本文關(guān)鍵詞： 鈣敏感受體 緊密連接蛋白-14 腎結(jié)石 大鼠　出處：《石河子大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 本研究通過構(gòu)建大鼠腎草酸鈣結(jié)石模型，觀察CaSR及Claudin-14在兩組大鼠腎組織中的表達(dá)變化，同時(shí)，觀察CaSR及Claudin-14與大鼠血清BUN、Cr、Ca2+含量、24h尿量、24h尿鈣以及尿pH相關(guān)性。 方法 選用成年S-D雄性大鼠30只，隨機(jī)分為2組（n=15），對(duì)照組和結(jié)石組，采用1%乙二醇自來水自由飲水+2%氯化銨2ml灌胃構(gòu)建大鼠腎草酸鈣結(jié)石模型；實(shí)驗(yàn)第28天收集實(shí)驗(yàn)大鼠24h尿液，進(jìn)行24h尿鈣含量測(cè)定。水合氯醛麻醉下腔靜脈穿刺取血4ml，3000r/min4℃離心10min，取上清，檢測(cè)血清BUN、Cr、Ca2+含量；取血后處死實(shí)驗(yàn)大鼠，手術(shù)切取左腎，石蠟包埋后切片行常規(guī)HE染色，同時(shí)行免疫組織化學(xué)染色觀察CaSR陽性表達(dá)情況；RT-PCR法檢測(cè)腎臟組織中的Claudin-14mRNA的表達(dá)；Western-Blotting法檢測(cè)腎臟組織CaSR和Claudin-14蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 1.與對(duì)照組比較，結(jié)石組血肌酐、尿素氮顯增高（P＜0.01），結(jié)石組24h尿鈣排泄量、24h尿量顯著增高（P＜0.01），兩組血鈣水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩組間24h尿pH差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 2.肉眼可見結(jié)石組大鼠腎組織腫脹，表面點(diǎn)狀分布黃白色結(jié)晶或鈣化。HE染色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)結(jié)石組大鼠腎組織多數(shù)腎小管管腔內(nèi)彌漫散布無色透明、片狀結(jié)晶。 3.光鏡下觀察見CaSR在兩組大鼠腎小管上皮細(xì)胞均有不同程度的陽性表達(dá)，且結(jié)石組大鼠腎小管上皮細(xì)胞CaSR呈彌漫性表達(dá)且強(qiáng)度明顯增高。 4.與對(duì)照組比較，結(jié)石組Claudin-14mRNA顯著增高，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 5.與對(duì)照組比較，，結(jié)石組CaSR蛋白含量顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Claudin-14蛋白含量顯著增高，對(duì)照組未見表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。同時(shí)，CaSR和Claudin-14蛋白表達(dá)也存在正相關(guān)(r0.896，P＜0.01)。 6. CaSR和Claudin-14蛋白表達(dá)與24h尿鈣均呈正相關(guān)，分別為r=0.878，P＜0.01；r=0.934，P＜0.01。 結(jié)論 1.采用1％乙二醇自由飲水㧏2％氯化銨每日2mL灌胃可以建立穩(wěn)定的腎草酸鈣結(jié)石大鼠模型。 2. CaSR及Claudin-14在結(jié)石組大鼠腎組織中高表達(dá)，且與大鼠24h尿鈣排泄呈顯著正相關(guān)，提示CaSR在結(jié)石大鼠腎組織表達(dá)增高可能通過上調(diào)Claudin-14表達(dá)，抑制腎小管對(duì)鈣離子的重吸收，進(jìn)而促進(jìn)尿鈣排泄增加，從而參與腎小管結(jié)石結(jié)晶的形成。
[Abstract]:Purpose. In this study, the rat renal calcium oxalate calculi model was established to observe the expression of CaSR and Claudin-14 in the renal tissues of the two groups, and to observe the correlation between the contents of CaSR and Claudin-14 and the 24-hour urine volume and urine pH of the rats. Method. Thirty adult S-D male rats were randomly divided into two groups: the control group and the stone group. The rat model of calcium oxalate calculi was established by using 2% ammonium chloride 2ml free drinking water with 1% glycol tap water, and 24 hours urine was collected on the 28th day of the experiment. The urine calcium content of 24 hours was measured. The blood of 4 ml / 3000r / min 4 鈩

本文編號(hào)：1527491