本文關(guān)鍵詞： 缺血后處理 再灌注心律失常 miRNA-1 縫隙連接蛋白43 離體心臟　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景：急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)嚴(yán)重威脅人類健康,再灌注治療是目前拯救瀕死心肌和改善預(yù)后的最主要措施,但是缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury, IRI)使獲益大打折扣。缺血后處理(ischemia postconditioning, I-postC)可保護(hù)心肌,減輕IRI�？p隙連接蛋白43(connexin43,Cx43)是參與IRI的重要蛋白,是縫隙連接(gap junction, GJ)的主要構(gòu)成成分,Cx43數(shù)量和分布的改變與GJ電耦聯(lián)以及再灌注心律失常(reperfusion arrthymia, RA)和心肌梗死范圍等密切相關(guān)。miRNA-1是參與調(diào)控IRI的主要miRNA之 其過表達(dá)可以加重IRI, I-postC可抑制它過表達(dá)。已有研究表明Cx43是miRNA-1的作用靶點(diǎn)之一。但是,在缺血再灌注及后處理時(shí)miRNA-1能否通過影響Cx43的表達(dá)和分布參與IRI的調(diào)節(jié)目前尚不明確。目的：1、觀察Ⅰ-postC對(duì)Cx43表達(dá)、分布和miRNA-1表達(dá)以及對(duì)RA、左室發(fā)展壓(left ventricular develop pressure, LVDP)、心肌梗死面積的影響；2、觀察miRNA-1在離體大鼠心臟Ⅰ-postC中對(duì)Cx43表達(dá)和分布的作用。 方法：將55只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為正常組(N組)、缺血.再灌注組(I-R組)、缺血后處理組(Ⅰ-postC組)、agomir-1+缺血后處理組(agomir-1組)和antagomir-1+缺血后處理組(antagomir-1組),各11只。其中,agomir-1組和antagomir-1組分別給予agomir-1(100pmol.kg-1.d-1)及antagomir-1(200pmol.kg-1.d-1)行尾靜脈注射3日。然后在進(jìn)行肝素化和麻醉后,開胸取心,應(yīng)用Langendorff逆行灌流系統(tǒng)對(duì)離體心臟進(jìn)行灌流。N組：不結(jié)扎前降支；I-R組：結(jié)扎前降支30min后,行再灌注；Ⅰ-postC組、agomir-1組及antagomir-1組：結(jié)扎前降支30min后,行后處理。記錄分析RA、LVDP、心肌梗死面積。采用RT-PCR、Western Blot和免疫組織化學(xué)方法觀察各組大鼠離體心臟左室心肌miRNA-1表達(dá)和Cx43蛋白表達(dá)與分布的情況。應(yīng)用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義。 結(jié)果：1、各組間RA的比較：各組間RA評(píng)分有差異(P0.05)。與N組比較,I-R組RA評(píng)分增高(P0.01),而Ⅰ-postC組與N組無差異。Ⅰ-postC組比I-R組的VT、VF時(shí)程縮短、發(fā)生率降低,RA評(píng)分降低(P0.01)；而與Ⅰ-postC組比較,agomir-1組VT的時(shí)程延長(zhǎng)、發(fā)生率升高,RA評(píng)分增高(均P0.01)；antagomir-1組RA無差異。 2、各組間LVDP的比較：基礎(chǔ)態(tài),各組間LVDP無差異(P0.05)；缺血態(tài),I-R組、Ⅰ-postC組、agomir-1組及antagomir-1組LVDP均比N組降低(均P0.01)；再灌注態(tài),I-R組和agomir-1組的LVDP繼續(xù)降低,LVDP比N組低(均P0.01),在Ⅰ-postC組和antagomir-1組,LVDP均比缺血態(tài)升高,與N組無差異。與Ⅰ-postC組相比,agomir-1組LVDP降低(P0.05),而antagomir-1組無差異。 3、各組心肌梗死面積比較：I-R組、Ⅰ-postC組、agomir-1組、antagomir-1組心肌梗死面積分別為(50.44±1.39)%,(27.58±1.05)%,(62.72±1.20)%,(27.25±1.29)%(P0.01)。I-R組、agomir-1組梗死面積大于Ⅰ-postC組(均P0.01), Ⅰ-postC組和antagomir-1組比較無差異。 4. miRNA-1RT-PCR結(jié)果：與N組比較,I-R組miRNA-1表達(dá)增高約2.6倍,Ⅰ-postC組比I-R組miRNA-1表達(dá)降低約50%(P0.01)；與Ⅰ-postC組比,agomir-1組表達(dá)增高約78%(P001), antagomir-1組表達(dá)降低32%(P0.01)。 5. Western Blot結(jié)果：I-R組比N組Cx43表達(dá)減少,Ⅰ-postC組比I-R組Cx43表達(dá)增多,并接近于N組水平；與Ⅰ-postC組比較,agomir-1組Cx43表達(dá)減少,但仍高于I-R組,antagomir-1組Cx43表達(dá)無差異。 6、Cx43免疫組化結(jié)果：與N組比較,I-R組和agomir-1組陽(yáng)性表達(dá)量少且排列紊亂,在端端連接分布減少,側(cè)側(cè)連接分布增多。Ⅰ-postC組和antagomir-1組,Cx43陽(yáng)性表達(dá)增多,分布較規(guī)則。與Ⅰ-postC組比較,agomir-1組陽(yáng)性表達(dá)量少,排列紊亂,而antagomir-1組無明顯差異。 結(jié)論：1、Ⅰ-postC可抑制再灌注引起的miRNA-1過表達(dá),Cx43減少和再分布,減少RA發(fā)生,改善LVDP,縮小心肌梗死面積。 2、Ⅰ-postC時(shí),miRNA-1的表達(dá)下調(diào),抑制Cx43表達(dá)減少和再分布,減輕IRI,發(fā)揮心肌保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R542.22

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1485044