本文關(guān)鍵詞： 圓口銅魚 應(yīng)激 操作脅迫 運(yùn)輸 麻醉 生理 血液 皮質(zhì)醇　出處：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)》2014年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：長(zhǎng)江是我國(guó)第一大河,共有魚類約350余種,是我國(guó)魚類資源的寶庫(kù)。長(zhǎng)江上游以山區(qū)為主,坡陡水急,流態(tài)復(fù)雜多樣,特有魚類數(shù)量達(dá)124種。近年來(lái),由于各類水電工程設(shè)施的興建,長(zhǎng)江流域生態(tài)環(huán)境急劇惡化,魚類洄游通道受阻、造成生境破碎、產(chǎn)卵場(chǎng)和棲息地被破壞或喪失,加之缺乏嚴(yán)格和科學(xué)的管理,多種魚類資源接近衰竭。長(zhǎng)江魚類特別是珍稀特有魚類資源已經(jīng)成為目前急需解決的問題。圓口銅魚隸屬于鯉形目、鯉科、泩亞科,屬河道洄游魚類,產(chǎn)漂流性卵,是長(zhǎng)江上游特有魚類和重要的經(jīng)濟(jì)魚類。然而,近年來(lái),由于過度捕撈,特別是受水電工程設(shè)施建設(shè)等人類活動(dòng)的影響,圓口銅魚資源量急劇下降,漁獲物中低齡魚和幼魚個(gè)體比重逐年增加。更為嚴(yán)峻的是,長(zhǎng)江干流和金沙江中下游水電工程的建設(shè),已經(jīng)阻擋了圓口銅魚的洄游通道,并將淹沒其大部分產(chǎn)卵場(chǎng)。如果不采取有效措施,這種長(zhǎng)江上游特有的重要經(jīng)濟(jì)魚類將可能面臨滅絕境地。 增殖放流被認(rèn)為是保護(hù)珍稀瀕危魚類的有效措施之一,馴養(yǎng)足夠的親魚是增殖放流的前提。然而,由于圓口銅魚具有激烈的應(yīng)激反應(yīng)特征,且在人工養(yǎng)殖時(shí)極易感染小瓜蟲病,死亡率較高,導(dǎo)致人工馴養(yǎng)圓口銅魚難度較大。目前,除了零星的試驗(yàn)性養(yǎng)殖外,尚未見室內(nèi)馴養(yǎng)成功的報(bào)道。本研究針對(duì)圓口銅魚移養(yǎng)馴化過程中的關(guān)鍵操作程序,通過對(duì)圓口銅魚正常、不同程度操作脅迫、麻醉與低溫運(yùn)輸狀態(tài)下其血液生理生化、關(guān)鍵組織形態(tài)結(jié)構(gòu)以及應(yīng)激蛋白HSP70/HSC70變化特征的觀測(cè),探究圓口銅魚應(yīng)激反應(yīng)的基本規(guī)律,并尋找緩解圓口銅魚應(yīng)激反應(yīng)的措施,具體內(nèi)容及主要研究結(jié)果如下： 對(duì)船體網(wǎng)箱養(yǎng)殖近一年的圓口銅魚血細(xì)胞形態(tài)及生理生化參數(shù)進(jìn)行了測(cè)定,建立了網(wǎng)箱養(yǎng)殖圓口銅魚生理生化指標(biāo)的參考區(qū)間。同其他魚類相比,圓口銅魚血液皮質(zhì)醇基礎(chǔ)水平較高(185.70ng/mL),這可能是和其具有發(fā)達(dá)的肝胰聯(lián)合體、攝食能力強(qiáng)、代謝水平高、喜急流環(huán)境等生物學(xué)習(xí)性有關(guān)。加之圓口銅魚馴化程度低,對(duì)人工養(yǎng)殖環(huán)境適應(yīng)周期長(zhǎng)等因素導(dǎo)致其基礎(chǔ)皮質(zhì)醇處于較高水平。和野生圓口銅魚相比,網(wǎng)箱養(yǎng)殖圓口銅魚血糖、甘油三酯、總蛋白和球蛋白水平均明顯偏高,這可能是由于人工養(yǎng)殖環(huán)境下圓口銅魚能獲得更加充足的高能餌料,以及網(wǎng)箱高密度養(yǎng)殖條件下魚類的活動(dòng)范圍被限制、活動(dòng)量減少等原因所致。 對(duì)網(wǎng)箱養(yǎng)殖圓口銅魚施以低強(qiáng)度(30s)和高強(qiáng)度(60s)的急性離水脅迫,并分別于刺激后的0、1、4、12、24、72、120、168h采取血液、肝、鰓、腎組織,測(cè)定血液生理生化參數(shù)的變化特征及關(guān)鍵組織器官的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果顯示,不同強(qiáng)度操作脅迫刺激后的前24h,圓口銅魚均表現(xiàn)出以血液皮質(zhì)醇、溶菌酶活性、葡萄糖和谷丙轉(zhuǎn)氨酶急劇升高為典型特征的急性應(yīng)激反應(yīng)。組織形態(tài)學(xué)的觀察顯示,不同強(qiáng)度的離水脅迫均可誘發(fā)圓口銅魚鰓、腎形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化或損傷。離水脅迫后的24h發(fā)現(xiàn)兩處理組均自然感染了小瓜蟲,且隨時(shí)間的延長(zhǎng)有加劇的趨勢(shì),至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)(168h),雖然圓口銅魚血液皮質(zhì)醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平已回復(fù)到正常水平,但其血液葡萄糖、乳酸和溶菌酶活性均維持在較高水平,說明圓口銅魚依舊處于疾病感染和適應(yīng)新環(huán)境的慢性應(yīng)激階段。 通過行為觀察和實(shí)踐運(yùn)輸成活率等預(yù)實(shí)驗(yàn)研究,得出適于圓口銅魚長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)腗S-222的麻醉濃度為20-40mg/L。為考查圓口銅魚對(duì)長(zhǎng)途運(yùn)輸脅迫的應(yīng)激反應(yīng)特征和麻醉、低溫以及二者聯(lián)合使用對(duì)圓口銅魚長(zhǎng)途運(yùn)輸應(yīng)激反應(yīng)的緩解效果,設(shè)置了常溫不麻(Hna)、常溫麻醉(Ha)、低溫不麻(Lna)和低溫麻醉(La)四個(gè)處理組,于運(yùn)輸后的0h采取水樣,并分別于運(yùn)輸后的0、4、24、72和168h采取血液。檢測(cè)結(jié)果顯示,經(jīng)14h的長(zhǎng)途運(yùn)輸,四個(gè)處理組總氨氮(TAN)、非離子氨氮(NH3-N)、亞硝酸氮(NO2-N)和總氮(TN)均明顯升高(P0.05)；且除NO2-N外,這些指標(biāo)在高溫處理組的濃度均明顯高于低溫處理組。運(yùn)輸后及恢復(fù)過程中,血液皮質(zhì)醇、葡萄糖、乳酸、轉(zhuǎn)氨酶等生化指標(biāo)多數(shù)呈現(xiàn)出明顯的先升高后降低的典型急性應(yīng)激反應(yīng)特征。麻醉處理在抑制運(yùn)輸過程中圓口銅魚的活動(dòng)、能量消耗方面作用明顯,低溫處理則在抑制長(zhǎng)途運(yùn)輸過程中圓口銅魚皮質(zhì)醇的升高、提高溶菌酶活力、降低魚類活動(dòng)方面發(fā)揮重要作用。因此,建議在高溫條件下對(duì)圓口銅魚進(jìn)行長(zhǎng)途運(yùn)輸時(shí),低溫麻醉處理是首選,其次是單獨(dú)使用低溫或MS-222處理,而且運(yùn)輸前的禁食時(shí)間控制在48-72h為宜。此外,運(yùn)輸后的前兩周圓口銅魚尚處在急性或慢性應(yīng)激狀態(tài),此期間要特別注重魚體健康護(hù)理。 利用圓口銅魚心臟組織克隆出HSC70和HSP70基因全長(zhǎng)的cDNA序列,其cDNA序列全長(zhǎng)分別為2330bp、2290bp,編碼氨基酸數(shù)目為649個(gè)、643個(gè)。通過比對(duì)分析發(fā)現(xiàn),圓口銅魚HSC70和HSP70兩種基因與其他動(dòng)物的同源性較高。組織差異性表達(dá)結(jié)果顯示,HSP/HSC70基因mRNA在圓口銅魚不同組織中的表達(dá)有所差異,HSP70和HSC70在不同組織中的表達(dá)量從高到低依次分別為肌肉、眼、腎、鰓、腦、脾、心臟和鰭,以及肝、眼、鰓、鰭、心臟、脾、腦、肌肉和腎臟。急性操作脅迫過程中圓口銅魚HSC70除在肝中的表達(dá)外,HSP70/HSC70兩種基因mRNA在其他不同組織中的變化并不明顯,與血液生理生化指標(biāo)的變化一致性程度較低。因此,在圓口銅魚的急性操作脅迫和長(zhǎng)途運(yùn)輸脅迫的應(yīng)激評(píng)估中,不易將HSP70和HSC70作為應(yīng)激的評(píng)價(jià)指標(biāo),此方面的研究有待于深入。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 林光華,張豐旺;革胡子鯰血液常數(shù)值的周年變化[J];動(dòng)物學(xué)報(bào);1991年03期

2 周玉,郭文場(chǎng),楊振國(guó),鄒嘯環(huán),張凱,文興豪,王鐵東;歐洲鰻鱺外周血細(xì)胞的顯微和超微結(jié)構(gòu)[J];動(dòng)物學(xué)報(bào);2002年03期

3 杜浩;危起偉;甘芳;劉鑒毅;陳細(xì)華;楊德國(guó);;美洲鰣應(yīng)激后皮質(zhì)醇激素和血液生化指標(biāo)的變化[J];動(dòng)物學(xué)雜志;2006年03期

4 徐鋼春;唐雪;顧若波;聞海波;;似刺鳊泩外周血細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)和血清生化指標(biāo)的初步研究[J];動(dòng)物學(xué)雜志;2008年05期

5 許曉娟;李加兒;區(qū)又君;郭根喜;陶啟友;;深水網(wǎng)箱養(yǎng)殖卵形鯧湽血液指標(biāo)[J];動(dòng)物學(xué)雜志;2008年06期

6 朱晏蘋;曹振東;付世建;;力竭性運(yùn)動(dòng)后瓦氏黃顙魚幼魚乳酸和血糖變化[J];重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年02期

7 米瑞芙;草魚、鯉和鰱血液學(xué)指標(biāo)的測(cè)定[J];淡水漁業(yè);1982年04期

8 黃t;鄧中|，

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