本文選題：機(jī)械通氣　切入點(diǎn)：肺損傷　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景機(jī)械通氣肺損傷(Ventilatior-induced lung injury, VILI),是指在機(jī)械通氣過(guò)程中因操作不當(dāng)或機(jī)體免疫反應(yīng),造成的肺組織損傷或其他嚴(yán)重并發(fā)癥等問(wèn)題,臨床主要表現(xiàn)為患者的突發(fā)性呼吸窘迫、血壓下降、煩躁不安或面部青紫等,有研究表明其臨床發(fā)病率在20-35%左右,嚴(yán)重并發(fā)癥或死亡率在18～32%左右。炎癥因子參與并對(duì)損傷進(jìn)行調(diào)控的說(shuō)法越來(lái)越受到臨床研究人員的重視。炎癥因子是人體在進(jìn)行免疫應(yīng)答反應(yīng)過(guò)程中分泌和合成的重要細(xì)胞因子,按照作用的不同可以簡(jiǎn)單的分為抗炎和促炎因子兩部分,其中TNF-α是促炎因子中出現(xiàn)時(shí)間最早和作用最明顯的炎性介質(zhì),而IL-10是抗炎因子中最為典型的多功能負(fù)性調(diào)節(jié)因子。雖然目前針對(duì)不同潮氣量機(jī)械通氣導(dǎo)致肺損傷的研究很多,但是對(duì)不同潮氣量通氣對(duì)促炎及抑炎因子表達(dá)影響的研究相對(duì)較少。本文還就通氣量大小與IL-10和TNF-α兩種炎癥因子濃度變化相關(guān)性進(jìn)行了研究分析。第一部分不同潮氣量機(jī)械通氣大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹苽浜头谓M織損傷觀察目的：建立大鼠不同潮氣量機(jī)械通氣實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒牧吓c方法：選取中山大學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)中心清潔級(jí)同批,雌雄各半的24只SD大鼠,體重均為220-250 g,試驗(yàn)時(shí)間為2012年10月-2013年6月。將24只SD大鼠隨機(jī)分為插管不通氣F組,小潮氣量通氣L組和大潮氣量通氣H組等三組,每組各8只(n=8)。試驗(yàn)結(jié)束后將大鼠置于25℃恒溫環(huán)境中進(jìn)行24小時(shí)的恢復(fù)飼養(yǎng)�；謴�(fù)飼養(yǎng)結(jié)束后大鼠按照0.35g/100g的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行10%水合氯醛的腹腔注射麻醉,待大鼠失去自主活動(dòng)意識(shí)后,立即將試驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血處死,開(kāi)胸分離左右兩側(cè)完整肺組織并觀察記錄外觀,結(jié)果：1.大鼠行為學(xué)觀察插管未通氣F組大鼠24小時(shí)恢復(fù)飼養(yǎng)過(guò)程中活動(dòng)正常,呼吸及行為無(wú)明顯不適癥狀；小潮氣量通氣L組大鼠活躍度降低,倦臥,被毛直立,個(gè)別大鼠出現(xiàn)呼吸急促癥狀；大潮氣量機(jī)械通氣H組大鼠皮膚出現(xiàn)紫紺,倦臥,被毛粗亂,個(gè)別動(dòng)物還出現(xiàn)走路搖晃等神經(jīng)癥狀。2.大鼠肺組織外觀觀察插管未通氣F組的肺臟外觀基本正常,色澤紅潤(rùn),無(wú)出血或腫脹現(xiàn)象；小潮氣量機(jī)械通氣L組,同F(xiàn)組相比表面色澤基本正常,肺組織略顯腫脹,有少量肉眼可見(jiàn)的出血點(diǎn)；大潮氣量機(jī)械通氣H組肺組織有血性液體滲出,整體有明顯腫脹,表面可見(jiàn)片狀出血或點(diǎn)狀出血癥狀。3.大鼠W/D值變化隨著機(jī)械通氣量的增加,三組大鼠的肺組織干濕比(W/D值)會(huì)明顯增大,F組的W/D平均值為5.14,L組與H組分別為6.54和9.41,其中L、H組與正常組F相比較有變化顯著,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。L組與H組間對(duì)比,H組的比值明顯大于L組,對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.大鼠肺組織損傷評(píng)分隨著機(jī)械通氣量的增加,大鼠的肺組織損傷評(píng)分會(huì)明顯增大,其中H組與L組及正常組F相比較有變化顯著,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；L組與F組間對(duì)比,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.大鼠病理組織學(xué)觀察光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠的肺組織病理切片,插管不通氣F組各級(jí)支氣管上皮和肺泡結(jié)構(gòu)完整,肺泡間隔正常,無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；小潮氣量機(jī)械通氣L組,肺間隔增寬,肺間質(zhì)出現(xiàn)輕微水腫,肺泡腔有少量滲出,少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；大潮氣量機(jī)械通氣H組肺泡間隔明顯增厚,部分肺泡破裂融合,肺泡腔內(nèi)有出血,可見(jiàn)彌漫性肺間質(zhì)水腫和小血管斷裂,炎性細(xì)胞大量積聚。結(jié)論：1.大鼠行為活動(dòng)、肺組織外觀及濕/干重比值的改變,表明不同潮氣量機(jī)械通氣模型的成功建立,同時(shí)也說(shuō)明通氣量大小的改變與大鼠肺組織損傷的程度密切相關(guān),尤其是過(guò)度通氣會(huì)引發(fā)大鼠肺組織損傷的加重。2.與大潮氣量機(jī)械通氣H組相比小潮氣量機(jī)械通氣L組,肺組織損傷的程度較輕,不會(huì)顯著增加大鼠的肺部損傷或加劇組織細(xì)胞內(nèi)的炎性反應(yīng)。第二部分不同潮氣量機(jī)械通氣對(duì)大鼠肺組織勻漿中TNF-α與IL-10表達(dá)的影響目的：觀察不同潮氣量機(jī)械通氣,對(duì)大鼠肺組織勻漿中TNF-α與IL-10含量表達(dá)的影響。方法：1.動(dòng)物分組與模型的建立動(dòng)物模型的制備在第一部分已經(jīng)完成,不同的是標(biāo)本的制備和指標(biāo)的測(cè)定等。2.肺組織勻漿的制備將第一部分中留存的右側(cè)肺組織自液氮中取出,各取2g組織塊用生理鹽水進(jìn)行充分的漂洗,并將處理好的組織塊剪碎倒入勻漿器中制成勻漿,然后將制備好的勻漿在4℃的勻漿用低溫離心機(jī)中進(jìn)行分離,其中離心時(shí)間為20min,離心轉(zhuǎn)速為12000r/min,最后取勻漿的上清液,棄掉下面的沉淀,-70℃凍存待檢。3.炎癥因子的測(cè)定炎性因子的測(cè)定須取上述標(biāo)本100ul,檢測(cè)方法選取的是雙抗體夾心ELISA法,具體的操作步驟和檢測(cè)方法按相關(guān)操作規(guī)程和試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。結(jié)果：1.大鼠肺組織勻漿中TNF-α的表達(dá)變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大潮氣量通氣H組相比未通氣的對(duì)照組F肺組織勻漿中TNF-α含量表達(dá)明顯增高,對(duì)比結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；小潮氣量通氣L組對(duì)比未通氣的F組,肺組織勻漿中TNF-α蛋白含量雖有所升高,但對(duì)比結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；H組與L組之間肺組織勻漿的TNF-α含量表達(dá)對(duì)比,H組明顯高于L組,對(duì)比結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.大鼠肺組織勻漿中IL-10的表達(dá)變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大潮氣量通氣H組相比未通氣的對(duì)照組F肺組織勻漿中IL-10含量表達(dá)明顯增高,對(duì)比結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；小潮氣量通氣L組對(duì)比未通氣的F組,肺組織勻漿中IL-10的表達(dá)雖有所升高,但對(duì)比結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；H組與L組之間肺組織勻漿的IL-10含量表達(dá)對(duì)比,H組明顯高于L組,對(duì)比結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.不同潮氣量大小與TNF-α、IL-10表達(dá)變化的相關(guān)性[組間]對(duì)于不同潮氣量機(jī)械通氣,H組與L組肺組織勻漿中TNF-α(r=0.543, P=0.105)的含量變化無(wú)顯著相關(guān)性,IL-10 (r=0.393,P=0.261)的含量變化也無(wú)顯著相關(guān)性。4.肺組織勻漿中TNF-α與IL-10含量表達(dá)變化的相關(guān)性[組內(nèi)]對(duì)于小潮氣量通氣L組,肺組織勻漿中TNF-α與IL-10的表達(dá)變化呈中等正相關(guān)(r=0.754,P=0.012)；大潮氣量通氣H組,肺組織勻漿中TNF-α與IL-10的表達(dá)變化呈顯著正相關(guān)(r=0.915,P=0.000)。結(jié)論：1.大潮氣量的機(jī)械通氣不僅會(huì)加劇大鼠肺組織的損傷,同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致肺組織細(xì)胞內(nèi)炎性因子TNF-α和IL-10含量的顯著升高。2.小潮氣量機(jī)械通氣相對(duì)于大潮氣量而言,可以減輕大鼠的肺組織的損傷,而肺組織勻漿中TNF-α和IL-10的表達(dá)也有所降低。3.機(jī)械通氣潮氣量大小的變化與肺組織勻漿中TNF-α和IL-10的表達(dá)變化無(wú)顯著相關(guān)性,也就是說(shuō)潮氣量大小的改變并不能作為預(yù)測(cè)肺組織勻漿中TNF-α和IL-10表達(dá)變化的指標(biāo)。4.同一潮氣量通氣條件下肺組織勻漿中TNF-α濃度的變化與IL-10的濃度變化呈密切相關(guān),也就是說(shuō)當(dāng)TNF-α的表達(dá)升高時(shí),IL-10的表達(dá)也會(huì)增加。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R614

【參考文獻(xiàn)】

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1 林飛;潘靈輝;錢(qián)衛(wèi);黃宇;杜學(xué)柯;裴圣林;;IL-6、IL-8在不同潮氣量單肺通氣肺癌根治術(shù)中的表達(dá)[J];廣西醫(yī)學(xué);2012年07期

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本文編號(hào)：1628597