發(fā)布時間：2017-09-30 01:18

  本文關(guān)鍵詞：4種提取口腔產(chǎn)黑色素細(xì)菌DNA方法的比較

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【摘要】：目的比較4種提取口腔產(chǎn)黑色素細(xì)菌中間普氏菌DNA的方法,即酚-氯仿法、溴化十六烷基三甲銨(CTAB)提取法、Chelex-100提取法及試劑盒。方法分別記錄OD260、OD230、OD280及OD340值;聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)電泳,檢測提取DNA的濃度、純度及對PCR反映體系的影響。結(jié)果試劑盒及CTAB法去除黑色素比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),兩者與酚-氯仿及Chelex-100法比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);CTAB法提取DNA的濃度及純度的效果要優(yōu)于試劑盒,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),PCR電泳條帶清晰,無拖帶。結(jié)論 CTAB法可有效去除黑色素及其他雜質(zhì),同時獲得較高濃度的DNA樣品;黑色素并不溶于氯仿/異戊醇混合液,對PCR反應(yīng)體系有很大影響。
【作者單位】： 天津市南開醫(yī)院口腔科;天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院口腔科;
【關(guān)鍵詞】： DNA提取 黑色素 聚合酶鏈反應(yīng) 電泳 OD值
【分類號】：R781
【正文快照】： 口腔致病菌總量較少,取得的微量樣本常需聚合酶連反應(yīng)(PCR)擴增后再行后續(xù)實驗,提取樣品中的各類雜質(zhì)對電泳及PCR有較大的影響[1]。以往對提取方法的評價主要集中在多糖、蛋白質(zhì)及鹽類等雜質(zhì)的去除上,很少有研究評價去除菌體內(nèi)部的黑色素,而黑色素對PCR及電泳結(jié)果也會產(chǎn)生很大

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1 王q，

本文編號：945319