本文關(guān)鍵詞：顱腦損傷對周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的影響

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【摘要】：顱腦損傷對骨折愈合有促進作用。相關(guān)研究表明,顱腦損傷后體內(nèi)的細胞因子、神經(jīng)肽及神經(jīng)營養(yǎng)因子、體液因素、機械因素發(fā)生改變,促進了骨折的愈合。同時有文獻報道,神經(jīng)營養(yǎng)因子促進神經(jīng)的修復(fù)與再生。那么顱腦損傷后變化的神經(jīng)營養(yǎng)因子是否會影響周圍神經(jīng)的修復(fù)與再生,未見相關(guān)報道。本研究旨在尋求顱腦損傷與外周神經(jīng)損傷修復(fù)之間的聯(lián)系,進一步探索顱腦損傷的機制及病理生理變化,以及影響的相關(guān)原因,同時擴充外周神經(jīng)修復(fù)與再生的理論基礎(chǔ),指導(dǎo)臨床及治療。目的:研究顱腦損傷對周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的影響,以及產(chǎn)生影響的機制。方法:1.動物分組與模型制備雄性SD大鼠80只,隨機分為A、B兩組,A組為實驗組,采用經(jīng)典Feeney法制造自由落體裝置,撞擊大鼠右腦制作中度顱腦損傷模型,同時于大鼠左側(cè)梨狀肌下孔下方1cm切斷坐骨神經(jīng),應(yīng)用9-0無損傷線外膜縫合法縫合。B組為對照組,僅對左側(cè)坐骨神經(jīng)切斷后縫合。2.坐骨神經(jīng)指數(shù)測量自制大鼠行走暗箱,分別于術(shù)后4、6、8、12周做足印測量,測量數(shù)值帶入公式,求得坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)。以SFI值0時為正常,-100時為神經(jīng)完全斷離。3.腓腸肌濕重的測量分別于造模后第4、6、8、12周時,每組取10只大鼠,水合氯醛腹腔注射麻醉處死后,自股骨內(nèi)外髁起點至跟骨結(jié)節(jié)止點完整取下腓腸肌,用電子天平準(zhǔn)確稱量肌肉濕質(zhì)量。腓腸肌濕重恢復(fù)率(%)=實驗側(cè)濕質(zhì)量(g)/正常側(cè)濕質(zhì)量(g)×100%。4.HE染色于造模后第4、6、8、12周取材時選取坐骨神經(jīng)斷端,行HE染色。光學(xué)顯微鏡下觀察神經(jīng)纖維變化。5.masson染色于造模后8周和12周,取神經(jīng)術(shù)口兩端0.5cm,切片厚度約3-5um,染色方法參考說明書,封片,光學(xué)顯微鏡下觀察神經(jīng)外膜膠原纖維增生情況。6.免疫熒光染色于造模后8周和12周,取神經(jīng)吻合口中段神經(jīng)冰凍切片,nf200免疫熒光染色。熒光顯微鏡下觀察神經(jīng)絲出現(xiàn)情況。7.辣根過氧化物(hrp)示蹤技術(shù)于造模后第4、6、8、12周時,每組取10只大鼠,水合氯醛腹腔注射麻醉后,于左側(cè)坐骨神經(jīng)斷端以遠0.5mm處,輕微挫夾神經(jīng)后,注入30%hrp溶液,72h后深麻醉下開胸,經(jīng)左心室升主動脈插管,用溫生理鹽水200ml沖洗血管,隨后用含2%多聚甲醛和2%戊二醛的0.1mol/lpbs固定液400ml灌流固定,取坐骨神經(jīng)脊神經(jīng)節(jié)以及相應(yīng)的t4-5脊髓節(jié)段,橫斷面連續(xù)振蕩切片50μm。行聯(lián)苯胺(bdhc)法染色,中性紅復(fù)染。光鏡下觀察神經(jīng)節(jié)及脊髓前角運動神經(jīng)元中含藍染顆粒的胞體數(shù)量。8.透射電鏡觀察于造模后8周和12周取材,取材以神經(jīng)吻合口為中心修剪成2mm×lmm×1mm組織塊,固定、包埋、染色,透射電鏡下觀察新生髓鞘超微結(jié)構(gòu)及細胞器形態(tài)。結(jié)果:1.顱腦損傷對周圍神經(jīng)損傷大鼠坐骨神經(jīng)功能指數(shù)的影響暗箱測試結(jié)果顯示,造模后第4周,2組大鼠sfi接近(p0.05);從第4周損傷組大鼠sfi開始降低,隨時間的延長降低的幅度減緩,而對照組大鼠sfi從第6周開始下降;第8、12周時,損傷組大鼠sfi均低于對照組(p0.01)。2.顱腦損傷對周圍神經(jīng)損傷大鼠腓腸肌濕重的影響2組大鼠實驗側(cè)腓腸肌顏色均較健側(cè)蒼白,肌萎縮明顯,且造模后4周時2組的大鼠腓腸肌濕重恢復(fù)率接近(p0.05),而6-12周損傷組大鼠腓腸肌恢復(fù)率顯著高于對照組(p0.01)。3.顱腦損傷對周圍神經(jīng)損傷大鼠坐骨神經(jīng)病理變化的影響he染色顯示,造模后4周時,損傷組、對照組兩組無明顯差異,未見神經(jīng)纖維通過斷端,神經(jīng)斷端紊亂,無完整神經(jīng)纖維,但可見損傷組近端出現(xiàn)較多神經(jīng)纖維細胞,而對照組周圍大量空泡壞死細胞。6周時,損傷組可見神經(jīng)纖維通過斷端,但較少,稀疏,粗細不均,排列紊亂;對照組未見神經(jīng)纖維通過,周圍空泡變性細胞仍然較多見,部分神經(jīng)存在粘連,斷端以遠較細。8周時,損傷組可見較多神經(jīng)纖維通過斷端,粗細漸趨一致,排列較為整齊,但神經(jīng)纖維較細;對照組也可見神經(jīng)纖維通過斷端,但粗細不均,排列紊亂,部分神經(jīng)存在粘連,斷端以遠較細。12周時,損傷組可見通過斷端神經(jīng)纖維數(shù)量較多,直徑較粗,排列一致,與正常纖維無明顯差異;對照組也有較多神經(jīng)纖維通過斷端,粗細一致,神經(jīng)纖維已呈典型的波浪狀排列。4.masson三色法染色術(shù)后8、12周,鏡下均可見對照組在吻合口處膠原纖維增生明顯多于損傷組.且排列紊亂,神經(jīng)纖維稀少,神經(jīng)纖維走行失去波浪狀結(jié)構(gòu)。5.免疫熒光染色術(shù)后8、12周,實驗組在再生神經(jīng)的密度、排列規(guī)則程度以及神經(jīng)髓鞘厚度等方面均要優(yōu)于對照組,表明實驗組損傷的神經(jīng)得到了較快的修復(fù)和再生,神經(jīng)纖維再生的質(zhì)量較高。6.辣根過氧化物(hrp)示蹤技術(shù)光鏡下可見,造模后第4周時,2組大鼠坐骨神經(jīng)神經(jīng)節(jié)、相應(yīng)脊髓節(jié)段前角均未發(fā)現(xiàn)標(biāo)記成藍黑色的神經(jīng)元胞體,可見大量的腫脹細胞;6周時,損傷組大鼠坐骨神經(jīng)神經(jīng)節(jié)內(nèi)可見被標(biāo)記的神經(jīng)元胞體,對照組中未見神經(jīng)元胞體;8周時,損傷組大鼠坐骨神經(jīng)神經(jīng)節(jié)、相應(yīng)脊髓節(jié)段前角內(nèi)可見明顯標(biāo)記細胞,平均12-15個/視野,對照組較少,平均2-5個/視野;12周時,2組均可見明顯的標(biāo)記細胞。7.透射電鏡觀察術(shù)后8周、12周兩組均有不同數(shù)量的有髓神經(jīng)纖維,且術(shù)后12周有髓神經(jīng)纖維數(shù)量較8周多,結(jié)構(gòu)更清晰,層次更分明,尤其損傷組更接近正常神經(jīng)結(jié)構(gòu)。實驗中還可以看出,術(shù)后8周、12周損傷組再生的有髓纖維數(shù)量、結(jié)構(gòu)層次清晰度、髓鞘排列情況以及細胞器恢復(fù)情況均好于對照組。結(jié)論:顱腦損傷在一定程度上對周圍神經(jīng)損傷修復(fù)具有促進作用,顱腦損傷能夠減輕坐骨神經(jīng)的瘢痕愈合,促進神經(jīng)纖維生長,加快髓鞘的成熟,近而促使神經(jīng)形態(tài)及功能較快恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)再生 顱腦損傷 周圍神經(jīng) 坐骨神經(jīng) 神經(jīng)修復(fù) 辣根過氧化物示蹤技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：承德醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R651.3
【目錄】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-14
• 英文縮寫14-15
• 前言15
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-22
• 附圖22-28
• 附表28-29
• 討論29-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-38
• 綜述38-51
• 參考文獻45-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王敏,楊志煥;周圍神經(jīng)損傷修復(fù)方法研究進展[J];創(chuàng)傷外科雜志;2002年01期

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本文編號：1034485