相比,脂質(zhì)含量增加(P0.05)；同時(shí),high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,脂質(zhì)含量也顯著增加(P0.05)。這一結(jié)果表明,SAA1低濃度表達(dá)不能顯著改變斑塊內(nèi)脂質(zhì)沉積,而高濃度表達(dá)則顯著促進(jìn)脂質(zhì)在斑塊內(nèi)的聚集。 5.SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片進(jìn)行巨噬細(xì)胞染色,可以發(fā)現(xiàn)與control組相比,lenti-null組巨噬細(xì)胞比例未見顯著改變(P0.05); low-lenti-SAA1組巨噬細(xì)胞的比例顯著增加(P0.05); high-lenti-SAA1組巨噬細(xì)胞的比例顯著增加(P0.01)；high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,巨噬細(xì)胞占斑塊面積的比例雖然增加,但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。這一結(jié)果表明,兩個(gè)濃度梯度的SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染均能顯著增加頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞的聚集。 6.SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的影響 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片進(jìn)行平滑肌細(xì)胞染色,四組之間的平滑肌細(xì)胞聚集未見顯著改變,盡管兩個(gè)濃度梯度的SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染有輕微地增加頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞聚集的趨勢(shì),但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這一結(jié)果表明,SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染不能改變斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的聚集。 7.SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)膠原表達(dá)的影響 通過對(duì)小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片進(jìn)行masson染色,發(fā)現(xiàn)與control組相比,lenti-null組膠原未見顯著改變(P0.05); low-lenti-SAA1組膠原的比例顯著增加(P0.01); high-lenti-SAA1組膠原的比例未見顯著增加(P0.05); high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,膠原的比例顯著減少,達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。這一結(jié)果表明,低濃度的SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染能顯著增加頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)膠原的聚集,但增加SAA1高表達(dá)慢病毒的濃度則使這種促進(jìn)膠原增加的作用消失。 8.SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)頸動(dòng)脈斑塊易損性的影響 結(jié)果顯示,與control組相比,lenti-null組易損指數(shù)未見顯著改變(P0.05)；low-lenti-SAA1組易損指數(shù)顯著減低(P0.05); high-lenti-SAA1組易損指數(shù)顯著增加(P0.05); high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,易損指數(shù)顯著增加達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。這一結(jié)果表明,低濃度的SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染能顯著降低斑塊的易損性,但高濃度SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染則顯著增加斑塊的易損性。 9.SAA1誘導(dǎo)膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá) 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈冰凍切片進(jìn)行膠原Ⅰ的免疫組化染色發(fā)現(xiàn),與control組相比,lenti-null組膠原Ⅰ的百分比未見顯著改變(P0.05); low-lenti-SAA1組膠原Ⅰ顯著提高(P0.05); high-lenti-SAA1組膠原Ⅰ無(wú)顯著變化(P0.05); high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,膠原Ⅰ顯著減少達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。膠原Ⅲ的免疫組化染色發(fā)現(xiàn),與control組相比,lenti-null組膠原Ⅲ占斑塊面積的百分比未見顯著改變(P0.05); low-lenti-SAA1組膠原Ⅲ顯著提高(P0.05)；high-lenti-SAA1組膠原Ⅲ顯著減少(P0.05); high-lenti-SAA1組與low-lenti-SAA1組相比,膠原Ⅲ顯著減少(P0.05)。Western blot結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致。這一結(jié)果表明,低濃度的SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染能顯著增加頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)膠原Ⅰ和膠原Ⅲ的聚集,但高濃度SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染則逆轉(zhuǎn)這一作用。體外培養(yǎng)的小鼠和人平滑肌細(xì)胞顯示,SAA1刺激后,膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)呈劑量和時(shí)間依賴性增加,0.1μg/ml的濃度即可顯著促進(jìn)膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)(P0.05)。免疫熒光結(jié)果表明,經(jīng)過SAA1刺激后,膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)顯著增加。 10. MAPKs信號(hào)通路不介導(dǎo)SAA1誘導(dǎo)的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)上調(diào) 經(jīng)過不同時(shí)間的SAA1刺激后,p-JNK和p-p38MAPK的表達(dá)未發(fā)生顯著改變(P0.05); p-ERK1/2的表達(dá)均隨時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生改變,刺激可使p-ERK1/2顯著上調(diào)。然后分別應(yīng)用JNK、ERK1/2以及p38MAPK的特異性抑制劑預(yù)處理平滑肌細(xì)胞,這三種抑制劑均未能顯著抑制SAA1誘導(dǎo)的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)上調(diào)。上述結(jié)果充分說明了JNK、p38MAPK兩條信號(hào)通路在平滑肌細(xì)胞內(nèi)幾乎未被SAA1激活,因此不參與下游的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)的調(diào)控；而ERK1/2信號(hào)通路雖然能被SAA1激活,但卻沒有參與SAA1對(duì)膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)的調(diào)控。 11. Smad2/3信號(hào)通路介導(dǎo)SAA1誘導(dǎo)的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)上調(diào) 經(jīng)過不同時(shí)間的SAA1刺激后,p-Smad2和p-Smad3的表達(dá)均發(fā)生顯著改變(P0.05)。然后分別應(yīng)用Smad2/3的siRNA預(yù)處理平滑肌細(xì)胞,這兩種siRNA均能顯著抑制SAA1誘導(dǎo)的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)上調(diào)。說明Smad2/3信號(hào)通路在平滑肌細(xì)胞內(nèi)參與了下游的膠原Ⅰ和膠原Ⅲ表達(dá)的調(diào)控。 12.SAA1誘導(dǎo)膠原I和膠原IⅡ表達(dá)上調(diào)不依賴于TGF-β1 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片進(jìn)行TGF-β1的免疫組化染色,四組未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,表明SAA1高表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染在小鼠頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)沒有引起TGF-β1表達(dá)的改變。SAA1重組蛋白刺激平滑肌細(xì)胞不同時(shí)間,TGF-β1的表達(dá)未發(fā)生顯著改變(P0.05)；接著經(jīng)過TGF-β1的siRNA及其特異性抑制劑SB431542干預(yù)后,SAA1誘導(dǎo)的膠原I和膠原III表達(dá)上調(diào)仍沒有改變。這些結(jié)果充分證明SAA1誘導(dǎo)膠原I和膠原Ⅲ表達(dá)上調(diào)的過程不依賴于TGF-β1。 13.SAA1通過增加MMP-2、MMP-8及MMP-9表達(dá)促進(jìn)膠原降解 對(duì)小鼠頸動(dòng)脈斑塊冰凍切片進(jìn)行免疫組化染色,MMP1在四組未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。MMP8結(jié)果表明,lenti-null組、low-lenti-SAA1組與control組相比,MMP8占斑塊面積的百分比未見顯著改變(P0.05); high-lenti-SAA1組MMP8占斑塊面積的百分比顯著升高(P0.01)。體外培養(yǎng)的小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞中,1μg/ml和10μg/ml濃度的SAA1蛋白刺激巨噬細(xì)胞后,免疫熒光檢測(cè)表明兩個(gè)濃度均無(wú)法刺激MMP1表達(dá)顯著升高(P0.05);1μg/ml的濃度也無(wú)法顯著增加MMP8的表達(dá),但10μg/ml的濃度則顯著增強(qiáng)MMP8的表達(dá)。Western blot結(jié)果顯示,SAA1刺激后,MMP1的表達(dá)無(wú)顯著改變(P0.05)。而MMP8表達(dá)則呈劑量依賴性增加,當(dāng)濃度達(dá)到5μg/ml以上時(shí)達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。此外1μg/ml的濃度的SAA1重組蛋白即可顯著增加MMP2和MMP9的表達(dá)(P0.05),隨刺激濃度的升高,MMP2和MMP9的表達(dá)展現(xiàn)出劑量依賴性。以上結(jié)果表明,SAA1能夠刺激MMP8、MMP2和MMP9的表達(dá),并顯示出劑量依賴性。 結(jié)論： 1.SAA1與實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)； 2.低濃度SAA1慢病毒轉(zhuǎn)染能顯著增加AS斑塊的穩(wěn)定性,而高濃度SAA1慢病毒轉(zhuǎn)染則顯著減低AS斑塊的穩(wěn)定性； 3.低濃度SAA1即可增加膠原I、Ⅲ的表達(dá),且0.1μg/ml的濃度即可達(dá)到刺激膠原I、III表達(dá)的最大效應(yīng)； 4.SAA1通過Smad2/3通路增加膠原I、III的表達(dá),而與MAPKs和TGF-β1無(wú)關(guān)； 5.濃度為5μg/ml以上的高濃度SAA1通過激活MMP-8促進(jìn)膠原降解從而減低AS斑塊的穩(wěn)定性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R543.5

【共引文獻(xiàn)】

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9 談建新;陳紅霞;張和平;王敬敏;郭宗艷;張?zhí)K明;毋亞坤;;心腦通配方對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中TIMP-2的影響[J];河南中醫(yī);2014年03期

10 盧昊;劉婷;陳宇;毛彤春;雷澤源;樊東力;;LATS1-YAP信號(hào)通路對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)合成的調(diào)控[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2014年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李平;阿托伐他汀和硒對(duì)SAA作用下血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響[D];鄭州大學(xué);2013年

2 田，

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