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不同濃度疊氮溴化丙啶和照射協(xié)同滅活大腸桿菌8099 DNA效果評價

發(fā)布時間:2017-09-20 04:43

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【摘要】:目的評價不同濃度疊氮溴化丙啶(PMA)在不同照射時間對大腸桿菌DNA滅活的效果,確定在實際使用中的最佳濃度和照射時間。方法選擇相當于107cfu大腸桿菌(8099)的DNA作為滅活對象,加入終濃度為50μmol/ml、100μmol/ml、150μmol/ml和200μmol/ml的PMA,使用波長為460 nm的LED燈,分別照射5 min、10 min和15 min,然后進行Real Time PCR擴增。結(jié)果當PMA的濃度達到150μmol/ml,照射5 min時,大腸桿菌Real Time PCR擴增結(jié)果為陰性。結(jié)論在實際使用中,要完全滅活107cfu的大腸桿菌(8099)的DNA,需要≥150μmol/ml的PMA,照射時間≥5 min較合適。
【作者單位】: 北京市疾病預防控制中心;
【關(guān)鍵詞】疊氮溴化丙啶 濃度 照射時間 大腸桿菌
【基金】:北京市自然科學基金(7144201)
【分類號】:R187
【正文快照】: 疊氮溴化丙啶(PMA)能夠結(jié)合結(jié)構(gòu)不完整的(細胞壁和細胞膜破壞的)細胞內(nèi)DNA或者游離在細胞外的DNA,通過一定波長的光照,疊氮基團生成高反應性的氮烯,與雙鏈DNA的碳氫化合物部分地結(jié)合生成穩(wěn)定牢固的共價氮碳鍵,從而形成穩(wěn)定的DNA修飾,抑制聚合酶連鎖反應(PCR)。這為其在消毒學

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7 李e,

本文編號:886009


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