本文關(guān)鍵詞：中緬邊境地區(qū)蚊蟲種群調(diào)查、分子鑒定及球形芽孢桿菌殺蟲效果檢測，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：蚊傳播疾病是通過蚊蟲叮咬傳播的一類傳染病,嚴(yán)重威脅著人類的健康。中緬邊境地區(qū)由于其特殊的氣候、地理環(huán)境、邊境人員往來密切等因素影響,導(dǎo)致蚊蟲種類繁多、種群組成復(fù)雜,使瘧疾等蚊傳播疾病常年發(fā)生,該地區(qū)也成為我國輸入性瘧疾的重要通道。圍繞中緬邊境地區(qū)蚊蟲種群開展相關(guān)工作,獲取部分信息和數(shù)據(jù),將為該地區(qū)蟲媒病防治提供依據(jù)。本課題組首先對中緬邊境緬甸克欽地區(qū)部分村莊的蚊媒種群進(jìn)行調(diào)查,了解當(dāng)?shù)氐奈妙惙N群組成和密度;繼而,利用分子生物學(xué)和生物信息學(xué)技術(shù),對捕獲于緬甸克欽地區(qū)部分按蚊進(jìn)行了蚊種鑒定;最后,利用Probit analysis的生物測定方法,完成了球形芽孢桿菌對中華按蚊的殺蟲效果測定。方法:1.采用誘蚊燈法捕獲蚊蟲,于黃昏分別置燈于人房,次日清晨收燈,將每日收集到的蚊蟲冷凍麻醉后進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類鑒定及保存處理。體式顯微鏡下觀察所采集按蚊的形態(tài)學(xué)特征,對按蚊種類進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。2.提取單只按蚊基因組DNA、PCR擴(kuò)增ITS2區(qū)段、PCR產(chǎn)物電泳分析、PCR產(chǎn)物測序、ITS2序列分析并構(gòu)建進(jìn)化樹,對蚊種進(jìn)行核酸分子鑒定。3.在中緬邊境地區(qū)捕獲飽血的中華按蚊,帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)產(chǎn)卵、孵化,應(yīng)用不同濃度球形芽孢桿菌(Bacillus sphaericus,Bs)對中華按蚊3齡幼蟲齡殺傷效果進(jìn)行Probit analysis生物測定。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,設(shè)置Bs濃度從低到高的不同實(shí)驗(yàn)組,并設(shè)置空白對照組。每組取500ml去氯自來水于搪瓷碗中,每碗加入一定數(shù)量3齡中華按蚊幼蟲,再分別按照不同藥物濃度加入相應(yīng)量的Bs2362,輕輕攪勻。分別在加藥后12h、24h、36h、48h、60h和72h計(jì)數(shù)幼蟲死亡數(shù)量。結(jié)果:1.在中緬邊境緬甸克欽地區(qū)JHK、L1、JYH、MSY四個(gè)村莊共捕獲按蚊1536只,庫蚊6260只,伊蚊45只,其它蚊種215只,總和8056只;從蚊蟲種群組成可以看出,庫蚊為主要蚊種,其次為按蚊;對捕獲的所有按蚊進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,共鑒定出了13種不同按蚊,分別符合微小按蚊、多斑按蚊、可赫按蚊、美彩按蚊、中華按蚊、須喙按蚊、迷糊按蚊、棋斑按蚊、帶足按蚊、克勞按蚊、五斑按蚊、庫態(tài)按蚊、雷氏按蚊的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。其中,微小按蚊居多,其它依次為庫態(tài)按蚊、中華按蚊、迷糊按蚊、帶足按蚊、多斑按蚊等,不同調(diào)查村莊按蚊分布有所不同。2.對上述按蚊中的10種按蚊進(jìn)行單只雌蚊DNA提取、ITS2區(qū)段PCR擴(kuò)增、測序、序列比對,進(jìn)一步確定蚊種,其中微小按蚊、多斑按蚊、可赫按蚊、美彩按蚊、中華按蚊、迷糊按蚊、帶足按蚊、庫態(tài)按蚊等8種按蚊均與形態(tài)學(xué)鑒定一致,而須喙按蚊和雷氏按蚊等2種按蚊蚊種均與形態(tài)學(xué)鑒定不一致。3.隨著Bs2362濃度的增加,中華按蚊3齡幼蟲的累積死亡率逐漸增加;Bs五個(gè)梯度濃度的log值和死亡率的概率值具有很好的線性關(guān)系;24h、36h、48h、60h的LC50值分別為16.01IU/L、4.11IU/L、1.56IU/L、0.44IU/L,計(jì)算24h、36h、48h、60h的LC95值分別為1133.70IU/L、263.55IU/L、101.95IU/L、95.17IU/L。結(jié)論:1.明確了中緬邊境地區(qū)的蚊蟲種群組成和密度,民房附近以庫蚊居多,其次是按蚊。不同調(diào)查點(diǎn)因自然環(huán)境各異,蚊屬組成有較大差異;山村環(huán)境的按蚊比例明顯高于城鎮(zhèn)環(huán)境。按蚊蚊種鑒定的結(jié)果提示,該區(qū)域按蚊種類繁多,以微小按蚊為最優(yōu)勢按蚊蚊種。2.分子生物學(xué)技術(shù)和生物信息學(xué)技術(shù)為準(zhǔn)確鑒定蚊種的一種有效方法,同時(shí)可作為傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定的有效補(bǔ)充。本研究利用核酸分子鑒定技術(shù),更為準(zhǔn)確地對中緬邊境地區(qū)按蚊蚊種進(jìn)行了鑒定。3.球形芽孢桿菌可作為防治中緬邊境地區(qū)中華按蚊的有效生物殺蟲劑,在實(shí)際使用中應(yīng)選擇合理劑量(本研究結(jié)果為Bs在當(dāng)?shù)氐暮侠響?yīng)用和正確選擇劑量提供了重要參考)。
【關(guān)鍵詞】：中緬邊境地區(qū) 蚊蟲種群調(diào)查 蚊種分子鑒定 球形芽孢桿菌 生物測定
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R184.31
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• ABSTRACT5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 中緬邊境地區(qū)蚊蟲種群調(diào)查13-19
• 實(shí)驗(yàn)材料13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-14
• 結(jié)果14-17
• 討論17-19
• 第三章 中緬邊境地區(qū)部分按蚊的蚊種分子鑒定19-27
• 實(shí)驗(yàn)材料19-20
• 實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 結(jié)果21-25
• 討論25-27
• 第四章 球形芽孢桿菌2362株對中緬邊境地區(qū)按蚊幼蟲殺傷效果的研究27-32
• 實(shí)驗(yàn)材料27-28
• 實(shí)驗(yàn)方法28
• 結(jié)果28-30
• 討論30-32
• 全文結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 文獻(xiàn)綜述一 分子生物學(xué)技術(shù)在按蚊近緣種鑒定的應(yīng)用進(jìn)展36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 文獻(xiàn)綜述二 植物驅(qū)蚊滅蚊的應(yīng)用研究進(jìn)展44-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間撰寫和發(fā)表文章52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 汪秀芳;薛淋淋;許開平;葉碎高;尤愛菊;;利用植物防制蚊蟲的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年34期

2 鄔奇峰;俞光榮;;植物源殺蟲劑資源及活性成分研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年19期

3 范建華;郭衛(wèi)真;郭衛(wèi)中;李鴻斌;;中緬邊境緬甸佤邦第二特區(qū)南部地區(qū)瘧疾爆發(fā)流行調(diào)查[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2008年01期

4 裴速建;李凱杰;張華勛;胡樂群;黃光全;劉井元;董小蓉;林文;;湖北省部分地區(qū)中華按蚊對殺蟲劑的抗藥性監(jiān)測[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2012年10期

5 馬素媛;王英;趙清;徐鐵龍;吳紅渠;艾國平;;Bti對三帶喙庫蚊的殺傷效果及溫度的影響[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2012年12期

6 周華云,高琪,顧政誠,朱國鼎,李菊林,曹俊;PCR-RFLP技術(shù)用于鑒別赫坎按蚊復(fù)合體近緣種按蚊的研究[J];中國血吸蟲病防治雜志;2004年05期

  本文關(guān)鍵詞：中緬邊境地區(qū)蚊蟲種群調(diào)查、分子鑒定及球形芽孢桿菌殺蟲效果檢測，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：333788