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C.jejuni對周圍神經(jīng)的損傷及其流行病學(xué)調(diào)查

發(fā)布時間:2017-09-04 01:06

  本文關(guān)鍵詞:C.jejuni對周圍神經(jīng)的損傷及其流行病學(xué)調(diào)查


  更多相關(guān)文章: 空腸彎曲菌 吉蘭-巴雷綜合征 動物模型 神經(jīng)病變 流行病學(xué) 糞便培養(yǎng) 新生兒 兒童


【摘要】:第一部分:C.jejuni對周圍神經(jīng)的損傷 目的: 初步探討空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)致吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)動物模型中不同免疫方式、不同動物、不同菌種、不同濃度對動物周圍神經(jīng)病變的影響。 方法: 1菌懸液制備:選取華北地區(qū)吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barresyndrome,GBS)患者分離培養(yǎng)出的空腸彎曲菌菌株。從-80℃冰箱取出加入到布氏肉湯42℃微需氧條件(10%CO2、5%O2、85%N2)培養(yǎng)24-48h復(fù)蘇菌株。用含7%無菌脫纖維羊血的哥倫比亞血平板傳代純化菌株。純化后刮取菌落,放入無菌布氏肉湯或生理鹽水中混勻制備菌懸液。 2實驗分組 A組:Balb/c小鼠采取以下方式免疫:腹腔注射、灌胃、皮下及足墊多點(diǎn)注射免疫。 B組:Balb/c小鼠分為六組給予NCTC1116810×4cfu/只、10×6cfu/只、10×8cfu/只,Lulei10×4cfu/只、10×6cfu/只、10×8cfu/只灌胃。 C組:相同免疫方式分別免疫Balb/c小鼠、昆明鼠。 3糞便培養(yǎng) 未給予任何處理的小鼠、灌胃后小鼠以及皮下及足墊多點(diǎn)注射后小鼠各組于處理后第二天起連續(xù)糞便培養(yǎng)空腸彎曲菌。 4神經(jīng)病理檢查:采用鋨酸染色、免疫組化觀察神經(jīng)病變。并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果: 1癥狀與體征 1.1灌胃后動物可見腹瀉,皮毛聳立,活動及進(jìn)食水減少。 1.2腹腔注射組動物可見進(jìn)食水減少。 1.3皮下及足墊注射組動物可見皮毛凌亂聳立活動減少,精神萎靡,注射部位紅腫潰爛。 各組動物均未發(fā)現(xiàn)明顯肢體活動障礙。 2周圍神經(jīng)病變 鋨酸染色 A:三組小鼠均可見神經(jīng)皺縮、髓鞘塌陷。皮下及足墊多點(diǎn)注射組坐骨神經(jīng)單纖維病變率為41.5%、灌胃組坐骨神經(jīng)單纖維病變率為10%、腹腔注射組坐骨神經(jīng)單纖維病變率為27%。 B:NCTC1116810×4cfu、10×6cfu、10×8cfu組神經(jīng)較光滑未見明顯病變,Lulei10×4cfu組坐骨神經(jīng)單纖維病變率為19%,10×6cfu組單纖維病變率為30%,10×8cfu組單纖維病變率為30.5%。 C:相同免疫方式免疫昆明鼠和Balb/c小鼠后,Balb/c小鼠可見明顯神經(jīng)病變,發(fā)生率為34.3%。而昆明鼠神經(jīng)較光滑未見神經(jīng)病變。 3糞便培養(yǎng): 3.1未給予任何處理小鼠糞便培養(yǎng)均未見空腸彎曲菌。 3.2第一次活菌灌胃后小鼠取便培養(yǎng)可見空腸彎曲菌,空腸彎曲菌培養(yǎng)陽性時間持續(xù)2-10天不等;經(jīng)歷過多次(≥3次,約2周/次)活菌灌胃后小鼠便培養(yǎng)可見空腸彎曲菌,空腸彎曲菌培養(yǎng)陽性時間持續(xù)6-8天不等。 3.3皮下及足墊多點(diǎn)注射小鼠取便培養(yǎng)未見空腸彎曲菌。 結(jié)論: 1皮下及足墊多點(diǎn)注射免疫對小鼠周圍神經(jīng)損害重于灌胃、腹腔注射組;腹腔注射免疫對小鼠周圍神經(jīng)損害重于灌胃。 2Lulei可以導(dǎo)致周圍神經(jīng)損傷、11168未引起周圍神經(jīng)損傷;Lulei10x6濃度組免疫小鼠所得模型優(yōu)于10x4濃度組, Lulei10x8濃度組于Lulei10x6濃度對周圍神經(jīng)損傷沒有差別。 3空腸彎曲菌對Balb/c小鼠周圍神經(jīng)的損害重于昆明鼠。 4初次灌胃后空腸彎曲菌在小鼠體內(nèi)的存留個體差異較大,持續(xù)時間短,經(jīng)歷幾次灌胃后空腸彎曲菌侵襲成功率增加且腸道定植時間呈穩(wěn)定的增長趨勢。 第二部分:C.jejuni在新生兒及兒童中的流行病學(xué)調(diào)查 目的: 調(diào)查空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni)在新生兒和兒童糞便中的攜帶情況。 方法: 1實驗對象 選取10月份到12月份河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院產(chǎn)科病房出生1d-9d內(nèi)的健康新生兒及兒科病房住院患者為研究對象。 2糞便采集 2.1新生兒糞便采集,新生兒排便后,用滅菌棉拭子挑取黃豆粒大小糞便放入加有布氏肉湯的滅菌西林瓶中,于3h內(nèi)送達(dá)實驗室。 2.2兒科患者糞便采集,患者留便于采樣盒中,6h內(nèi)取適量于布氏肉湯中送實驗室。 3糞便培養(yǎng) 參照河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科實驗室《空腸彎曲菌臨床分離鑒定保藏實驗室標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行糞便空腸彎曲菌分離鑒定。 結(jié)果: 分離142例新生兒糞便,40例兒童糞便可見較多大腸桿菌,乳酸桿菌,,但均未見空腸彎曲菌。 結(jié)論: 1健康新生兒及此次所分離的兒童糞便中可能無空腸彎曲菌攜帶。 2本實驗所用方法可能不適用于此類人群空腸彎曲菌的分離。
【關(guān)鍵詞】:空腸彎曲菌 吉蘭-巴雷綜合征 動物模型 神經(jīng)病變 流行病學(xué) 糞便培養(yǎng) 新生兒 兒童
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R745;R181.3
【目錄】:
  • 摘要4-7
  • ABSTRACT7-11
  • 引言11-12
  • 第一部分 C.jejuni 對周圍神經(jīng)的損傷12-30
  • 前言12
  • 材料與方法12-20
  • 結(jié)果20-22
  • 附圖22-25
  • 附表25-27
  • 討論27-28
  • 小結(jié)28-29
  • 參考文獻(xiàn)29-30
  • 第二部分 C.jejuni 在新生兒及兒童中的流行病學(xué)調(diào)查30-37
  • 前言30
  • 材料與方法30-32
  • 結(jié)果32-33
  • 附表33-34
  • 討論34-35
  • 小結(jié)35
  • 參考文獻(xiàn)35-36
  • 結(jié)論36-37
  • 綜述 關(guān)于空腸彎曲菌致吉蘭巴雷模型探討37-45
  • 參考文獻(xiàn)42-45
  • 致謝45-46
  • 個人簡歷46-47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號:788409

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