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不同鈦合金表面形貌對(duì)上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-10-06 17:49

  本文關(guān)鍵詞:不同鈦合金表面形貌對(duì)上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響


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【摘要】:目的:種植修復(fù)成功的關(guān)鍵不僅需要良好的骨結(jié)合,也依賴于種植體與周圍軟組織形成良好的生物學(xué)封閉。種植體頸部形貌是影響種植體周圍軟組織封閉的關(guān)鍵因素之一。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)比三種不同表面形貌的鈦合金試件對(duì)上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,尋找能夠增強(qiáng)上皮組織附著的表面形貌,以利于軟組織屏障的形成,為種植體頸部設(shè)計(jì)提供指導(dǎo)。 方法:本研究通過(guò)機(jī)械打磨拋光(M)、直流電解蝕刻(DC)、直流+交流電解蝕刻(DAC)等方法在鈦合金表面形成三種不同微形貌的表面;使用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)其表面粗糙度,使用掃描電子顯微鏡觀察表面形貌結(jié)構(gòu),以確保本次實(shí)驗(yàn)得到的表面結(jié)構(gòu)與前一階段實(shí)驗(yàn)基本一致。將最終得到的鈦合金試件與上皮細(xì)胞共培養(yǎng),通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞的黏附及增值情況,使用掃描電鏡觀察上皮細(xì)胞的形態(tài)。 結(jié)果:一、鈦合金試件表面處理結(jié)果如下:通過(guò)三種不同的處理方法,獲得了三種不同的表面結(jié)構(gòu)。掃描電子顯微鏡觀察,光滑表面(M組)試件表面35倍鏡下光滑平整,500倍、2000倍、10000倍鏡下可見(jiàn)微小的劃痕及凸起;微米表面(DC組)500倍鏡下可見(jiàn)試件表面具有均勻分布的孔凹結(jié)構(gòu),2000倍鏡下觀察到有直徑約3~6μm呈類圓形微米孔,呈火山口狀,10000倍鏡下觀察孔凹底部見(jiàn)起伏的納米級(jí)的溝壑及凸起,凸起高度約為50~100nm;微米-亞微米表面(DAC組)在500倍及2000倍電鏡下,可見(jiàn)約8~12μm的微米孔;在此結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,于微米孔的孔底部及間隔處,布滿了大小為300~600nm二級(jí)亞微米級(jí)孔。 二、測(cè)定細(xì)胞增殖結(jié)果如下: MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,各組的MTT吸光度值均呈時(shí)間依賴模式增長(zhǎng)。24h時(shí)M組吸光度值約為DC組及DAC組的2倍,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表示上皮細(xì)胞在M組表面初期粘附的細(xì)胞數(shù)量最多。而48h、72h、96h時(shí),M組OD值雖較DC組及DAC組略高,但3組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中,M組表面細(xì)胞的增長(zhǎng)速度最慢,48h、72h、96h分別是24h時(shí)的1.4倍、2.4倍、3.3倍,而DC組表面細(xì)胞的增長(zhǎng)速度最快,48h、72h、96h的細(xì)胞數(shù)量分別是24h時(shí)的2.6倍、4.5倍及6.4倍。 三、觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)果如下:細(xì)胞培養(yǎng)24h后,M組上的上皮細(xì)胞較為膨隆,伸展較差,細(xì)胞形態(tài)呈半球形?梢(jiàn)細(xì)胞向周圍伸出大量細(xì)小的微絨毛。DC組表面的上皮細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,體部伸展良好,伸出粗壯的偽足,細(xì)胞通過(guò)偽足附著于微米孔內(nèi)。20000倍鏡下觀察上皮細(xì)胞的偽足能夠越過(guò)微米孔間隔,與周圍細(xì)胞相互連接。DAC組表面上皮細(xì)胞與DC組形態(tài)相似,細(xì)胞同樣充分伸展,可見(jiàn)細(xì)胞伸出的偽足伸向二級(jí)孔。 細(xì)胞培養(yǎng)72h后,M組表面的上皮細(xì)胞更加伸展,直徑約12~14μm,呈多邊形,細(xì)胞形態(tài)從半球形轉(zhuǎn)換為伸展的扁平狀,與試件表面廣泛接觸。與24h時(shí)相比,上皮細(xì)胞伸出的微絨毛略粗,且細(xì)胞之間互相連接呈片。DC組表面上皮細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,類似星形,細(xì)胞體部直徑約6~8μm,伸展程度較M組差,但是細(xì)胞向各個(gè)方向均伸出粗壯的偽足樣結(jié)構(gòu),20000倍鏡下觀察,可見(jiàn)細(xì)胞向微米孔底部伸出偽足樣的結(jié)構(gòu),并可見(jiàn)偽足結(jié)構(gòu)上伸出的微絨毛,緊密附著于試件表面。DAC組表面的上皮細(xì)胞,與DC組形態(tài)相似,細(xì)胞呈不規(guī)則星形,并向個(gè)方向伸出粗大的偽足。試件表面被細(xì)胞及基質(zhì)覆蓋,20000倍鏡下可見(jiàn)伸展的偽足樣結(jié)構(gòu)深入到亞微米結(jié)構(gòu)中。 結(jié)論:鈦合金表面通過(guò)直流電解蝕刻法形成的微米孔表面及直流+交流電解蝕刻法形成的微米-亞微米雙極孔表面,,均能夠促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖,上皮細(xì)胞與之能均形成牢固的粘附形式,可為種植體頸部的設(shè)計(jì)提供參考。
【關(guān)鍵詞】:鈦合金 電解蝕刻 上皮組織 種植體
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R783.6
【目錄】:
  • 致謝一4-5
  • 內(nèi)容摘要5-8
  • ABSTRACT8-13
  • 英文縮略詞13-14
  • 第1章 前言14-19
  • 1.1 牙齦上皮細(xì)胞與種植體表面結(jié)合機(jī)制14-15
  • 1.1.1 種植體周圍上皮組織的組織學(xué)結(jié)構(gòu)14-15
  • 1.1.2 上皮組織與種植體界面的形成過(guò)程15
  • 1.2 影響上皮細(xì)胞與種植體頸部表面附著的因素15-17
  • 1.2.1 種植體表面粗糙程度對(duì)上皮組織附著的影響15-16
  • 1.2.2 鈦種植體表面微觀形貌對(duì)上皮組織附著的影響16-17
  • 1.2.3 其他影響因素17
  • 1.3 本文研究?jī)?nèi)容及研究方法17-19
  • 1.3.1 研究?jī)?nèi)容17-18
  • 1.3.2 研究目的及意義18-19
  • 第2章 不同鈦合金表面形貌的制備與觀察19-26
  • 2.1 材料及方法19-21
  • 2.1.1 材料19
  • 2.1.2 方法19-21
  • 2.2 結(jié)果21-23
  • 2.2.1 不同鈦合金試件表面的粗糙度值21
  • 2.2.2 不同鈦合金試件表面微觀形貌21-23
  • 2.3 討論23-24
  • 2.4 結(jié)論24-26
  • 第3章 不同鈦合金表面形貌對(duì)上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響26-36
  • 3.1 材料與方法26-28
  • 3.1.1 主要試劑和材料26
  • 3.1.2 表皮細(xì)胞的復(fù)蘇和培養(yǎng)26-27
  • 3.1.3 表皮細(xì)胞在不同鈦合金表面的增殖27-28
  • 3.1.4 表皮細(xì)胞在不同鈦合金表面上的形態(tài)觀察28
  • 3.2 結(jié)果28-33
  • 3.2.1 上皮細(xì)胞的培養(yǎng)結(jié)果28-29
  • 3.2.2 表皮細(xì)胞在不同鈦合金表面的增殖結(jié)果(MTT 比色實(shí)驗(yàn))29-30
  • 3.2.3 上皮細(xì)胞在不同鈦合金表面上的形態(tài)觀察30-33
  • 3.3 討論33-35
  • 3.4 結(jié)論35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果40-41
  • 致謝二41-42

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 李英,彭玉田,汪大林,周中華,孫麗君,徐曉剛;牙齦結(jié)合上皮對(duì)鑄造鈦種植體附著狀況的超微結(jié)構(gòu)研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年05期

2 李家奇;孟維艷;周延民;蔡青;阿蘭;付麗;李保勝;王世振;;不同表面形貌的純鈦種植體對(duì)牙齦軟組織界面影響的掃描電鏡觀察[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

3 蔡青;孟維艷;周延民;趙靜輝;王世振;張賓;王聞天;李家奇;;正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化電化學(xué)浸蝕形成鈦合金表面微結(jié)構(gòu)工藝[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2012年08期

4 趙嘉惠;張華屏;王春芳;;MTT法在檢測(cè)細(xì)胞增殖方面的探討[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年03期

5 王聞天;孟維艷;周延民;蔡青;王淑艷;王晶晶;劉童斌;;不同鈦合金表面形貌對(duì)成纖維細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期



本文編號(hào):984168

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