【摘要】： 【目的】 探討銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏抗性及其機(jī)制;探討銅綠假單胞菌抗生素耐藥與消毒劑抗性的關(guān)聯(lián)。 【方法】 1.實(shí)驗(yàn)方法 以銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC15442為實(shí)驗(yàn)菌進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn);以臨床收集銅綠假單胞菌為實(shí)驗(yàn)菌,進(jìn)行最小抑菌濃度MIC測(cè)定、最小殺菌濃度MBC測(cè)定、懸液定量殺滅試驗(yàn)與連續(xù)消毒試驗(yàn);運(yùn)用PCR與質(zhì)粒抽提檢測(cè)qacE-sul1基因。 2.統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS11.5,MIC值與MBC值結(jié)果進(jìn)行卡方檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn),懸液定量殺滅試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行重復(fù)測(cè)量方差分析。 【結(jié)果】 1.銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏的抗性 MIC值判定銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛抗性率為60%,對(duì)碘伏抗性率為20%;作用1min的MBC值判定銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛抗性率為41%,對(duì)碘伏抗性率為28%;400mg/L鄰苯二甲醛作用1min的殺滅對(duì)數(shù)值判定抗性率為60%,作用3min的殺滅對(duì)數(shù)值判定抗性率為34%;80mg/L碘伏作用1min的殺滅對(duì)數(shù)值判定抗性率為51%,作用3min的殺滅對(duì)數(shù)值判定抗性率為32%;并聯(lián)試驗(yàn)方法判定,銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛抗性率為89%,對(duì)碘伏抗性率為60%;串聯(lián)試驗(yàn)方法判定,銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛抗性率為10%,對(duì)碘伏抗性率為11%。 2.銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏抗性的變化趨勢(shì) 連續(xù)分離的銅綠假單胞菌隨著分離次數(shù)增多從沒有抗性到具有抗性,從對(duì)單一消毒劑抗性到對(duì)兩種消毒劑抗性,并且抗性逐漸增強(qiáng)。連續(xù)消毒的銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏的抗性均增強(qiáng)。 3.qacE-sul1基因檢測(cè) qacE-sul1基因陽(yáng)性率為19%,均存在于質(zhì)粒DNA上。PCR產(chǎn)物測(cè)序?yàn)?61bp,并在GenBank中注冊(cè)序列號(hào):FJ687220。鄰苯二甲醛與碘伏對(duì)qacE-sul1基因陽(yáng)性與陰性銅綠假單胞菌的殺滅效果沒有差別,抗性與非抗性銅綠假單胞菌的qacE-sul1基因陽(yáng)性率沒有差別。 4.銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏抗性與抗生素耐藥的關(guān)聯(lián) 鄰苯二甲醛與碘伏對(duì)抗生素耐藥與敏感銅綠假單胞菌的MIC值、MBC值與殺滅對(duì)數(shù)值沒有差別。 【結(jié)論】 銅綠假單胞菌對(duì)消毒劑抗性嚴(yán)重,對(duì)鄰苯二甲醛抗性的銅綠假單胞菌對(duì)碘伏未必具有抗性,反之亦然。銅綠假單胞菌消毒劑抗性的產(chǎn)生與低濃度消毒劑長(zhǎng)期使用有關(guān)。未觀察到銅綠假單胞菌qacE-sul1基因攜帶與鄰苯二甲醛與碘伏抗性之間的關(guān)聯(lián)。未觀察到銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏抗性與抗生素耐藥相關(guān)。
【圖文】：

M：分子量標(biāo)記；S：陽(yáng)性標(biāo)本；N：陰性對(duì)照?qǐng)D 1 qacE-sul1 基因 PCR 產(chǎn)物的電泳圖Figure 1 Electrophoresis map of PCR product for qacE-sul1 genePCR 產(chǎn)物電泳見圖 1。結(jié)果顯示：100 株銅綠假單胞菌中 qacE-sul1 基因者為 19 株，其余均為陰性，陽(yáng)性率為 19%。（二）基因測(cè)序與比對(duì)

M：分子量標(biāo)記；S：陽(yáng)性標(biāo)本；N：陰性對(duì)照?qǐng)D 1 qacE-sul1 基因 PCR 產(chǎn)物的電泳圖Figure 1 Electrophoresis map of PCR product for qacE-sul1 genePCR 產(chǎn)物電泳見圖 1。結(jié)果顯示：100 株銅綠假單胞菌中 qacE-sul1 基因陽(yáng)者為 19 株，，其余均為陰性，陽(yáng)性率為 19%。（二）基因測(cè)序與比對(duì)
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R187.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2575564