本文關(guān)鍵詞：漸進(jìn)性咬合紊亂導(dǎo)致大鼠TMJ-OA髁突軟骨中Ihh及其受體表達(dá)變化的研究

  更多相關(guān)文章： 軟骨 顳下頜關(guān)節(jié) 骨關(guān)節(jié)炎 印度刺猬基因

【摘要】：顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病(Temporomandibular Disorders,TMD)是口腔頜面部的常見病和多發(fā)病,顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎(TMJ osteoarthritis,TMJ-OA)是顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的重癥表現(xiàn)形式。對(duì)于TMJ-OA的發(fā)病機(jī)制目前認(rèn)識(shí)尚不清楚,有研究表明關(guān)節(jié)區(qū)異常力學(xué)的改變可能是TMJ-OA的致病因素之一,咬合異常引起關(guān)節(jié)受力發(fā)生變化,進(jìn)而引起力敏感的相關(guān)因子的表達(dá)發(fā)生變化。印度刺猬基因(Indian Hedgehog,Ihh)是一個(gè)與力相關(guān)的基因,當(dāng)力發(fā)生改變時(shí),Ihh基因就會(huì)隨之發(fā)生改變。因此本研究建立了SD大鼠的TMJ-OA動(dòng)物模型,通過HE染色確定了SD大鼠的TMJ-OA動(dòng)物模型的髁突軟骨的病理特征,通過免疫組化染色和實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)從蛋白和基因水平檢測(cè)Ihh,Smo和Ptc1的表達(dá)變化特征,以期為進(jìn)一步研究TMJ-OA的提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)方法:選擇本校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心24只8周齡雌性SD大鼠,隨機(jī)平均分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組大鼠右下及左上第一磨牙與第二磨牙之間;第二磨牙與第三磨牙之間分別分牙,對(duì)照組大鼠與實(shí)驗(yàn)組大鼠在相同環(huán)境下飼養(yǎng),模擬分牙處理。當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到20周和24周時(shí),處死SD大鼠(實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各6只),取材。左側(cè)髁突組織塊常規(guī)固定,脫鈣,脫水,石蠟包埋,近遠(yuǎn)中方向縱行切片,進(jìn)行HE和免疫組化染色。右側(cè)髁突軟骨組織提取總RNA并用Real-Time PCR方法檢測(cè)Ihh、Smo和Ptc1的m RNA表達(dá)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.HE染色結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)組髁突軟骨20周時(shí)出現(xiàn)明顯的TMJ-OA樣改變,主要表現(xiàn)為髁突軟骨細(xì)胞排列不整齊、細(xì)胞層不清、顯微骨裂、出現(xiàn)無細(xì)胞區(qū)和釘突樣結(jié)構(gòu),在第24周時(shí)這些病變有所改善。2.免疫組化染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,第20周時(shí)實(shí)驗(yàn)組的Smo蛋白水平表達(dá)顯著升高(P0.05);第24周時(shí)Ihh的實(shí)驗(yàn)組蛋白表達(dá)水平顯著升高(P0.05);其余各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.Real-Time PCR檢測(cè)結(jié)果表明,Ihh和Smo在20周時(shí),實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(P0.05);Ihh在24周時(shí),實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05),其余三組基因水平表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:1.通過正畸皮圈分牙移動(dòng)SD大鼠磨牙的方法成功建立了漸進(jìn)性咬合紊亂動(dòng)物模型。2.顳下頜關(guān)節(jié)漸進(jìn)性咬合紊亂所致的軟骨異常改建促進(jìn)了Ihh和Smo基因的高表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：軟骨 顳下頜關(guān)節(jié) 骨關(guān)節(jié)炎 印度刺猬基因
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R782.6
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 文獻(xiàn)回顧12-23
• 1. 顳下頜關(guān)節(jié)與生物力12-14
• 1.1 顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨12-13
• 1.2 髁突軟骨與生物力13-14
• 2. 顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病14-18
• 2.1 顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病與異常咬合15-16
• 2.2 顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)方法16-18
• 3. Hh信號(hào)通路18-23
• 3.1 Ihh與軟骨細(xì)胞的增殖分化20-21
• 3.2 Ihh與TMJ生物力學(xué)21-23
• 第一部分 建立SD大鼠TMJ-OA動(dòng)物模型23-32
• 1 材料24
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組24
• 2 方法24-26
• 2.1 建立SD大鼠TMJ-OA動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)的操作方法24-25
• 2.2 大體觀察25
• 2.3 蘇木精-伊紅（HE）染色25-26
• 2.4 統(tǒng)計(jì)方法26
• 3 結(jié)果26-29
• 3.1 大體觀察結(jié)果26-27
• 3.2 蘇木精-伊紅（HE）染色結(jié)果27-29
• 3.3 髁突全層軟骨厚度微觀測(cè)量結(jié)果29
• 4 討論29-31
• 5 結(jié)論31-32
• 第二部分 蛋白及基因水平檢測(cè)Ihh及受體在TMJ-OA髁突組織的變化32-45
• 1 材料32-33
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組32-33
• 2 方法33-36
• 2.1 SD大鼠TMJ-OA動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)的操作方法33
• 2.2 免疫組化染色33-34
• 2.3 Real Time-PCR檢測(cè)34-36
• 2.4 統(tǒng)計(jì)方法36
• 3 結(jié)果36-43
• 3.1 Ihh蛋白水平的表達(dá)36-37
• 3.2 Smo蛋白水平的表達(dá)37
• 3.3 Ptc1蛋白水平的表達(dá)37
• 3.4 Ihh mRNA水平的表達(dá)37
• 3.5 Smo mRNA水平的表達(dá)37
• 3.6 Ptc1 mRNA水平的表達(dá)37-43
• 4 討論43-44
• 5 結(jié)論44-45
• 小結(jié)45-46
• 參考文獻(xiàn)46-59
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果59-60
• 致謝60

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本文編號(hào)：943071