本文關(guān)鍵詞：急性腹瀉患者副溶血弧菌流行特征研究及分子分型分析

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【摘要】：研究目的 1.通過研究急性腹瀉患者細(xì)菌性病原體的感染情況,了解病原體在急性腹瀉患者中的分布特點(diǎn)。 2.對(duì)分離自急性腹瀉患者的副溶血性弧菌進(jìn)行臨床資料分析及抗生素敏感性試驗(yàn),為臨床診斷治療和預(yù)防提供參考。 3.對(duì)分離的部分副溶血性弧菌進(jìn)行多位點(diǎn)序列分型和脈沖凝膠電泳分型分析,了解腹瀉患者副溶血弧菌分子流行病學(xué)特征,為以后的研究工作打下基礎(chǔ)。 研究方法 1.病原體的檢測(cè)：收集2011年1月到12月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院和浙江省兒童醫(yī)院腸道門診急性腹瀉患者的糞便標(biāo)本,進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)及鑒定。 2.副溶血弧菌臨床資料統(tǒng)計(jì)和藥敏試驗(yàn)：對(duì)分離的副溶血性弧菌進(jìn)行臨床資料統(tǒng)計(jì)分析,并采用K-B瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行20種常用抗生素的敏感性試驗(yàn)。 3.副溶血弧菌的MLST分型：應(yīng)用多位點(diǎn)序列分型技術(shù),對(duì)副溶血性弧菌的7個(gè)管家基因：recA基因、dnaE基因、gyrB基因、dtdS基因、pntA、pyrC基因和tnaA基因進(jìn)行擴(kuò)增并測(cè)序。測(cè)序完成后經(jīng)過拼接,將序列與PubMLST數(shù)據(jù)庫中儲(chǔ)存的序列比對(duì),確定副溶血弧菌7個(gè)管家基因的等位基因號(hào)及菌株序列型。應(yīng)用eBURSTv3進(jìn)行集群分析,并與世界株比較。 4.副溶血弧菌的PFGE分型：采用限制性內(nèi)切酶SfiI,對(duì)副溶血弧菌進(jìn)行PFGE分子分型,用BioNumerics Version4.0軟件進(jìn)行聚類分析。 研究結(jié)果 1.對(duì)1074份糞便標(biāo)本開展檢測(cè),其中陽性標(biāo)本303份,陽性率為28.2%。列前5位的細(xì)菌是：致瀉性大腸埃希菌、副溶血弧菌、類志賀鄰單胞菌、嗜水氣單胞菌和霍亂弧菌(為非01非0139群)。 2病原體的混合感染情況：有39份標(biāo)本同時(shí)檢出兩種細(xì)菌,3份標(biāo)本同時(shí)檢出三種細(xì)菌。 3.檢出副溶血弧菌陽性病例特征：7月和8月的檢出率分別為17.9%和12.0%,其他月份平均檢出率為0.76%；男性檢出率為9.6%,女性檢出率為10.1%；在年齡組的分布中,19-60歲年齡組檢出率為15.3%,60歲以上及6-18歲年齡組檢出率分別為7.6%和5.6%；糞便性狀上檢出率最高的是血便,其次為水樣便。 4.副溶血弧菌的藥敏結(jié)果：副溶血弧菌對(duì)抗生素敏感率較高,對(duì)頭孢吡肟、碳青霉烯類、哌拉西林/他唑巴坦等敏感率在99%以上,對(duì)左旋氧氟沙星、阿莫西林/克拉維酸、頭孢他啶、復(fù)方新諾明、氯霉素和氨芐西林/舒巴坦的敏感率均高于95.0%以上；但對(duì)氨芐西林和頭孢唑啉的敏感率僅有5.1%和4.2%,對(duì)頭孢呋新和阿米卡星的敏感率分別為15.3%和16.7%。 5. MLST分型結(jié)果：52株副溶血弧菌開展MLST分析,分型結(jié)果分屬于3種STs,其中ST3型有49株,占94.2%,另外ST120有2株和1株ST8型。9株ST3型PFGE分型得到8種PFGE型別,相似性水平均在60%以上。 研究結(jié)論 1本地夏季門診腹瀉病人中副溶血弧菌的分離率較高,而且在多數(shù)情況下是單一的致瀉性細(xì)菌,這說明副溶血弧菌可能是該地區(qū)引起腹瀉的重要致病菌。今后可以開展腹瀉患者副溶血弧菌的檢測(cè),以提供臨床診斷和治療的依據(jù)。 2副溶血弧菌在不同季節(jié)、年齡組間具有一定的分布特點(diǎn)。 3副溶血弧菌對(duì)于大多數(shù)的抗菌藥物敏感性較高,但部分藥物存在耐藥趨勢(shì),應(yīng)加強(qiáng)對(duì)耐藥菌株的監(jiān)測(cè)。 4ST3是本地急性腹瀉患者中的副溶血弧菌MLST分型的主要序列型,該方法可能不適合本地區(qū)副溶血弧菌導(dǎo)致的暴發(fā)的探測(cè),但可結(jié)合PFGE方法,以增加暴發(fā)探測(cè)的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：腹瀉 副溶血弧菌 多位點(diǎn)序列分型 脈沖場(chǎng)凝膠電泳 抗生素敏感性
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R378.3;R181.3
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 英文縮寫11-13
• 目次13-14
• 1 引言14-16
• 2 材料與方法16-29
• 2.1 材料16-19
• 2.2 方法19-29
• 3 結(jié)果29-41
• 3.1 病例及標(biāo)本分布情況29-30
• 3.2 細(xì)菌檢出情況30-33
• 3.3 副溶血弧菌的藥敏結(jié)果33-34
• 3.4 副溶血弧菌MLST分析結(jié)果34-39
• 3.5 副溶血弧菌PFGE分析結(jié)果39-41
• 4 分析與討論41-45
• 5 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 綜述52-60
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 作者簡(jiǎn)歷60

【參考文獻(xiàn)】

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