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過氧乙酸對鮑曼不動桿菌消毒滅菌作用的實驗研究

發(fā)布時間:2018-11-09 13:34
【摘要】: 目的 觀察消毒劑過氧乙酸(PAA)對鮑曼不動桿菌(A.baumannii)消毒后的活菌培養(yǎng)計數(shù),探討該消毒劑對A.baumannii的殺菌效果,同時過氧乙酸可能的殺菌機制。 材料和方法 采用實驗室貯存的鮑曼不動桿菌,將其制成菌懸液,先用細菌濃度比濁測定法粗測其含菌濃度,然后以稀釋液稀釋至1×10~8 cfu/ml-5×10~8cfu/ml。3%牛血清白蛋白組54株鮑曼不動桿菌,0.3%牛血清白蛋白組8株鮑曼不動桿菌。采用二元包裝過氧乙酸溶液,A液和B液以10:8(體積比)混勻,密閉放置24小時、48小時、72小時分別用碘量法測定其濃度,用無菌硬水配制過氧乙酸稀溶液。參照消毒技術(shù)規(guī)范進行中和劑鑒定實驗,選擇3g/l硫代硫酸鈉+10g/l吐溫-80作為中和劑。取消毒試驗用試管,先加入0.5ml鮑曼不動桿菌懸液,再加入0.5ml有機干擾物(0.3%牛血清白蛋白,3%牛血清白蛋白),置20℃±1℃水浴中5min后,用無菌吸管吸取過氧乙酸4.0ml注入其中,迅速混勻并立即計時,待作用至預定時間,用數(shù)字可調(diào)移液器吸取0.5ml上述混合液加入4.5ml經(jīng)滅菌的中和劑中,混勻作用10min后,吸取1.0ml樣液加于無菌培養(yǎng)皿中(每管樣液接種2個培養(yǎng)皿),將冷至40℃-45℃的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基15ml傾注于已加入樣液的培養(yǎng)皿中。待瓊脂凝固后,置37℃的溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時,計數(shù)菌落數(shù)。試驗分為3個過氧乙酸濃度組:0.005%(50mg/l),0.01%(100mg/l),,0.02%(200mg/l)以及5個作用時間(1min,3min,5min,15min,30min)。同時設(shè)立對照組:用稀釋液代替消毒液,進行平行試驗,作為陽性對照,所得結(jié)果代表菌液原有濃度,以作為計算殺滅對數(shù)的初始濃度。試驗均重復3次,計算各組的活菌濃度(cfu/ml)。 結(jié)果 1、過氧乙酸的含量:過氧乙酸A液和B液以10:8(體積比)混勻,密閉放置24小時、48小時、72小時后其含量分別為182g/l、194g/l、188g/l。 2、中和劑鑒定試驗:采用0.02%過氧乙酸和3%牛血清白蛋白,中和劑3g/l硫代硫酸鈉+10g/l吐溫-80,第1組無細菌,第2組菌落數(shù)158 cfu/ml,第3組菌落數(shù)56625000 cfu/ml,第4組菌落數(shù)57292000 cfu/ml,第5組菌落數(shù)60080000 cfu/ml,第6組無菌生長,第3、4、5組的組間菌落數(shù)誤差率為2.4%。 3、3%牛血清白蛋白作為有機干擾物的各試驗組的比較:三種濃度過氧乙酸殺菌效果有顯著差異(P0.01);0.005%過氧乙酸與0.01%過氧乙酸殺菌效果比較:0.01%過氧乙酸明顯增高(P0.01);0.005%過氧乙酸與0.02%過氧乙酸殺菌效果比較:0.02%過氧乙酸明顯增高(P0.01);0.01%過氧乙酸與0.02%過氧乙酸殺菌效果比較:0.02%過氧乙酸明顯增高(P0.01)。 4、0.3%牛血清白蛋白作為有機干擾物的各試驗組的比較:三種濃度過氧乙酸殺菌效果有顯著差異(P0.01);0.005%過氧乙酸與0.01%過氧乙酸殺菌效果比較無明顯差異(P0.05);0.02%過氧乙酸的殺菌效果明顯比0.005%過氧乙酸增高(P0.01);0.01%過氧乙酸與0.02%過氧乙酸殺菌效果比較:0.02%過氧乙酸明顯增高(P0.01)。 5、3%牛血清白蛋白和0.3%牛血清白蛋白有機干擾物作用下的殺菌效果的比較:0.005%過氧乙酸的殺菌效果,3%牛血清白蛋白組明顯低于0.3%牛血清白蛋白組(P0.01);0.01%過氧乙酸的殺菌效果,3%牛血清白蛋白組與0.3%牛血清白蛋白組無明顯差異(P0.05);0.02%過氧乙酸的殺菌效果,3%牛血清白蛋白組與0.3%牛血清白蛋白組比較無明顯差異(P0.05)。 結(jié)論 1、過氧乙酸濃度0.005%-0.02%范圍內(nèi),隨著濃度的提高,滅菌效果逐漸增高。 2、對醫(yī)院物品和器械進行消毒時選擇0.01%過氧乙酸作用5分鐘或0.02%過氧乙酸作用1分鐘可達到滿意滅菌效果;0.01%過氧乙酸作用10分鐘或0.02%過氧乙酸作用5分鐘可達到滅菌狀態(tài)。 3、有機干擾物(牛血清白蛋白)可影響低濃度(0.005%)過氧乙酸的殺菌效果,但對高濃度(0.01%,0.02%)過氧乙酸殺菌效果沒有明顯影響。 應(yīng)用所研究的消毒劑于臨床,評估對鮑曼不動桿菌的效果,以達到指導臨床工作,降低感染率、縮短病人平均住院天數(shù)、減少病人的費用,減少不動桿菌耐藥菌株在病人中的傳播,預防和控制暴發(fā)流行。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:浙江大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2008
【分類號】:R187

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本文編號:2320556

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