發(fā)布時間：2018-02-05 20:38

  本文關(guān)鍵詞： 川芎嗪 腦缺血再灌注損傷 凋亡 炎癥　出處：《中國老年學雜志》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討川芎嗪(TMP)抑制腦缺血再灌注損傷(CIRI)的分子機制。方法選擇清潔級健康成年雄性SD大鼠,采用改良的Zea Longa栓線法構(gòu)建大腦中動脈梗塞(MCAO)模型,并將大鼠隨機分為三組(n=20):假手術(shù)組、模型組、TMP治療組。假手術(shù)組大鼠不插入線栓,其余操作均同模型組;TMP治療組大鼠在被拔出線栓再灌注時,腹腔注射TMP 20 mg/kg。再灌注24 h后,各組大鼠進行神經(jīng)功能評分,然后麻醉處死,取材檢測。干濕稱重法檢測大鼠腦組織含水量;2,3,5-三苯基氮化四氮唑(TTC)染色法檢測大鼠腦梗死面積,HE染色觀察腦組織形態(tài);熒光定量PCR檢測大鼠梗死側(cè)腦皮層中miR-199a-5p、Bax、Bcl-2、腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-1β、IL-6 mRNA的表達水平;酶聯(lián)免疫法檢測大鼠血清中炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-1β和IL-6的含量;免疫組化法觀察大鼠梗死側(cè)腦皮質(zhì)核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB p65及磷酸化NF-κB p65(NF-κB p-p65)的表達。結(jié)果 TMP治療可顯著改善神經(jīng)缺陷評分(P0.05),降低腦組織含水量(P0.05),減少梗死體積(P0.01),減輕腦組織破壞。模型組miR-199a-5p、Bax、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表達明顯升高(P0.05),而Bcl-2 mRNA表達水平顯著降低(P0.05)。而TMP治療可顯著降低miR-199a-5p、Bax、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表達水平(P0.05),增加Bcl-2 mRNA的表達(P0.05)。與模型組比較,TMP治療組大鼠腦皮質(zhì)和血清中TNF-α、IL-1β和IL-6炎癥因子含量均顯著降低(P0.05)。IHC結(jié)果顯示,TMP治療組中NF-κB p-p65陽性細胞數(shù)明顯減少(P0.05)。結(jié)論 TMP可減輕CIRI,其機制可能為抑制miR-199a-5p的表達,減少凋亡,降低炎癥反應,且可降低NF-κB的活化。
[Abstract]:Objective to investigate the molecular mechanism of ligustrazine (TMP) inhibiting cerebral ischemia-reperfusion injury (CIRI). Methods healthy male SD rats of clean grade were selected. The model of middle cerebral artery infarction (MCAO) was established by modified Zea Longa method. The rats were randomly divided into three groups: sham operation group and model group. TMP treatment group, sham-operation group rats did not insert thread embolus, the rest of the operation is the same as the model group; The rats in the TMP group were injected intraperitoneally with TMP 20 mg / kg during reperfusion. After 24 hours of reperfusion, the rats in each group were evaluated for neurological function, and then were anesthetized and killed. The water content of brain tissue was measured by wet and dry weighing method. (2) the infarct size of rat brain was detected by TTC- staining method, and the morphology of brain tissue was observed by HE staining. Fluorescence quantitative PCR was used to detect miR-199a-5 pAX Bax-2, TNF- 偽 and IL-1- 尾 in the cerebral cortex of rats. The expression level of IL-6 mRNA; The levels of TNF- 偽 IL-6 and TNF- 偽 IL-1 尾 in rat serum were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Immunohistochemical study of NF 魏 B p65 and phosphorylated NF- 魏 B p65 and NF- 魏 B p-p65 in the cerebral cortex of rats. Results TMP could significantly improve the neurological defect score (P0.05). In the model group, the brain tissue water content was reduced, the infarct volume was reduced, the infarct volume was reduced, and the brain tissue damage was alleviated. The model group was miR-199a-5pAXTNF- 偽. The expression of IL-1 尾 and IL-6 mRNA increased significantly (P 0.05). However, the expression level of Bcl-2 mRNA decreased significantly, while TMP treatment significantly decreased the expression of miR-199a-5 pAXN TNF- 偽. The expression level of IL-1 尾 and IL-6 mRNA was increased by P0.05, and the expression of Bcl-2 mRNA was increased compared with the model group. In TMP treatment group, the levels of IL-1 尾 and IL-6 in the cerebral cortex and serum of rats were significantly decreased (P 0.05). IHC results showed that TNF- 偽 and TNF- 偽 in the serum of rats were significantly lower than those in the control group (P < 0.05). In TMP treatment group, the number of NF- 魏 B p-p65 positive cells was significantly decreased (P 0.05). Conclusion TMP can alleviate CIRI. Its mechanism may be to inhibit the expression of miR-199a-5p, reduce apoptosis, reduce inflammatory response, and reduce the activation of NF- 魏 B.
【作者單位】： 南京中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科;南京中醫(yī)藥大學第二臨床學院;南京中醫(yī)藥大學基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【基金】：國家自然科學基金資助課題(81403136,81373748,81171659,11574156)
【分類號】：R285.5

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本文編號：1492722