本文關(guān)鍵詞：CD14、NF-κBp65在膿毒癥幼年大鼠急性腎損傷中的表達及烏司他丁對其干預(yù)的實驗研究　出處：《南昌大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:1.應(yīng)用盲腸結(jié)扎穿刺(CLP)術(shù)建立膿毒癥幼年大鼠模型,觀察膿毒癥幼年大鼠腎功能(血清肌酐、尿素氮濃度)變化及腎臟組織損傷情況。2.觀察烏司他丁對膿毒癥幼年大鼠AKI血清TNF-α、IL-6水平及腎臟組織CD14、NF-κBp65表達的影響,探討其對膿毒癥幼年大鼠AKI可能的保護作用與機制。方法:1.實驗分組:健康清潔級4周齡雄性SD大鼠224只,隨機分成正常對照組(A組)32只、假手術(shù)組(B組)32只、膿毒癥組(C組)80只、烏司他丁干預(yù)組(D組)80只,每組大鼠再隨機分為6h、12h、24h、48h4個亞組。2.膿毒癥模型制備及藥物干預(yù):A組:不行剖腹術(shù)及其他任何處理;B組:行剖腹術(shù)但不結(jié)扎盲腸及穿刺;C組:行盲腸結(jié)扎和穿刺術(shù);D組:行盲腸結(jié)扎穿刺術(shù)造模后于0h、24h經(jīng)尾靜脈注射烏司他丁50mg/kg,其他3組分別注射等量9 g/L鹽水。每組大鼠在造模后6h、12h、24h、48h被麻醉后采集血和腎組織標本。3.檢測指標:采用全自動生化分析儀檢測血清Scr、BUN濃度;ELISA法檢測血清TNF-α、IL-6水平;RT-PCR法測定腎組織CD14 mRNA表達;免疫組織化學(xué)染色法檢測腎臟組織CD14、NF-κBp65蛋白表達含量;HE染色觀察腎臟組織病理改變等。結(jié)果:1.血清Scr濃度變化:與A、B組相比較,C、D組各時間點(除6h外)的血清Scr濃度升高(P0.05),12h開始升高,48h達高峰;而D組各時間點(除6h外)血清Scr水平低于C組(P0.01)。2.血清BUN濃度變化:與A、B組相比較,C、D組各時間點的血清BUN濃度升高(P0.01),6h開始升高,48h達高峰;而D組各時間點血清BUN水平明顯低于C組(P0.01)。3.腎組織病理學(xué)改變:與A、B組相比較,C組6h可見腎臟組織中有少數(shù)腎小囊腔擴大,在12h、24h、48h可見明顯擴大的腎小囊腔,顯著腫脹、空泡變性的腎小管上皮細胞,部分腎小球瘀血,腎臟組織中可見眾多炎性細胞浸潤,D組各時間點腎組織上述病理改變較C組明顯減輕。4.血清TNF-α、IL-6水平變化:與A、B組相比較,C、D組各時間點的血清TNF-α、IL-6水平明顯升高(P0.01),6h血清TNF-α、IL-6水平開始升高,12h達高峰,24h、48h緩慢下降,但仍高于A、B組,而D組大鼠血清TNF-α、IL-6水平,在各時間點均顯著低于C組(P0.01)。5.腎臟組織NF-κBp65蛋白表達:與A、B組相比較,C、D組各時間點腎臟組織NF-κBp65蛋白表達顯著升高(P0.01),6h開始升高,12h、24h、48h逐漸升高;而D組大鼠腎臟組織NF-κBp65蛋白表達,在各時間點均明顯低于C組(P0.01)。6.腎臟組織CD14mRNA、CD14蛋白表達:與A、B組相比較,C、D組各時間點腎臟組織CD14mRNA、CD14蛋白表達明顯升高(P0.01),6h開始升高,12h達高峰,24h、48h緩慢下降,但仍高于A、B組;而D組大鼠腎臟組織CD14mRNA、CD14蛋白表達,在各時間點均低于C組(P0.05)。結(jié)論:1.采用CLP法制備的膿毒癥幼年大鼠模型是穩(wěn)定、可靠的。2.膿毒癥幼年大鼠早期即可出現(xiàn)一定程度腎組織損傷和腎功能障礙。3.烏司他丁可能通過下調(diào)LPS受體介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與NF-κB信號通路中CD14、NF-κBp65的表達,進而抑制TNF-α、IL-6等炎癥因子的釋放,減輕炎癥反應(yīng)對腎臟組織的損傷,發(fā)揮對膿毒癥幼年大鼠AKI的保護作用。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R720.597

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