本文關(guān)鍵詞：既往季節(jié)性流感病毒感染對(duì)流感疫苗接種效果影響的研究

  更多相關(guān)文章： 流感季節(jié)性感染 DNA疫苗 交叉保護(hù) 免疫原罪 殼聚糖

【摘要】：流感仍然是威脅人類健康的一類重要的呼吸道傳染性疾病,流感病毒的變異導(dǎo)致人們經(jīng)常遭受流感病毒的侵襲,流感病毒的感染誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)其的免疫反應(yīng),但這種免疫不能完全抵抗新型流感病毒的感染,本論文就基于這種感染產(chǎn)生的免疫反應(yīng),對(duì)接種流感病毒疫苗產(chǎn)生的影響效果進(jìn)行研究,以期為預(yù)防流感提供一些有價(jià)值的參考。 本論文由五部分組成： (一)流感病毒、流感病毒疫苗、流感病毒感染等簡(jiǎn)介。以綜述的形式描述了A型流感病毒的基本特征、流感疫苗的分類、流感病毒感染導(dǎo)致的非特異性免疫應(yīng)答和特異性免疫應(yīng)答等知識(shí)。 (二)季節(jié)性流感病毒感染后用H5N1NP M1DNA疫苗免疫對(duì)同型流感病毒攻擊的保護(hù)效果研究。既往季節(jié)性流感病毒的感染導(dǎo)致感染者體內(nèi)具有對(duì)流感病毒的免疫記憶,能削弱變異的流感病毒在體內(nèi)的復(fù)制能力,對(duì)變異的流感病毒的感染提供部分的保護(hù)作用,但不能完全抵抗變異流感病毒的攻擊�；诿庖哂洃涊o以流感病毒保守基因DNA疫苗免疫,增強(qiáng)機(jī)體抗流感病毒攻擊的研究,對(duì)預(yù)防流感有一定的實(shí)際意義。本章利用A/PR8(H1N1)流感病毒感染BALB/c小鼠產(chǎn)生針對(duì)流感病毒的免疫記憶,用H5N1流感病毒內(nèi)部保守基因NP、M1和NP+M1DNA疫苗免疫感染過(guò)的小鼠,和單獨(dú)疫苗免疫組進(jìn)行比較。用ELISA方法測(cè)定血清中特異性IgG抗體,利用ELISPOT檢測(cè)脾臟細(xì)胞,用致死量H5N1流感病毒攻擊小鼠后,取小鼠肺洗液測(cè)定小鼠肺部病毒滴度,并觀察攻毒后小鼠的體重變化和存活率。結(jié)果表明,既往感染的基礎(chǔ)上用NP+M1DNA疫苗免疫一次就能為小鼠提供很好的抗H5N1流感病毒攻擊的保護(hù)作用。 (三)季節(jié)性流感病毒感染后用H5N1NP Ml DNA疫苗免疫對(duì)流感病毒攻擊的交叉保護(hù)效果研究。感染產(chǎn)生的免疫記憶,輔以H5N1流感病毒保守的NP、M1DNA疫苗免疫一次,就能抗同型的流感病毒的攻擊,為了進(jìn)一步研究抗異源的流感病毒攻擊的效果,本章在第三章的基礎(chǔ)上進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)利用A/PR8(H1N1)流感病毒感染小鼠,使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)流感病毒的免疫記憶,用H5N1流感病毒的保守基因NP+M1DNA疫苗免疫一次小鼠,四周后分別用致死性的野外分離的實(shí)驗(yàn)室小鼠適應(yīng)株H9N2、H10N8流感病毒的攻擊,取肺測(cè)小鼠肺部病毒滴度,觀察病毒攻擊后小鼠的體重丟失率和存活率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,H1N1流感病毒感染后產(chǎn)生的免疫記憶輔以H5N1NP+M1DNA疫苗免疫一次,能抗19N2、H10N8流感病毒的攻擊,表現(xiàn)出很好的抗異源病毒攻擊的保護(hù)效果。 (四)季節(jié)性流感病毒感染產(chǎn)生的免疫原罪對(duì)接種流感病毒疫苗的影響。既往季節(jié)性流感病毒感染產(chǎn)生的免疫記憶,能在一定程度上產(chǎn)生免疫原罪,也稱為初次抗原過(guò)失,即當(dāng)新的亞型流感病毒感染時(shí),體內(nèi)產(chǎn)生的免疫反應(yīng)會(huì)優(yōu)先針對(duì)第一次或之前感染的流感病毒產(chǎn)生免疫反應(yīng),而針對(duì)現(xiàn)在感染的新亞型流感病毒產(chǎn)生的免疫反應(yīng)就會(huì)削弱。免疫記憶的存在,不利于針對(duì)新的疫苗產(chǎn)生抗體,關(guān)于這個(gè)理論現(xiàn)在還存有爭(zhēng)議,為了進(jìn)一步論證這個(gè)問(wèn)題,本章利用A/PR8流感病毒感染小鼠,四周后,分別免疫甲型H1N1流感病毒的滅活疫苗和HA DNA疫苗以及H5N1流感病毒的滅活疫苗,免疫三周后,取血測(cè)抗體,并用對(duì)應(yīng)的同型病毒攻擊。通過(guò)檢測(cè)小鼠的抗體以及對(duì)病毒的抵抗作用,來(lái)衡量免疫效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,預(yù)先感染流感病毒產(chǎn)生的免疫記憶對(duì)疫苗接種效果沒(méi)有產(chǎn)生明顯的干擾作用。 (五)殼聚糖增強(qiáng)流感病毒H5N1滅活疫苗效果研究。為解決當(dāng)前全球面臨的在流感流行和大流行期間流感疫苗短缺或抗原性差的問(wèn)題,我們選取殼聚糖做流感疫苗佐劑,研究殼聚糖增強(qiáng)H5N1流感疫苗的佐劑效應(yīng)。通過(guò)腹腔注射的方式將殼聚糖和不同劑量的H5N1流感病毒滅活疫苗共同免疫小鼠,檢測(cè)小鼠初次免疫或加強(qiáng)免疫產(chǎn)生的抗體滴度、病毒攻擊后小鼠肺部病毒含量、小鼠的體重變化以及小鼠的保護(hù)率,并與傳統(tǒng)的臨床上運(yùn)用的鋁佐劑的效果進(jìn)行比較。研究結(jié)果表明,添加殼聚糖佐劑誘導(dǎo)產(chǎn)生了較高的抗體,增強(qiáng)小鼠抗病毒感染能力,減少小鼠肺部病毒量。結(jié)果顯示,殼聚糖的佐劑效果與鋁佐劑相當(dāng)。
【關(guān)鍵詞】：流感季節(jié)性感染 DNA疫苗 交叉保護(hù) 免疫原罪 殼聚糖
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R511.7;R186
【目錄】：

• 摘要3-6
• Abstract6-10
• 目錄10-14
• 第一章 引言14-41
• 1. 流感病毒的基本特點(diǎn)15-21
• 1.1 流感病毒基因組結(jié)構(gòu)及其編碼的蛋白15-21
• 2 流感病毒的感染及流行21-24
• 2.1 流感病毒導(dǎo)致的臨床癥狀21
• 2.2 流感病毒的流行和傳播21-24
• 3 流感病毒疫苗研究進(jìn)展24-30
• 3.1 傳統(tǒng)的流感病毒疫苗24-26
• 3.2 新型的流感病毒疫苗26-30
• 4 抗流感病毒感染的免疫應(yīng)答30-38
• 4.1 流感病毒感染的非特異性免疫應(yīng)答31-33
• 4.2 流感病毒感染的特異性免疫應(yīng)答33-38
• 5. 論文章節(jié)安排38-41
• 第二章 基于季節(jié)性流感病毒感染H5N1 NP M1 DNA疫苗對(duì)同型流感病毒的保護(hù)效果研究41-68
• 1. 前言41-42
• 2. 材料和方法42-52
• 2.1 流感病毒42-43
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物43
• 2.3 試劑和材料43-45
• 2.4 主要儀器45-46
• 2.5 DNA疫苗制備46-47
• 2.6 實(shí)驗(yàn)方法47-52
• 2.7 統(tǒng)計(jì)分析52
• 3. 結(jié)果52-64
• 3.1 小鼠被動(dòng)免疫抗流感病毒H1N1血清對(duì)流感病毒H5N1的保護(hù)效果52-54
• 3.2 感染H1N1,免疫H5N1 NP M1 DNA疫苗抗H5N1病毒的保護(hù)效果54-56
• 3.3 感染H1N1,免疫H5N1 NP M1 DNA疫苗產(chǎn)生的IgG抗體56-58
• 3.4 感染H1N1,免疫H5N1 NP M1 DNA疫苗,H5N1病毒攻擊后小鼠體重丟失和肺部病毒滴度58-62
• 3.5 感染H1N1,免疫H5N1 NP M1 DNA疫苗,細(xì)胞免疫反應(yīng)62-64
• 4. 討論64-68
• 第三章 基于季節(jié)性流感病毒感染H5N1 NP M1 DNA疫苗的交叉保護(hù)效果研究68-87
• 1. 前言68-70
• 2. 材料和方法70-74
• 2.1 流感病毒70-71
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物71
• 2.3 試劑和材料71
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法71-74
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析74
• 3. 結(jié)果74-84
• 3.1 H3N2流感病毒攻擊后的保護(hù)效果74-76
• 3.2 甲型H1N1流感病毒攻擊后的保護(hù)效果76-79
• 3.3 H9N2流感病毒攻擊后的保護(hù)效果79-81
• 3.4 H10N8流感病毒攻擊后的保護(hù)效果81-84
• 4. 討論84-87
• 第四章 季節(jié)性流感病毒感染產(chǎn)生的免疫原罪對(duì)接種流感病毒疫苗的影響87-100
• 1. 前言87-89
• 2. 材料和方法89-94
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物89
• 2.2 疫苗89-91
• 2.3 免疫策略91-92
• 2.4 樣本采集92
• 2.5 抗體檢測(cè)92-93
• 2.6 肺部病毒滴度測(cè)定93
• 2.7 病毒攻擊及小鼠流感癥狀及小鼠存活情況觀察93
• 2.8 統(tǒng)計(jì)分析93-94
• 3. 結(jié)果94-100
• 3.1 甲型H1N1滅活疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體94-95
• 3.2 甲型H1N1 HA DNA疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體95-96
• 3.3 H5N1流感病毒滅活疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體96-98
• 3.4 甲型H1N1疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的保護(hù)效果98-99
• 3.5 H5N1流感病毒滅活疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的保護(hù)效果99-100
• 4. 討論100-104
• 第五章 殼聚糖增強(qiáng)流感病毒H5N1滅活疫苗效果研究104-116
• 1. 前言104-105
• 2. 材料與方法105-108
• 2.1 疫苗105
• 2.2 佐劑105-106
• 2.3 動(dòng)物免疫106
• 2.4 病毒攻擊106
• 2.5 提取樣本106-107
• 2.6 抗體檢測(cè)107
• 2.7 肺部病毒滴度檢測(cè)107
• 2.8 統(tǒng)計(jì)分析107-108
• 3. 結(jié)果108-113
• 3.1 比較鋁佐劑和殼聚糖佐劑誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的血清IgG抗體108-109
• 3.2 致死量病毒攻擊后小鼠的肺部病毒滴度與存活率109-111
• 3.3 致死性同型病毒攻擊后小鼠體重變化111-113
• 4. 討論113-116
• 結(jié)語(yǔ)116-119
• 參考文獻(xiàn)119-135
• 附錄135-137
• 縮寫表137-138
• 致謝138-140

【共引文獻(xiàn)】

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