本文關(guān)鍵詞：MT01抑制牙周炎患者自身組織核酸刺激RAW264.7內(nèi)破骨相關(guān)因子mRNA的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 特定序列寡核苷酸MT01 牙周炎患者自身組織核酸 損傷相關(guān) 模式分子 破骨相關(guān)因子 RAW264.7

【摘要】：牙周炎是一種由于局部免疫失衡導(dǎo)致的牙周組織破壞性疾病，疾病的進(jìn)展和嚴(yán)重程度與宿主自身的免疫性炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。在牙周疾病免疫炎癥反應(yīng)過程中，牙周自身組織核酸不僅參與牙周疾病的發(fā)展，而且有可能成為牙周炎發(fā)生機(jī)制的關(guān)鍵因素并起到調(diào)控作用。自身組織來源的核酸分子屬于核酸類損傷相關(guān)模式分子(damage-associated molecular patterns molecules,DAMPs)，是“內(nèi)源性危險信號”(endogenous danger signal)。研究證實，核酸類DAMPs能啟動以產(chǎn)生大量炎性細(xì)胞因子為特征的固有免疫反應(yīng)。對機(jī)體而言，這類固有免疫應(yīng)答反應(yīng)是“雙刃劍”，既可快速有效的控制細(xì)菌感染，又可在過度激活的狀態(tài)下引起炎癥性病理損傷，這種炎癥性病理損傷在牙周疾病中主要表現(xiàn)為炎性牙槽骨吸收。整合以上研究線索，我們推論，在牙周疾病的發(fā)展中，牙周炎患者自身組織核酸可能作為一類DAMPs，通過過度激活牙周局部固有免疫應(yīng)答反應(yīng)，引發(fā)炎性牙槽骨吸收。 為證實這一推論，首先，本研究采用慢性牙周炎患者自身組織核酸刺激小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7，檢測細(xì)胞內(nèi)破骨相關(guān)因子mRNA表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)炎性牙周組織核酸可促進(jìn)破骨細(xì)胞活化，說明，牙周炎患者自身組織核酸可能通過對破骨相關(guān)因子基因表達(dá)水平的上調(diào)，參與牙周局部固有免疫應(yīng)答反應(yīng)，，導(dǎo)致牙槽骨吸收。 其次，我們選用免疫抑制劑MT01（一種依據(jù)人線粒體DNA序列設(shè)計的單鏈寡脫氧核苷酸），對牙周炎患者自身組織核酸刺激小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者自身組織核酸對破骨細(xì)胞活化的激活受免疫抑制劑的抑制，進(jìn)一步證實，牙周炎患者自身組織核酸可能作為一類DAMPs參與牙周炎的發(fā)生，導(dǎo)致炎性牙槽骨吸收。 方法采集翻瓣術(shù)中慢性牙周炎患者炎癥牙周組織以及正畸患者健康牙拔除術(shù)獲取的健康牙周組織，提取組織總RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA。培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7，加入質(zhì)量濃度1μg mL-1的特定序列寡核苷酸MT01共孵育3h后（以1μg mL-1的PBS作為對照），加入已提取的炎癥牙周組織及健康牙周組織cDNA（質(zhì)量濃度為1μg mL-1）。實驗分4組：健康組織cDNA，炎癥組織cDNA，MT01+健康組織cDNA，MT01+炎癥組織cDNA。4組細(xì)胞分別孵育3、6、12、24小時，采用熒光實時定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測破骨相關(guān)因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-α mRNA的表達(dá)，進(jìn)行兩兩組間比較。 結(jié)果牙周炎患者自身組織核酸可上調(diào)RAW264.7內(nèi)破骨相關(guān)因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-αmRNA的表達(dá)；在免疫抑制劑MT01的作用下，牙周炎患者自身組織核酸對RAW264.7內(nèi)破骨相關(guān)因子mRNA的表達(dá)受到抑制。 結(jié)論牙周炎患者自身組織核酸對破骨細(xì)胞活化的激活作用可能是其作為牙周局部組織內(nèi)DAMPs的依據(jù)；免疫抑制劑MT01對牙周炎患者自身組織核酸刺激RAW264.7內(nèi)破骨相關(guān)因子mRNA表達(dá)的抑制作用，可以提示，牙周炎患者自身組織核酸可能參與牙周局部免疫應(yīng)答反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：特定序列寡核苷酸MT01 牙周炎患者自身組織核酸 損傷相關(guān) 模式分子 破骨相關(guān)因子 RAW264.7
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R781.42
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• abstract7-13
• 英文縮略詞表13-14
• 第1章 緒論14-17
• 第2章 文獻(xiàn)綜述17-21
• 2.1 DAMPS 與牙周炎癥免疫應(yīng)答關(guān)系的研究進(jìn)展17-19
• 2.2 MT01 在牙周炎癥免疫應(yīng)答的中作用的相關(guān)研究進(jìn)展19-21
• 2.2.1 MT01 概述19-20
• 2.2.2 MT01 在牙周炎癥免疫應(yīng)答的中作用20-21
• 第3章 實驗研究21-31
• 3.1 實驗儀器和試劑21-22
• 3.1.1 主要材料和試劑21
• 3.1.2 主要儀器和設(shè)備21-22
• 3.1.3 試劑配制22
• 3.2 選擇研究對象22-24
• 3.2.1 慢性牙周炎的納入標(biāo)準(zhǔn)與研究對象23
• 3.2.2 健康組納入標(biāo)準(zhǔn)與研究對象23-24
• 3.2.3 排除標(biāo)準(zhǔn)24
• 3.3 牙周檢查24-25
• 3.4 收集牙周標(biāo)本并提取組織 RNA 及逆轉(zhuǎn)錄成 CDNA25-27
• 3.4.1 提取牙周組織 RNA：26-27
• 3.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（RT）：27
• 3.5 小鼠單核/巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)27-28
• 3.6 實驗分組28
• 3.7 提取細(xì)胞總 RNA 及逆轉(zhuǎn)錄成 CDNA28-29
• 3.7.1 提取細(xì)胞總 RNA28-29
• 3.7.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（RT）：方法同前29
• 3.8 實時定量 PCR 檢測破骨相關(guān)因子的表達(dá)29-30
• 3.9 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計學(xué)分析30-31
• 第4章 實驗結(jié)果31-35
• 4.1 無 MT01 干預(yù)狀態(tài)下，牙周炎患者自身組織核酸可上調(diào) RAW264.7 內(nèi)破骨相關(guān)因子 MRNA 的表達(dá)31-32
• 4.2 MT01 可抑制牙周炎患者自身組織核酸刺激 RAW 264.7 內(nèi)破骨相關(guān)因子 MRNA 的表達(dá)32-33
• 4.3 在牙周炎患者組內(nèi)，MT01 同樣抑制自身組織核酸對 RAW264.7 內(nèi)破骨相關(guān)因子 MRNA 的表達(dá)33-35
• 第5章 討論35-39
• 5.1 破骨細(xì)胞及破骨相關(guān)因子的概論35-36
• 5.2 MT01 對牙周炎患者自身組織核酸對破骨細(xì)胞活化調(diào)控的影響36-39
• 第6章 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 附錄45-47
• 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果47-49
• 致謝49

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 叢林;夏志寬;楊蓉婭;;補(bǔ)體對RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞吞噬阿薩希毛孢子菌的增強(qiáng)作用[J];實用皮膚病學(xué)雜志;2013年04期

2 張英林;楊巍;孫際童;牛坤偉;付海英;;轉(zhuǎn)錄因子Foxp3對RAW264.7細(xì)胞表型及免疫抑制相關(guān)基因的影響[J];中國實驗診斷學(xué);2013年12期

3 馮友梅;陳慶;周潔;陳娟;曾和松;;瘦素對RAW264.7細(xì)胞腫瘤壞死因子α表達(dá)的影響(英文)[J];中國臨床康復(fù);2006年36期

4 胡亞娥;茅家慧;劉霞;施海燕;朱燕;周愛玲;;氧化苦參堿對脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞一氧化氮及其誘導(dǎo)型合酶表達(dá)的影響[J];南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年03期

5 韓莎莎;李俊峽;;不同濃度超順磁性氧化鐵納米粒子對小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞的影響[J];中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

6 潘慶軍;朱學(xué)芝;劉淵;;水合氯醛誘發(fā)RAW264.7巨噬細(xì)胞凋亡及其機(jī)制[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2014年02期

7 王春;許燦新;嚴(yán)鵬科;陳琳玲;李凱;廖端芳;;巨噬細(xì)胞集落刺激因子對RAW264.7細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶9分泌的影響[J];中國動脈硬化雜志;2006年02期

8 李浩;殷瑛;董大勇;張軍;付玲;任軍;徐俊杰;陳薇;;結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白EspB在RAW264.7細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)[J];微生物學(xué)報;2011年07期

9 方瑤;毛旭虎;;小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的培養(yǎng)技巧及經(jīng)驗總結(jié)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年22期

10 張鵬宇;王世瑤;霍德勝;徐桂月;張學(xué)軍;柳忠輝;;激活素A對RAW264.7巨噬細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)作用[J];免疫學(xué)雜志;2006年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊江濤;董曉芳;佟建明;劉晴雪;張琪;吳瑩瑩;;苜草素多糖、黃酮和皂苷對小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7β-防御素基因表達(dá)的影響[A];第六次全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

2 王艷;鄭群;王一松;朱俊萍;曹寧;平國玲;張力平;;鏈球菌蛋白對RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)作用[A];2008年中國微生物學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2008年

3 覃麗;胡蓉;姚海倫;凌紅艷;廖端芳;;wnt5a對荷脂巨噬細(xì)胞RAW264.7中膽固醇蓄積的影響及相關(guān)機(jī)制[A];傳承與發(fā)展，創(chuàng)湖南省生理科學(xué)事業(yè)的新高——湖南省生理科學(xué)會2011年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2011年

4 趙國陽;徐又佳;;鐵調(diào)素對小鼠單核細(xì)胞RAW264.7向破骨細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

5 周江睿;黃俊龍;蔣春雷;;神經(jīng)肽Y對RAW264.7細(xì)胞腫瘤壞死因子α產(chǎn)生的影響及其可能機(jī)制[A];2008年神經(jīng)內(nèi)分泌暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2008年

6 周壽紅;劉立英;陳庚容;唐密密;楊旭紅;;對氧磷對RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞ABCA1mRNA表達(dá)和膽固醇流出的影響[A];湖南省生理科學(xué)會2008年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2008年

7 趙國陽;徐又佳;;鐵調(diào)素對小鼠單核細(xì)胞RAW264.7向破骨細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第五次中青年骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

8 蘇子杰;鐘舒紅;尹丹;崔月明;韋英益;胡庭俊;;山豆根多糖對PCV-2誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞線粒體氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會中獸醫(yī)學(xué)分會2013年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

9 陳旭林;郭峰;王飛;王永杰;;不同濃度的LPS對RAW264.7巨噬細(xì)胞血管緊張素Ⅱ1型受體表達(dá)的影響[A];第七屆全國創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

10 謝志忠;田s

本文編號：955425