本文關(guān)鍵詞：基于發(fā)芽劑與羥自由基協(xié)同作用的芽胞滅活技術(shù)研究

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【摘要】：細(xì)菌芽胞對干燥、射線、生物酶、毒性化學(xué)物質(zhì)、熱力等理化因子具有很強的抵抗力。這種抗力主要是歸結(jié)于其具有堅實的殼質(zhì)結(jié)構(gòu)、能夠與核酸緊密結(jié)合的α/β-酸溶性小分子芽胞蛋白以及能夠與蛋白質(zhì)緊密結(jié)合的吡啶二羧酸鈣(Ca-DPA)成分。與其相應(yīng)的繁殖體相比,細(xì)菌芽胞對理化因素的抵抗作用增長了10-75倍。因此,在生物防護(hù)技術(shù)研究中,探索并建立可靠、低污染型的現(xiàn)場凈化技術(shù)是一項迫切任務(wù)。 本課題引入透射電鏡、熒光分辨、共聚焦掃描、微生物活菌計數(shù)和動物毒性試驗等技術(shù)手段,觀察L-丙氨酸發(fā)芽劑的生物效應(yīng)以及與羥自由基(·OH)協(xié)同作用滅活類炭疽芽胞的效果。研究結(jié)果如下: 1.經(jīng)最適條件的發(fā)芽劑L-丙氨酸作用,電鏡下可見發(fā)芽20min時的芽胞核心密度降低,核心與皮質(zhì)、皮質(zhì)與外壁之間界限模糊,芽胞外壁和芽胞衣有破裂,通透性增加;30min時的芽胞皮質(zhì)消失,細(xì)胞膜基本完全形成,核與胞制質(zhì)融合。 2.在發(fā)芽過程中,隨著發(fā)芽時間的增加,發(fā)芽體對DAPI熒光的攝入增多,染熒光強度不斷增加,顯示菌體中核酸的活性和含量不斷增加。 3.在發(fā)芽過程中,芽胞DPA不斷流出,與元素鋱(Ⅲ)形成的復(fù)合物(Tb3+-DPA),在波長545nm處有強長效熒光。 4.芽胞對單純的H_2O_2溶液有明顯的抗力,經(jīng)濃度為1.00mol的H_2O_2溶液作用60min時只能達(dá)到0.084個對數(shù)級的殺滅效果。但發(fā)芽體抗力明顯下降,相同濃度和作用時間殺滅數(shù)量達(dá)到1.229個對數(shù)級。 5.在羥自由基(·OH)反應(yīng)體系中, H_2O_2/Fe~(2+)濃度、比例、pH、作用時間、反應(yīng)溫度等是重要的殺滅發(fā)芽體的影響因素,其中,H_2O_2/Fe~(2+)9:1,酸性pH環(huán)境,30℃以上作用溫度,30min以上作用時間有高滴度的殺滅效果。 6.以發(fā)芽處理→堿性溶液協(xié)同處理→酸性溶液中和→羥自由基氧化的聯(lián)合作用程序可使類炭疽芽胞的滅活達(dá)到5.020個對數(shù)級;電鏡下核膜結(jié)構(gòu)模糊,核心溶解,大多數(shù)菌體已成空殼,芽胞菌體殼質(zhì)斷裂破損,少部分可見皮質(zhì)區(qū)向核區(qū)崩解;對模擬環(huán)境(石頭、瓦片、土壤、布片、木塊、水、植物葉片)中的芽胞殺滅率達(dá)到99.81-100%;其作用液進(jìn)行小鼠急性經(jīng)口毒性試驗初步結(jié)果為無毒。
【關(guān)鍵詞】：芽胞 發(fā)芽劑 過氧化氫 羥自由基
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R187
【目錄】：

• 中英文對照表4-5
• 英文摘要5-7
• 中文摘要7-8
• 前言8-10
• 第一部分 發(fā)芽劑對類炭疽芽胞的作用效應(yīng)研究10-21
• 材料和方法10-16
• 結(jié)果16-21
• 第二部分 發(fā)芽劑與羥自由基協(xié)同殺菌效應(yīng)及模擬應(yīng)用研究21-34
• 材料和方法21-27
• 結(jié)果27-34
• 討論34-37
• 全文結(jié)論37-38
• 本研究創(chuàng)新點38
• 本研究局限性38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 文獻(xiàn)綜述 炭疽的疫情及重要控制措施研究進(jìn)展45-56
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 研究生期間發(fā)表的論文和相關(guān)工作56

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本文編號：999481