急性腹瀉患者副溶血弧菌流行特征研究及分子分型分析
本文關(guān)鍵詞:急性腹瀉患者副溶血弧菌流行特征研究及分子分型分析
更多相關(guān)文章: 腹瀉 副溶血弧菌 多位點序列分型 脈沖場凝膠電泳 抗生素敏感性
【摘要】:研究目的 1.通過研究急性腹瀉患者細菌性病原體的感染情況,了解病原體在急性腹瀉患者中的分布特點。 2.對分離自急性腹瀉患者的副溶血性弧菌進行臨床資料分析及抗生素敏感性試驗,為臨床診斷治療和預(yù)防提供參考。 3.對分離的部分副溶血性弧菌進行多位點序列分型和脈沖凝膠電泳分型分析,了解腹瀉患者副溶血弧菌分子流行病學(xué)特征,為以后的研究工作打下基礎(chǔ)。 研究方法 1.病原體的檢測:收集2011年1月到12月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院和浙江省兒童醫(yī)院腸道門診急性腹瀉患者的糞便標本,進行細菌分離培養(yǎng)及鑒定。 2.副溶血弧菌臨床資料統(tǒng)計和藥敏試驗:對分離的副溶血性弧菌進行臨床資料統(tǒng)計分析,并采用K-B瓊脂擴散法進行20種常用抗生素的敏感性試驗。 3.副溶血弧菌的MLST分型:應(yīng)用多位點序列分型技術(shù),對副溶血性弧菌的7個管家基因:recA基因、dnaE基因、gyrB基因、dtdS基因、pntA、pyrC基因和tnaA基因進行擴增并測序。測序完成后經(jīng)過拼接,將序列與PubMLST數(shù)據(jù)庫中儲存的序列比對,確定副溶血弧菌7個管家基因的等位基因號及菌株序列型。應(yīng)用eBURSTv3進行集群分析,并與世界株比較。 4.副溶血弧菌的PFGE分型:采用限制性內(nèi)切酶SfiI,對副溶血弧菌進行PFGE分子分型,用BioNumerics Version4.0軟件進行聚類分析。 研究結(jié)果 1.對1074份糞便標本開展檢測,其中陽性標本303份,陽性率為28.2%。列前5位的細菌是:致瀉性大腸埃希菌、副溶血弧菌、類志賀鄰單胞菌、嗜水氣單胞菌和霍亂弧菌(為非01非0139群)。 2病原體的混合感染情況:有39份標本同時檢出兩種細菌,3份標本同時檢出三種細菌。 3.檢出副溶血弧菌陽性病例特征:7月和8月的檢出率分別為17.9%和12.0%,其他月份平均檢出率為0.76%;男性檢出率為9.6%,女性檢出率為10.1%;在年齡組的分布中,19-60歲年齡組檢出率為15.3%,60歲以上及6-18歲年齡組檢出率分別為7.6%和5.6%;糞便性狀上檢出率最高的是血便,其次為水樣便。 4.副溶血弧菌的藥敏結(jié)果:副溶血弧菌對抗生素敏感率較高,對頭孢吡肟、碳青霉烯類、哌拉西林/他唑巴坦等敏感率在99%以上,對左旋氧氟沙星、阿莫西林/克拉維酸、頭孢他啶、復(fù)方新諾明、氯霉素和氨芐西林/舒巴坦的敏感率均高于95.0%以上;但對氨芐西林和頭孢唑啉的敏感率僅有5.1%和4.2%,對頭孢呋新和阿米卡星的敏感率分別為15.3%和16.7%。 5. MLST分型結(jié)果:52株副溶血弧菌開展MLST分析,分型結(jié)果分屬于3種STs,其中ST3型有49株,占94.2%,另外ST120有2株和1株ST8型。9株ST3型PFGE分型得到8種PFGE型別,相似性水平均在60%以上。 研究結(jié)論 1本地夏季門診腹瀉病人中副溶血弧菌的分離率較高,而且在多數(shù)情況下是單一的致瀉性細菌,這說明副溶血弧菌可能是該地區(qū)引起腹瀉的重要致病菌。今后可以開展腹瀉患者副溶血弧菌的檢測,以提供臨床診斷和治療的依據(jù)。 2副溶血弧菌在不同季節(jié)、年齡組間具有一定的分布特點。 3副溶血弧菌對于大多數(shù)的抗菌藥物敏感性較高,但部分藥物存在耐藥趨勢,應(yīng)加強對耐藥菌株的監(jiān)測。 4ST3是本地急性腹瀉患者中的副溶血弧菌MLST分型的主要序列型,該方法可能不適合本地區(qū)副溶血弧菌導(dǎo)致的暴發(fā)的探測,但可結(jié)合PFGE方法,以增加暴發(fā)探測的敏感性。
【關(guān)鍵詞】:腹瀉 副溶血弧菌 多位點序列分型 脈沖場凝膠電泳 抗生素敏感性
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R378.3;R181.3
【目錄】:
- 致謝4-5
- 中文摘要5-8
- Abstract8-11
- 英文縮寫11-13
- 目次13-14
- 1 引言14-16
- 2 材料與方法16-29
- 2.1 材料16-19
- 2.2 方法19-29
- 3 結(jié)果29-41
- 3.1 病例及標本分布情況29-30
- 3.2 細菌檢出情況30-33
- 3.3 副溶血弧菌的藥敏結(jié)果33-34
- 3.4 副溶血弧菌MLST分析結(jié)果34-39
- 3.5 副溶血弧菌PFGE分析結(jié)果39-41
- 4 分析與討論41-45
- 5 結(jié)論45-46
- 參考文獻46-52
- 綜述52-60
- 參考文獻57-60
- 作者簡歷60
【參考文獻】
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,本文編號:855855
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