發(fā)布時間：2018-03-18 07:36

  本文選題：機械通氣　切入點：肺損傷　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景機械通氣肺損傷(Ventilatior-induced lung injury, VILI),是指在機械通氣過程中因操作不當(dāng)或機體免疫反應(yīng),造成的肺組織損傷或其他嚴(yán)重并發(fā)癥等問題,臨床主要表現(xiàn)為患者的突發(fā)性呼吸窘迫、血壓下降、煩躁不安或面部青紫等,有研究表明其臨床發(fā)病率在20-35%左右,嚴(yán)重并發(fā)癥或死亡率在18～32%左右。炎癥因子參與并對損傷進行調(diào)控的說法越來越受到臨床研究人員的重視。炎癥因子是人體在進行免疫應(yīng)答反應(yīng)過程中分泌和合成的重要細胞因子,按照作用的不同可以簡單的分為抗炎和促炎因子兩部分,其中TNF-α是促炎因子中出現(xiàn)時間最早和作用最明顯的炎性介質(zhì),而IL-10是抗炎因子中最為典型的多功能負性調(diào)節(jié)因子。雖然目前針對不同潮氣量機械通氣導(dǎo)致肺損傷的研究很多,但是對不同潮氣量通氣對促炎及抑炎因子表達影響的研究相對較少。本文還就通氣量大小與IL-10和TNF-α兩種炎癥因子濃度變化相關(guān)性進行了研究分析。第一部分不同潮氣量機械通氣大鼠實驗?zāi)Ｐ偷闹苽浜头谓M織損傷觀察目的：建立大鼠不同潮氣量機械通氣實驗?zāi)Ｐ筒牧吓c方法：選取中山大學(xué)動物試驗中心清潔級同批,雌雄各半的24只SD大鼠,體重均為220-250 g,試驗時間為2012年10月-2013年6月。將24只SD大鼠隨機分為插管不通氣F組,小潮氣量通氣L組和大潮氣量通氣H組等三組,每組各8只(n=8)。試驗結(jié)束后將大鼠置于25℃恒溫環(huán)境中進行24小時的恢復(fù)飼養(yǎng)。恢復(fù)飼養(yǎng)結(jié)束后大鼠按照0.35g/100g的標(biāo)準(zhǔn)進行10%水合氯醛的腹腔注射麻醉,待大鼠失去自主活動意識后,立即將試驗動物經(jīng)頸動脈放血處死,開胸分離左右兩側(cè)完整肺組織并觀察記錄外觀,結(jié)果：1.大鼠行為學(xué)觀察插管未通氣F組大鼠24小時恢復(fù)飼養(yǎng)過程中活動正常,呼吸及行為無明顯不適癥狀；小潮氣量通氣L組大鼠活躍度降低,倦臥,被毛直立,個別大鼠出現(xiàn)呼吸急促癥狀；大潮氣量機械通氣H組大鼠皮膚出現(xiàn)紫紺,倦臥,被毛粗亂,個別動物還出現(xiàn)走路搖晃等神經(jīng)癥狀。2.大鼠肺組織外觀觀察插管未通氣F組的肺臟外觀基本正常,色澤紅潤,無出血或腫脹現(xiàn)象；小潮氣量機械通氣L組,同F(xiàn)組相比表面色澤基本正常,肺組織略顯腫脹,有少量肉眼可見的出血點；大潮氣量機械通氣H組肺組織有血性液體滲出,整體有明顯腫脹,表面可見片狀出血或點狀出血癥狀。3.大鼠W/D值變化隨著機械通氣量的增加,三組大鼠的肺組織干濕比(W/D值)會明顯增大,F組的W/D平均值為5.14,L組與H組分別為6.54和9.41,其中L、H組與正常組F相比較有變化顯著,結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。L組與H組間對比,H組的比值明顯大于L組,對比有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.大鼠肺組織損傷評分隨著機械通氣量的增加,大鼠的肺組織損傷評分會明顯增大,其中H組與L組及正常組F相比較有變化顯著,結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；L組與F組間對比,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.大鼠病理組織學(xué)觀察光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠的肺組織病理切片,插管不通氣F組各級支氣管上皮和肺泡結(jié)構(gòu)完整,肺泡間隔正常,無炎性細胞浸潤；小潮氣量機械通氣L組,肺間隔增寬,肺間質(zhì)出現(xiàn)輕微水腫,肺泡腔有少量滲出,少量炎性細胞浸潤；大潮氣量機械通氣H組肺泡間隔明顯增厚,部分肺泡破裂融合,肺泡腔內(nèi)有出血,可見彌漫性肺間質(zhì)水腫和小血管斷裂,炎性細胞大量積聚。結(jié)論：1.大鼠行為活動、肺組織外觀及濕/干重比值的改變,表明不同潮氣量機械通氣模型的成功建立,同時也說明通氣量大小的改變與大鼠肺組織損傷的程度密切相關(guān),尤其是過度通氣會引發(fā)大鼠肺組織損傷的加重。2.與大潮氣量機械通氣H組相比小潮氣量機械通氣L組,肺組織損傷的程度較輕,不會顯著增加大鼠的肺部損傷或加劇組織細胞內(nèi)的炎性反應(yīng)。第二部分不同潮氣量機械通氣對大鼠肺組織勻漿中TNF-α與IL-10表達的影響目的：觀察不同潮氣量機械通氣,對大鼠肺組織勻漿中TNF-α與IL-10含量表達的影響。方法：1.動物分組與模型的建立動物模型的制備在第一部分已經(jīng)完成,不同的是標(biāo)本的制備和指標(biāo)的測定等。2.肺組織勻漿的制備將第一部分中留存的右側(cè)肺組織自液氮中取出,各取2g組織塊用生理鹽水進行充分的漂洗,并將處理好的組織塊剪碎倒入勻漿器中制成勻漿,然后將制備好的勻漿在4℃的勻漿用低溫離心機中進行分離,其中離心時間為20min,離心轉(zhuǎn)速為12000r/min,最后取勻漿的上清液,棄掉下面的沉淀,-70℃凍存待檢。3.炎癥因子的測定炎性因子的測定須取上述標(biāo)本100ul,檢測方法選取的是雙抗體夾心ELISA法,具體的操作步驟和檢測方法按相關(guān)操作規(guī)程和試劑盒說明書進行。結(jié)果：1.大鼠肺組織勻漿中TNF-α的表達變化實驗結(jié)果表明,大潮氣量通氣H組相比未通氣的對照組F肺組織勻漿中TNF-α含量表達明顯增高,對比結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；小潮氣量通氣L組對比未通氣的F組,肺組織勻漿中TNF-α蛋白含量雖有所升高,但對比結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；H組與L組之間肺組織勻漿的TNF-α含量表達對比,H組明顯高于L組,對比結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.大鼠肺組織勻漿中IL-10的表達變化實驗結(jié)果表明,大潮氣量通氣H組相比未通氣的對照組F肺組織勻漿中IL-10含量表達明顯增高,對比結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；小潮氣量通氣L組對比未通氣的F組,肺組織勻漿中IL-10的表達雖有所升高,但對比結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；H組與L組之間肺組織勻漿的IL-10含量表達對比,H組明顯高于L組,對比結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.不同潮氣量大小與TNF-α、IL-10表達變化的相關(guān)性[組間]對于不同潮氣量機械通氣,H組與L組肺組織勻漿中TNF-α(r=0.543, P=0.105)的含量變化無顯著相關(guān)性,IL-10 (r=0.393,P=0.261)的含量變化也無顯著相關(guān)性。4.肺組織勻漿中TNF-α與IL-10含量表達變化的相關(guān)性[組內(nèi)]對于小潮氣量通氣L組,肺組織勻漿中TNF-α與IL-10的表達變化呈中等正相關(guān)(r=0.754,P=0.012)；大潮氣量通氣H組,肺組織勻漿中TNF-α與IL-10的表達變化呈顯著正相關(guān)(r=0.915,P=0.000)。結(jié)論：1.大潮氣量的機械通氣不僅會加劇大鼠肺組織的損傷,同時還會導(dǎo)致肺組織細胞內(nèi)炎性因子TNF-α和IL-10含量的顯著升高。2.小潮氣量機械通氣相對于大潮氣量而言,可以減輕大鼠的肺組織的損傷,而肺組織勻漿中TNF-α和IL-10的表達也有所降低。3.機械通氣潮氣量大小的變化與肺組織勻漿中TNF-α和IL-10的表達變化無顯著相關(guān)性,也就是說潮氣量大小的改變并不能作為預(yù)測肺組織勻漿中TNF-α和IL-10表達變化的指標(biāo)。4.同一潮氣量通氣條件下肺組織勻漿中TNF-α濃度的變化與IL-10的濃度變化呈密切相關(guān),也就是說當(dāng)TNF-α的表達升高時,IL-10的表達也會增加。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R614

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 林飛;潘靈輝;錢衛(wèi);黃宇;杜學(xué)柯;裴圣林;;IL-6、IL-8在不同潮氣量單肺通氣肺癌根治術(shù)中的表達[J];廣西醫(yī)學(xué);2012年07期

2 趙銀潔;葛衡江;;機械通氣相關(guān)性肺損傷及發(fā)病機制[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年30期

3 郭玉曼;遲俊玲;;血清IL-10和TNF-α水平與哮喘治療預(yù)后的相關(guān)性分析[J];臨床肺科雜志;2012年09期

4 王曉青;;慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-8、IL-10、α-HBDH、CRP及NO水平的變化[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年12期

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