本文關(guān)鍵詞：缺氧條件下口腔黏膜上皮間質(zhì)化機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 缺氧 口腔黏膜上皮 HIF-1α miR-92a EMT E-cadherin Vimentin

【摘要】：目的通過低壓氧艙法模擬海拔7000m Wistar雌性大鼠低壓缺氧損傷模型,以探究低壓缺氧損傷通過乏氧調(diào)節(jié)的HIF依賴途徑的mi R-92a對上皮組織上皮間質(zhì)化進(jìn)程的影響,達(dá)到是否可以通過阻斷上皮間質(zhì)化進(jìn)程,降低上皮源性惡性腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移、纖維化疾病發(fā)生發(fā)展的目的。方法1采用低壓氧艙法模擬大鼠低壓缺氧損傷模型,通過中性蛋白酶DispaseⅡ冷消化法分離口腔黏膜上皮組織。2利用實(shí)時熒光定量PCR(q PCR)法檢測不同低壓缺氧損傷時間處理后的口腔黏膜上皮組織中乏氧調(diào)節(jié)的mi R-92a的表達(dá)差異。3利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測不同低壓缺氧損傷時間處理后的口腔黏膜上皮組織中上皮間質(zhì)化標(biāo)志性基因E-cadherin、Vimentin和HIF-1α的表達(dá)水平。4利用Western Blot法檢測不同低壓缺氧損傷時間處理后口腔黏膜上皮組織中上皮間質(zhì)化標(biāo)志性蛋白E-cadherin、Vimentin和HIF-1α蛋白表達(dá)水平。5利用HE染色法觀察不同低壓缺氧損傷時間處理后的口腔黏膜上皮組織的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果1 DispaseⅡ冷消化分離口腔黏膜上皮組織,基底層細(xì)胞完整。2 q PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果:低壓缺氧損傷處理后,低壓缺氧損傷12h、24h組與空白對照組相比,mi R-92a表達(dá)降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果:低壓缺氧損傷處理后,低壓缺氧損傷12h、24h組與空白對照組相比,基因HIF-1α、Vimentin表達(dá)升高,基因E-cadherin表達(dá)降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4 Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果:低壓缺氧損傷處理后,低壓缺氧損傷12h、24h組與空白對照組相比,蛋白HIF-1α、Vimentin表達(dá)升高,蛋白E-cadherin表達(dá)降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5 HE染色結(jié)果:低壓缺氧損傷處理后,口腔黏膜上皮組織細(xì)胞形態(tài)未見明顯異常,基底層和棘層細(xì)胞未見有絲分裂象。結(jié)論低壓缺氧損傷上調(diào)HIF-1α表達(dá),進(jìn)而下調(diào)miR-92a表達(dá),促進(jìn)上皮間質(zhì)化進(jìn)程,為降低上皮源性惡性腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移及纖維化疾病的發(fā)生發(fā)展提供新思路。
【關(guān)鍵詞】：缺氧 口腔黏膜上皮 HIF-1α miR-92a EMT E-cadherin Vimentin
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 第1章 缺氧條件下口腔黏膜上皮間質(zhì)化機(jī)制研究11-50
• 1.1 材料與方法11-28
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料11-15
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-28
• 1.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28
• 1.2 結(jié)果28-35
• 1.2.1 Wistar大鼠行為變化28-29
• 1.2.2 Dispase Ⅱ冷消化分離口腔黏膜上皮組織29
• 1.2.3 缺氧后口腔黏膜上皮組織基因miR-92a表達(dá)下調(diào)29-31
• 1.2.4 缺氧后口腔黏膜上皮組織中基因HIF-1α及上皮間質(zhì)化標(biāo)志性基因表達(dá)變化31-33
• 1.2.5 低壓缺氧損傷后口腔黏膜上皮組織中HIF-1α及上皮間質(zhì)化標(biāo)志性蛋白表達(dá)變化33-34
• 1.2.6 HE組織切片染色34-35
• 1.3 討論35-43
• 1.3.1 缺氧模型的選擇與制作35-36
• 1.3.2 miRNAs對上皮間質(zhì)化的調(diào)控36-38
• 1.3.3 miR-92a的研究38-40
• 1.3.4 低氧誘導(dǎo)因子與miR-92a及上皮間質(zhì)化的調(diào)控40-43
• 1.4 結(jié)論43
• 參考文獻(xiàn)43-50
• 第2章 綜述50-59
• 2.1 E-cadherin分子結(jié)構(gòu)與生物學(xué)特性50
• 2.2 E-cadherin與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的早期研究50-51
• 2.3 E-cadherin與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的研究51-54
• 2.3.1 E-cadherin在非小細(xì)胞肺癌中的研究51
• 2.3.2 E-cadherin在胃癌中的研究51
• 2.3.3 E-cadherin在肝癌中的研究51-52
• 2.3.4 E-cadherin在食管癌中的研究52
• 2.3.5 E-cadherin在卵巢癌中的研究52-53
• 2.3.6 E-cadherin在乳腺癌中的研究53-54
• 2.4 小結(jié)54
• 2.5 展望54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 結(jié)論59-60
• 致謝60-61
• 導(dǎo)師簡介61-62
• 作者簡介62-63
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集63

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本文編號：969448