發(fā)布時間：2017-09-29 16:26

  本文關鍵詞：漸進性咬合紊亂導致大鼠TMJ-OA髁突軟骨中Ihh及其受體表達變化的研究

  更多相關文章： 軟骨 顳下頜關節(jié) 骨關節(jié)炎 印度刺猬基因

【摘要】：顳下頜關節(jié)紊亂病(Temporomandibular Disorders,TMD)是口腔頜面部的常見病和多發(fā)病,顳下頜關節(jié)骨關節(jié)炎(TMJ osteoarthritis,TMJ-OA)是顳下頜關節(jié)紊亂病的重癥表現(xiàn)形式。對于TMJ-OA的發(fā)病機制目前認識尚不清楚,有研究表明關節(jié)區(qū)異常力學的改變可能是TMJ-OA的致病因素之一,咬合異常引起關節(jié)受力發(fā)生變化,進而引起力敏感的相關因子的表達發(fā)生變化。印度刺猬基因(Indian Hedgehog,Ihh)是一個與力相關的基因,當力發(fā)生改變時,Ihh基因就會隨之發(fā)生改變。因此本研究建立了SD大鼠的TMJ-OA動物模型,通過HE染色確定了SD大鼠的TMJ-OA動物模型的髁突軟骨的病理特征,通過免疫組化染色和實時聚合酶鏈式反應從蛋白和基因水平檢測Ihh,Smo和Ptc1的表達變化特征,以期為進一步研究TMJ-OA的提供實驗基礎。實驗方法:選擇本校動物實驗中心24只8周齡雌性SD大鼠,隨機平均分為實驗組和對照組。實驗組大鼠右下及左上第一磨牙與第二磨牙之間;第二磨牙與第三磨牙之間分別分牙,對照組大鼠與實驗組大鼠在相同環(huán)境下飼養(yǎng),模擬分牙處理。當實驗進行到20周和24周時,處死SD大鼠(實驗組與對照組各6只),取材。左側髁突組織塊常規(guī)固定,脫鈣,脫水,石蠟包埋,近遠中方向縱行切片,進行HE和免疫組化染色。右側髁突軟骨組織提取總RNA并用Real-Time PCR方法檢測Ihh、Smo和Ptc1的m RNA表達變化。實驗結果:1.HE染色結果表明,實驗組髁突軟骨20周時出現(xiàn)明顯的TMJ-OA樣改變,主要表現(xiàn)為髁突軟骨細胞排列不整齊、細胞層不清、顯微骨裂、出現(xiàn)無細胞區(qū)和釘突樣結構,在第24周時這些病變有所改善。2.免疫組化染色結果顯示,與對照組相比,第20周時實驗組的Smo蛋白水平表達顯著升高(P0.05);第24周時Ihh的實驗組蛋白表達水平顯著升高(P0.05);其余各組間差異無統(tǒng)計學意義。3.Real-Time PCR檢測結果表明,Ihh和Smo在20周時,實驗組的表達均顯著高于對照組(P0.05);Ihh在24周時,實驗組的表達明顯高于對照組(P0.05),其余三組基因水平表達在實驗組與對照組之間沒有統(tǒng)計學差異。實驗結論:1.通過正畸皮圈分牙移動SD大鼠磨牙的方法成功建立了漸進性咬合紊亂動物模型。2.顳下頜關節(jié)漸進性咬合紊亂所致的軟骨異常改建促進了Ihh和Smo基因的高表達。
【關鍵詞】：軟骨 顳下頜關節(jié) 骨關節(jié)炎 印度刺猬基因
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R782.6
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 文獻回顧12-23
• 1. 顳下頜關節(jié)與生物力12-14
• 1.1 顳下頜關節(jié)髁突軟骨12-13
• 1.2 髁突軟骨與生物力13-14
• 2. 顳下頜關節(jié)紊亂病14-18
• 2.1 顳下頜關節(jié)紊亂病與異常咬合15-16
• 2.2 顳下頜關節(jié)骨關節(jié)炎的實驗方法16-18
• 3. Hh信號通路18-23
• 3.1 Ihh與軟骨細胞的增殖分化20-21
• 3.2 Ihh與TMJ生物力學21-23
• 第一部分 建立SD大鼠TMJ-OA動物模型23-32
• 1 材料24
• 1.1 實驗動物的選擇與分組24
• 2 方法24-26
• 2.1 建立SD大鼠TMJ-OA動物模型實驗的操作方法24-25
• 2.2 大體觀察25
• 2.3 蘇木精-伊紅（HE）染色25-26
• 2.4 統(tǒng)計方法26
• 3 結果26-29
• 3.1 大體觀察結果26-27
• 3.2 蘇木精-伊紅（HE）染色結果27-29
• 3.3 髁突全層軟骨厚度微觀測量結果29
• 4 討論29-31
• 5 結論31-32
• 第二部分 蛋白及基因水平檢測Ihh及受體在TMJ-OA髁突組織的變化32-45
• 1 材料32-33
• 1.1 實驗動物的選擇與分組32-33
• 2 方法33-36
• 2.1 SD大鼠TMJ-OA動物模型實驗的操作方法33
• 2.2 免疫組化染色33-34
• 2.3 Real Time-PCR檢測34-36
• 2.4 統(tǒng)計方法36
• 3 結果36-43
• 3.1 Ihh蛋白水平的表達36-37
• 3.2 Smo蛋白水平的表達37
• 3.3 Ptc1蛋白水平的表達37
• 3.4 Ihh mRNA水平的表達37
• 3.5 Smo mRNA水平的表達37
• 3.6 Ptc1 mRNA水平的表達37-43
• 4 討論43-44
• 5 結論44-45
• 小結45-46
• 參考文獻46-59
• 個人簡歷和研究成果59-60
• 致謝60

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本文編號：943071