本文關(guān)鍵詞：臭氧對(duì)口腔綜合治療臺(tái)水道系統(tǒng)中HBV滅活效果的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的：探討能夠限時(shí)滅活口腔綜合治療臺(tái)水道中乙肝病毒的最低臭氧溶液濃度。擬用多種方法控制溶液的臭氧濃度的穩(wěn)定,將配制的不同濃度臭氧溶液同人肝癌細(xì)胞系(HepG2)的2.2.15細(xì)胞共同培養(yǎng)后提取其上清液,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增,熒光定量(FQ-PCR)檢測(cè)HVB-DNA的濃度,對(duì)各濃度臭氧溶液的滅活效果進(jìn)行比較。并觀察并不同濃度臭氧溶液對(duì)正常口腔上皮細(xì)胞的影響。為臭氧在DUWLs的感染控制的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法：1、臭氧溶液的配置與濃度衰減實(shí)驗(yàn)； 2、HepG2.2.15細(xì)胞的培養(yǎng)：常規(guī)培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞； 3、不同濃度的臭氧溶液對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞株表達(dá)物的作用； 4、臭氧溶液對(duì)正常口腔組織的細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)； 5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用單岡素方差分析統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,兩組組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)。 結(jié)果：1、不同封閉條件和放置時(shí)間的臭氧濃度變化：臭氧溶液放置30min后,各組濃度變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=9.77,P0.01)。在密封條件下,水溫為5℃和水溫為10℃時(shí)臭氧濃度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=1.36,P0.05)；密封條件下,水溫為5℃與水溫20℃時(shí)臭氧濃度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=4.88,P0.01)。水溫為5℃時(shí),密封和非密封臭氧濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=0.59,P0.05)；水溫為20℃時(shí),密封和非密封臭氧濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=3.37,P0.01)。 2、臭氧溶液對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞上清液中HBV-DNA含量PCR熒光結(jié)果示：臭氧溶液能夠明顯減少HepG2.2.15上清液中HBV-DNA含量。相同時(shí)間內(nèi)不同濃度臭氧溶液對(duì)HBV-DNA含量的影響不同,臭氧溶液濃度越大,其對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞HBV-DNA的表達(dá)抑制越明顯。 3、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HVB-DNA檢測(cè)結(jié)果：臭氧溶液組比超純水對(duì)照組HBV-DNA量明顯降低。在臭氧作用1min時(shí),臭氧濃度為1.5mg/L組和其他各組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01)；臭氧分別作用5、10、15、30min時(shí),各組臭氧溶液均能降低HVB-DNA含量,超純水組和其他各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01)；臭氧作用15min后,臭氧溶液各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。 4、臭氧溶液對(duì)Hela細(xì)胞作用的細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察：經(jīng)倒置顯微鏡檢測(cè)Hela細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)呈星形,棱形,細(xì)胞形態(tài)良好,胞體透亮,呈典型貼壁不規(guī)則形態(tài),加入低濃度(0.5mg/L、0.6mg/L)臭氧溶液后,對(duì)細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯影響加入中濃度(1.5mg/L)臭氧溶液后細(xì)胞出現(xiàn)顆粒,有少部分胞體變小,提示細(xì)胞狀態(tài)受到一定程度影響。加入甲醛甲酚溶液后細(xì)胞形態(tài)明顯破壞,出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片,提示細(xì)胞大量死亡,破壞嚴(yán)重。 5、臭氧溶液對(duì)細(xì)胞增殖的影響：MTT結(jié)果顯示,陰性對(duì)照組同低濃度臭氧溶液組(0.5mg/L、0.6mg/L)細(xì)胞相對(duì)增殖率均在100-103%之間,毒性評(píng)級(jí)為0級(jí),其他1組中濃度臭氧溶液(1.5mg/L)細(xì)胞相對(duì)增值率在75%-99%之間,毒性評(píng)級(jí)為1級(jí)。陽(yáng)性對(duì)照組的細(xì)胞相對(duì)增值率在1-24%之間,毒性評(píng)級(jí)為4級(jí),3組臭氧溶液的安全性為合格。 結(jié)論：1、水溫、容器是否密閉都會(huì)影響臭氧濃度,水溫越高臭氧濃度變化越快,容器密閉時(shí),臭氧濃度穩(wěn)定。 2、臭氧溶液能夠有效的滅活HBV-DNA,并且臭氧濃度越高,其對(duì)HBV-DNA的滅活作用越強(qiáng)。臭氧濃度為0.6mg/L10min及0.5mg/L15min能將設(shè)定濃度的HVB-DNA滅活。 3、3、0.5mg/L、0.6mg/L的臭氧溶液對(duì)口腔正常組織無(wú)毒性作用,可以應(yīng)用于DUWLs的消毒。
【關(guān)鍵詞】：口腔綜合治療臺(tái)水道系統(tǒng) 乙肝病毒 臭氧 熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 消毒 生物膜 交叉感染
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R187
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明11-12
• 前言12-15
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-15
• 材料和方法15-20
• 1 主要儀器與設(shè)備15-16
• 2 試劑及材料16
• 3 方法16-19
• 3.1 臭氧水的配制及濃度測(cè)定16
• 3.2 臭氧溶液中臭氧濃度的衰減測(cè)定16
• 3.3 HepG2.2.15細(xì)胞的培養(yǎng)16-17
• 3.4 臭氧溶液對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞的作用17
• 3.5 細(xì)胞上清液中HBV-DNA的檢測(cè)方法17-18
• 3.6 臭氧溶液對(duì)正�？谇唤M織的細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)18-19
• 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 結(jié)果20-31
• 1 不同封閉條件和水溫對(duì)的臭氧濃度變化20-22
• 2 不同封閉條件和水溫對(duì)的臭氧濃度變化22-23
• 3 臭氧溶液對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞上清液中HBV-DNA含量PCR示意圖23-24
• 4 HepG2.2.15 細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果24
• 5 Hela細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察24-28
• 6 MTT比色法檢測(cè)臭氧對(duì)細(xì)胞增殖的影響28-31
• 討論31-39
• 1 DUWLs的水質(zhì)污染現(xiàn)狀31-32
• 2 DUWLs的污染控制現(xiàn)狀32-34
• 3 乙肝病毒交叉感染的危險(xiǎn)性34-35
• 4 臭氧在口腔臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用35-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明45-46
• 綜述46-57
• 綜述參考文獻(xiàn)52-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

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8 章小緩;姬亞昆;凌均h，

本文編號(hào)：725104