發(fā)布時(shí)間：2018-02-23 13:50

  本文關(guān)鍵詞： 束縛應(yīng)激 對(duì)乙酰氨基酚 肝損傷 谷胱甘肽 兒茶酚胺 α受體　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2014年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景和目的 對(duì)乙酰氨基酚(商品名為撲熱息痛,Acetaminophen,簡(jiǎn)稱(chēng)APAP)是世界上應(yīng)用最廣泛的非處方類(lèi)解熱鎮(zhèn)痛藥。在美國(guó)銷(xiāo)售的含有APAP的制劑超過(guò)300種,平均每年的銷(xiāo)量是十億片。盡管在常規(guī)治療劑量下APAP非常安全,但是該藥的治療窗較窄。因?yàn)檫^(guò)量使用APAP每年有大于100,000例的患者需要到中毒治療中心接受治療,其中包括超過(guò)56,000的門(mén)診患者和2600例的住院病人和估計(jì)458例死于急性肝衰竭的病人。根據(jù)美國(guó)急性肝衰竭研究委員會(huì)報(bào)告,美國(guó)50%的急性肝衰竭病人都是由于APAP中毒,每年的人數(shù)超過(guò)1100人。有人報(bào)道,在APAP導(dǎo)致急性肝衰竭的發(fā)生率每年呈遞增趨勢(shì),1998年是21%,而2003年是51%。由于對(duì)乙酰氨基酚的肝毒性,在2011年1月美國(guó)FDA發(fā)布公告要求在處方藥中APAP的含量每片不得超過(guò)325mg。在2014年2月FDA又發(fā)布報(bào)告,建議醫(yī)生和醫(yī)療人員禁用含APAP超過(guò)325mg的藥品。雖然過(guò)量使用是導(dǎo)致APAP肝臟毒性的重要原因,但也有很多導(dǎo)致APAP中毒的風(fēng)險(xiǎn)因素,包括營(yíng)養(yǎng)不良、飲酒和聯(lián)合用藥。迄今為止未見(jiàn)有研究報(bào)道外界應(yīng)激對(duì)APAP肝毒性的影響。 應(yīng)激是一種機(jī)體狀態(tài),指機(jī)體在內(nèi)部或外界刺激或應(yīng)激原的影響下后,機(jī)體產(chǎn)生的一系列非特異性應(yīng)答反應(yīng)。應(yīng)激原可以是物理因素,也可以是精神因素或二者的綜合作用。當(dāng)機(jī)體受到強(qiáng)烈刺激時(shí),機(jī)體就會(huì)興奮交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)(sympathoadrenomedullary system,SAM)和下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA),表現(xiàn)為釋放兒茶酚胺和糖皮質(zhì)激素等外周遞質(zhì)。很早之前,大家已經(jīng)認(rèn)識(shí)到應(yīng)激能夠影響許多疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程和結(jié)果。目前人們主要關(guān)注的是應(yīng)激與心血管系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病、HIV/AIDS以及癌癥等之間的關(guān)系。大量的研究結(jié)果表明應(yīng)激可以抑制特異性免疫反應(yīng),誘導(dǎo)產(chǎn)生或加重抑郁癥、心血管系統(tǒng)疾病、肝臟疾病,并促進(jìn)HIV/AIDS和癌癥的病情發(fā)展。 目前,有越來(lái)越多的證據(jù)表明應(yīng)激對(duì)肝臟疾病和功能存在影響。根據(jù)早期的臨床報(bào)道,社會(huì)心理應(yīng)激可以影響肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展及結(jié)果。例如,Hirose等發(fā)現(xiàn)情緒應(yīng)激反應(yīng)(如受到催眠暗示的恐懼或焦慮)可以明顯增加肝臟血流量(HBF)。Fukudo等研究發(fā)現(xiàn),酒精性肝炎中社會(huì)心理應(yīng)激的嚴(yán)重程度與肝炎惡化及肝臟纖維化變化之間存在緊密的聯(lián)系。在Beck Depression Inventory雜志中,也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在慢性乙型病毒性肝炎患者,其血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine transaminase,ALT)水平與其精神抑郁程度之間存在明顯的正相關(guān)關(guān)系。而且,即使剔除了包括年齡、性別、教育水平、抽煙、飲酒與否以及病程等混雜因素,在Grossarth-Maticek分型中慢性丙型病毒性肝炎的嚴(yán)重性與I型人格人群具有相關(guān)性。在原位肝臟移植中,發(fā)生急性排斥反應(yīng)的患者手術(shù)前的人格品質(zhì)更傾向于是那些“順從的”“相對(duì)易于受人控制的”以及“淡漠心境”者。在動(dòng)物試驗(yàn)研究中,人們同樣證明了應(yīng)激與肝臟疾病之間的緊密相互聯(lián)系。例如,電擊應(yīng)激可以加重四氯化碳處理過(guò)的小鼠肝臟損害,也可以使α-半乳糖胺誘導(dǎo)的肝炎加重,這種肝炎和瘧疾、沙門(mén)氏菌感染誘導(dǎo)的肝損害以及乙型、丙型病毒性肝炎有關(guān)。有人在給大鼠施加多種不同的急性應(yīng)激后,電鏡檢查發(fā)現(xiàn)肝臟粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)破裂并膨脹,糖原耗竭,線粒體腫脹,其中最顯著的變化是細(xì)胞膜的自噬泡數(shù)量增多和體積變大。有意思的是,即使在正常的嚙齒類(lèi)動(dòng)物中,束縛以及電擊應(yīng)激可以觸發(fā)溫和的肝臟損害,這種肝損害以輕度的血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平升高為特點(diǎn)。此外,社會(huì)隔絕應(yīng)激(social isolation stress)可以增加轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α轉(zhuǎn)基因小鼠自發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的發(fā)生率,同時(shí)還可以加速小鼠結(jié)腸腫瘤肝轉(zhuǎn)移進(jìn)程。 動(dòng)物束縛應(yīng)激模型是一種直接、非損傷性和簡(jiǎn)單的心理與生理應(yīng)激模型。束縛應(yīng)激可產(chǎn)生心理性的逃避反應(yīng)和限制機(jī)體行動(dòng)。束縛應(yīng)激模型不但可準(zhǔn)確且可靠地控制應(yīng)激實(shí)驗(yàn)條件,而且與給藥造模、手術(shù)造模以及外界強(qiáng)烈的溫度改變或噪音相比,束縛應(yīng)激模型可以有效地檢測(cè)促腎上腺皮質(zhì)素、皮質(zhì)酮、fos蛋白、HPA軸的脫敏和細(xì)胞因子的表達(dá)。同時(shí)束縛應(yīng)激可以協(xié)同多種因素進(jìn)行研究,例如學(xué)習(xí)記憶、攝食情況和聲音刺激等。在最近15年間,束縛應(yīng)激模型一直是使用最多的應(yīng)激動(dòng)物模型。 本課題研究目的是：一、考察束縛應(yīng)激對(duì)APAP給藥后肝毒性的影響及可能的發(fā)生機(jī)制；二、探討兒茶酚胺遞質(zhì)和腎上腺受體在束縛應(yīng)激誘導(dǎo)肝損傷過(guò)程中作用。 方法 實(shí)驗(yàn)選用Balb/c小鼠,雄性,SPF級(jí),8-10周齡,購(gòu)自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。動(dòng)物飼養(yǎng)于解放軍疾病預(yù)防控制所毒理學(xué)評(píng)價(jià)研究中心屏障設(shè)施內(nèi),溫度控制在19-26℃,12小時(shí)照明,12小時(shí)黑暗,動(dòng)物自由進(jìn)食飲水。正式實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物檢疫觀察3天。實(shí)驗(yàn)前一天禁食過(guò)夜,實(shí)驗(yàn)當(dāng)天同一時(shí)間(上午8：00)將動(dòng)物放入束縛筒內(nèi),束縛后保證小鼠自由呼吸,身體無(wú)法扭動(dòng)同時(shí)不受擠壓。束縛應(yīng)激后動(dòng)物或者被立刻麻醉處死或者放回籠內(nèi)繼續(xù)飼養(yǎng)。動(dòng)物處死時(shí),均用戊巴比妥鈉麻醉,從腹主動(dòng)脈采血。動(dòng)物采血后,立刻取下肝臟,生理鹽水沖洗,取左肝頁(yè)用中性福爾馬林固定,石蠟包埋用于病理組織學(xué)檢查。剩余的肝臟用液氮速凍并保存于-80℃。 在考察束縛應(yīng)激對(duì)對(duì)乙酰氨基酚肝毒性影響的實(shí)驗(yàn)中,在束縛應(yīng)激后的各時(shí)間點(diǎn)腹腔注射150mg/kg的APAP或生理鹽水。APAP給藥后4小時(shí),動(dòng)物麻醉處死采樣。在考察兒茶酚胺遞質(zhì)和腎上腺素受體對(duì)束縛應(yīng)激誘導(dǎo)肝損傷影響的實(shí)驗(yàn)中,束縛前30分鐘腹腔注射1mg/kg的哌唑嗪用于阻斷α-1受體；束縛前30分鐘腹腔注射2mg/kg的育亨賓用于阻斷a-2受體；束縛前30分鐘腹腔注射20mg/kg的倍他洛爾用于阻斷β-1受體；束縛前30分鐘腹腔注射5mg/kg的ICI118,551用于阻斷β-2受體；束縛前24小時(shí)皮下注射2mg/kg的利血平用于耗竭兒茶酚胺遞質(zhì)。 用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),用用酶循環(huán)法測(cè)定肝臟中谷胱甘肽的含量；用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)血清IL-6和TNF-a含量。對(duì)肝組織進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè),HE常規(guī)染色觀察病變程度。用TUNEL法原位檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。用免疫組化法檢測(cè)檢鋇Kupffer細(xì)胞活性情況。用蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測(cè)肝組織caspse-3、Caspase-9、Bcl-2,和Bax的蛋白表達(dá)量。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理,用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(Meand士SD)表示；單因素試驗(yàn)的多組比較采用單因素方差分析(One. way ANOVA),方差齊時(shí)采用多重比較LSD法,方差不齊時(shí)采用Dunnett' ST3法。在考察束縛和藥物相互干預(yù)的試驗(yàn)中采用雙因素方差分析比較各處理方式的主效應(yīng)及交互效應(yīng)。當(dāng)P0.05時(shí),差異被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 第一部分：小鼠束縛應(yīng)激模型的建立 1.動(dòng)物在束縛應(yīng)激0、0.5、1.5、3、6小時(shí)后,組間血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.114,24.666；P均小于0.01),表現(xiàn)為ALT和AST在束縛前3小時(shí)持續(xù)性的升高。與正常對(duì)照組(束縛0小時(shí))相比,束縛應(yīng)激1.5和3小時(shí)后ALT和AST的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。其中在束縛應(yīng)激3小時(shí)后,ALT的水平達(dá)到正常值的3倍,根據(jù)海氏法則可認(rèn)為小鼠束縛應(yīng)激3小時(shí)肝細(xì)胞達(dá)到了損傷的標(biāo)準(zhǔn)。但是,當(dāng)束縛應(yīng)激6小時(shí)后,血清ALT和AST的水平開(kāi)始降低,此時(shí)AST與正常對(duì)照組相比差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2.當(dāng)小鼠束縛1.5、3小時(shí)及束縛3小時(shí)放松6小時(shí)后,各組間血清ALT和AST水平的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=16.000,27.268；P均小于0.01)。當(dāng)小鼠束縛應(yīng)激3小時(shí)后,血清ALT和AST的水平達(dá)到最高值,然后將動(dòng)物放回籠中自由活動(dòng),放松后血清ALT和AST水平開(kāi)始恢復(fù),放松6小時(shí)時(shí),血清ALT和AST水平與正常對(duì)照組相比差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；在放松24小時(shí)后,ALT值基本達(dá)到正常值水平。但是AST與正常對(duì)照組相比差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 3.束縛不同時(shí)間后肝臟總谷胱甘肽(GSH+GSSG)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量和GSSG/GSH比值的組間差異有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.199,13.522,22.817;P均小于0.01)。與血清ALT和AST水平的變化情況相同,束縛應(yīng)激3小時(shí)后(GSH+GSSG)含量降低、GSSG含量和GSSG/GSH比值和GSSG/GSH比值逐步升高,與正常對(duì)照組相比,這些指標(biāo)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),其中束縛1.5小時(shí)后氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量和GSSG/GSH比值與正常對(duì)照組相比亦顯著性升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。束縛3小時(shí)后將動(dòng)物放回籠中自由活動(dòng),放松后總谷胱甘肽(GSH+GSSG)、GSSG和GSSG/GSH開(kāi)始恢復(fù),至放松24小時(shí)后肝臟中的谷胱甘肽含量恢復(fù)至正常值水平。 4.正常對(duì)照組和束縛應(yīng)激0.5、1.5小時(shí)的動(dòng)物肝臟病理組織學(xué)檢查未見(jiàn)異常,小鼠束縛應(yīng)激3小時(shí)后僅可見(jiàn)有輕度的肝細(xì)胞胞漿疏松淡染,未發(fā)現(xiàn)明顯的病理學(xué)改變。 第二部分：束縛應(yīng)激對(duì)對(duì)乙酰氨基酚肝毒性的影響 1.在小鼠束縛應(yīng)激0.5、1.5、3小時(shí)以及束縛3小時(shí)放松6、24小時(shí)后分別給予150mg/kg的APAP,結(jié)果發(fā)現(xiàn),組間ALT和AST的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(F=14.555,12.584；P值均小于0.01)。小鼠束縛3小時(shí)可使APAP引起的ALT和AST升高增強(qiáng),束縛小3時(shí)放6小時(shí)后亦可使APAP引起的ALT升高增強(qiáng),與單純APAP給藥組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),其中束縛3小時(shí)后立刻給予APAP,血清ALT和AST的升高幅度最大,達(dá)到單純給藥水平的4倍。但是束縛應(yīng)激0.5、1.5小時(shí)以及束縛3小時(shí)放松24小時(shí)后給藥,對(duì)APAP引起的ALT和AST變化影響不明顯,提示束縛應(yīng)激加重APAP肝毒性與束縛時(shí)間有關(guān)。 2.顯微鏡下觀察HE染色后的小鼠肝組織病理切片可見(jiàn),正常對(duì)照組小鼠肝小葉輪廓清楚完整,肝細(xì)胞索排列整齊,肝竇清晰可見(jiàn)；APAP組動(dòng)物肝臟中央靜脈周?chē)⒃诟渭?xì)胞壞死,伴隨空泡變性；束縛3小時(shí)+APAP組動(dòng)物肝臟病變更加嚴(yán)重,中央靜脈周?chē)瑺罡渭?xì)胞壞死,肝細(xì)胞排列紊亂,伴隨空泡變性及肝竇擴(kuò)張充血；束縛3小時(shí)組小鼠未發(fā)現(xiàn)明顯的病理學(xué)改變,僅可見(jiàn)有輕度的肝細(xì)胞胞漿疏松淡染。 3.束縛應(yīng)激對(duì)正常對(duì)照組和APAP組動(dòng)物肝臟的總谷胱甘肽(GSH+GSSG)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量和GSSG/GSH比值均有顯著性影響(F=24.113,3.079,1.239,P0.000,P=0.098,P=0.282;F=48.763,8.412,0.088,P0.000, P=0.010,P=0.770;F=33.764,13.909,9.282, P0.000,P=0.002,P=0.008)。束縛應(yīng)激后正常對(duì)照組和APAP組總谷胱甘肽(GSH+GSSG)含量均顯著降低,氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量和GSSG/GSH比值均顯著升高,與非束縛應(yīng)激組相比,這些差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。表明束縛應(yīng)激不但可破壞正常動(dòng)物的氧化還原平衡狀態(tài),還可加重APAP引起的肝臟谷胱甘肽耗竭。另外,APAP給藥后束縛應(yīng)激組動(dòng)物(GSH+GSSG)含量顯著降低,GSSG/GSH比值顯著升高,與單純束縛應(yīng)激組相比這些差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。APAP單獨(dú)給藥后肝臟GSSG含量升高,與正常對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.束縛3小時(shí)十APAP組與APAP組相比,血清IL-6水平、TNF-a水平以及肝臟Kupffer細(xì)胞的數(shù)量均無(wú)顯著性差異。與空白對(duì)照組相比,束縛3小時(shí)+APAP組和APAP組動(dòng)物肝臟Kupffer細(xì)胞數(shù)量增多。 5.束縛應(yīng)激對(duì)正常對(duì)照組的IL-6水平有顯著影響,對(duì)APAP組動(dòng)物IL-6水平無(wú)明顯影響(F=14.902,14.553,0.094,P=0.001,P=0.001,P=0.762)。束縛3小時(shí)組和正常對(duì)照組相比,血清IL-6和TNF-a水平呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì),束縛應(yīng)激后IL-6水平顯著升高(P0.01),但TNF-a水平無(wú)顯著變化,均在很低的水平。束縛3小時(shí)組和正常對(duì)照組動(dòng)物肝臟Kupffer細(xì)胞數(shù)量也無(wú)明顯差別。 6.用Western blot方法檢測(cè)肝臟caspse-3蛋白表達(dá)量,正常對(duì)照組動(dòng)物肝臟caspse-3蛋白表達(dá)量很低,幾乎檢測(cè)不到。束縛3小時(shí)組動(dòng)物肝臟caspse-3蛋白表達(dá)量較正常對(duì)照組上升,但是束縛3小時(shí)-APAP組和APAP組動(dòng)物肝臟caspse-3蛋白含量亦是很低或幾乎檢測(cè)不到。 第三部分：束縛應(yīng)激損傷肝臟的發(fā)生機(jī)制 1.受體阻斷劑或耗竭劑、束縛應(yīng)激對(duì)動(dòng)物血清ALT和AST水平均有顯著影響(F=127.803,6.392,6.515;F=240.972,7.713,9.062;P值均小于0.01),且受體阻斷劑或耗竭劑與束縛應(yīng)激之間存在交互效應(yīng)。束縛應(yīng)激后正常對(duì)照組和各受體阻斷劑或耗竭劑組ALT和AST水平均顯著升高,與非束縛應(yīng)激組相比,這些差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。組間進(jìn)行兩兩比較顯示,當(dāng)用利血平完全耗竭兒茶酚胺或阻斷α-1或阻斷a-2受體后,與單純束縛應(yīng)激組相比,這三組血清ALT和AST水平均明顯降低,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)；當(dāng)阻斷β-1或β-2受體后,與單純束縛應(yīng)激組相比,給藥組血清ALT和AST水平?jīng)]有顯著性差異。此外α-1受體阻斷劑哌唑嗪、α-2受體阻斷劑育亨賓、β-1受體阻斷劑倍他洛爾、β-2受體阻斷劑ICI118,551和兒茶酚胺遞質(zhì)耗竭劑利血平對(duì)正常對(duì)照組動(dòng)物血清ALT和AST水平均無(wú)影響。 2.受體阻斷劑或耗竭劑、束縛應(yīng)激對(duì)動(dòng)物肝臟中總谷胱甘肽(GSH+GSSG)、GSSG和GSSG/GSH比值均有顯著影響(F=75.340,4.130,2.211,P0.000,P=0.003,P=0.068；F=107.928,4.685,6.951,P值均小于0.01；F=95.870,9.456,10.282,P值均小于0.01),且受體阻斷劑或耗竭劑與束縛應(yīng)激之間存在交互效應(yīng)影響GSSG和GSSG/GSH比)。組間進(jìn)行兩兩比較顯示,當(dāng)用利血平完全耗竭兒茶酚胺或阻斷α-1或阻斷α-2受體后,與單純束縛應(yīng)激組相比,這三組肝臟總谷胱甘肽含量顯著升高,GSSG和GSSG/GSH比值顯著降低,其差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；哌唑嗪組、育亨賓組、倍他洛爾組、ICI118組以及正常對(duì)照組在束縛應(yīng)激后肝臟總谷胱甘肽含量顯著減少,與相應(yīng)未束縛組相比,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)；育亨賓組、倍他洛爾組、ICI118組以及正常對(duì)照組在束縛應(yīng)激后肝臟GSSG含量顯著升高,,與相應(yīng)未束縛組相比,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)；倍他洛爾組、ICI118組以及正常對(duì)照組在束縛應(yīng)激后肝臟GSSG/GSH比值顯著升高,與相應(yīng)未束縛組相比,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；另外,與交感神經(jīng)阻斷劑對(duì)束縛應(yīng)激后血清轉(zhuǎn)氨酶的影響相同,給予各種阻斷劑后,對(duì)正常對(duì)照組動(dòng)物肝臟中總谷胱甘肽(GSH+GSSG)、GSSG和GSSG/GSH比值的影響無(wú)影響。 3.正常對(duì)照組小鼠肝臟中幾乎觀察不到凋亡的肝細(xì)胞,束縛應(yīng)激3小時(shí)后,出現(xiàn)凋亡的肝細(xì)胞數(shù)增多,其凋亡指數(shù)顯著增加,與正常對(duì)照組相比,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。當(dāng)用哌唑嗪阻斷α-1受體或用育亨賓阻斷a-2受體后出現(xiàn)凋亡的肝細(xì)胞數(shù)減少,與正常對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異,且這兩個(gè)給藥組的肝細(xì)胞凋亡數(shù)相近。 4.束縛應(yīng)激3小時(shí),Caspase-3和Caspase-9活化蛋白表達(dá)明顯增多,Bax/Bcl-2比值亦明顯升高；當(dāng)用哌唑嗪阻斷α-1受體或用育亨賓阻斷a-2受體后,束縛后Caspase-3活化蛋白表達(dá)與正常對(duì)照組接近,而Caspase-9活化蛋白表達(dá)和Bax/Bcl-2比值仍有所增加,但與單純束縛應(yīng)激組相比增加幅度降低。 結(jié)論 1.束縛應(yīng)激可明顯加重APAP的肝毒性,表現(xiàn)為ALT和AST的升高,肝細(xì)胞壞死明顯。其發(fā)生機(jī)制是束縛應(yīng)激破壞了肝臟的氧化還原平衡狀態(tài),降低了肝臟內(nèi)的谷胱甘肽儲(chǔ)備量,而不是通過(guò)炎癥反應(yīng)所介導(dǎo)。同時(shí)證明了束縛應(yīng)激加重APAP誘導(dǎo)肝細(xì)胞死亡的主要方式是壞死而不是凋亡。 2.束縛應(yīng)激可通過(guò)減少肝臟谷胱甘肽的儲(chǔ)備量而導(dǎo)致可逆性的肝損傷,并通過(guò)caspase-9和Bcl-2家族蛋白誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。 3.α-1和α-2受體參與了束縛應(yīng)激損傷肝臟的過(guò)程。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R965

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊維益,王天芳,陳家旭,李峰,梁嶸,朱迎春;肝臟在五臟中的地位演變[J];中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào);1995年03期

2 張森 ,萬(wàn)德森 ,肖錫賓;BALB/c鼠枯否細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];大腸肛門(mén)病外科雜志;2003年02期

3 潘雪飛;杜斌;范群;陳小鳳;張長(zhǎng)法;;綜合分析藥物性肝損傷4076例[J];東南國(guó)防醫(yī)藥;2009年06期

4 李平;謝同柄;;132例藥物性肝損傷臨床分析[J];實(shí)用肝臟病雜志;2010年01期

5 王秋林,王浩毅,丁怡,喬小蓉,彭克軍,林霞,王樹(shù)人;血漿中游離還原型及氧化型谷胱甘肽的熒光測(cè)定法[J];光譜學(xué)與光譜分析;2005年11期

6 范少光,查宏斌,李小蕊,丁桂鳳;束縛應(yīng)激小鼠血中產(chǎn)生的免疫抑制因子及其調(diào)節(jié)[J];科學(xué)通報(bào);1989年20期

7 毛德文;陳月橋;王麗;武建華;;Caspase-8及Caspase-3與細(xì)胞凋亡[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2008年10期

8 眭建,楊美青,繆亦安,任春蘭,錢(qián)燕;電應(yīng)激對(duì)肝臟組織學(xué)及超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影響[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年06期

9 林麗艷;張慧云;何韶衡;;IL-6及其受體與炎癥性疾病關(guān)系的新進(jìn)展[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2008年04期

10 郗德鳳;王希峰;蘇冠民;李琳;楊燕;邵麗華;;高效液相色譜-紫外可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)大鼠肝組織中的還原型谷胱甘肽[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年12期

，

本文編號(hào)：1526807