本文關鍵詞：茄尼醇對大鼠實驗性牙周炎抗炎抗氧化作用研究

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【摘要】：[目的]通過建立體內外炎癥模型探討茄尼醇對大鼠實驗性牙周炎抗炎抗氧化作用研究。[方法]1.體內實驗：126只健康雄性SD大鼠隨機分為正常組(N組,18只),牙周炎建模組108只。通過雙側上頜第二磨牙絲線結扎配合黏性高糖飲食4周建立牙周炎模型。成模后,牙周炎大鼠再隨機分為牙周炎組(P組)、替硝唑組(T組)、維生素C組(VitC組)、茄尼醇低劑量組(S1)、中劑量組(S2)、高劑量組(S3),每組18只。灌胃給予不同藥物,替硝唑首日劑量為20mg/100g,后面按10mg/100g給藥;維生素C組劑量為10mg/100g;茄尼醇組劑量分別為1.5mg/100g、3mg/100g、6mg/100g, N組、P組灌胃等體積溶劑,1次／天,分別在灌胃的2、4、6周,每組隨機抽取6只大鼠行腹主動脈采血后處死,并分離大鼠上頜骨,左側用于測量牙槽骨喪失,右側行組織學HE染色和TRAP染色。ELISA檢測血漿中白介素1-β(interleukins1-β,IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、前列腺素E2 (Prostaglandin E2, PGE2)表達水平以及用羥胺法和DTNB法檢測SOD、GSH-Px的活性,TBA法檢測MDA含量。2.體外細胞實驗：脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬細胞RAW264.7,構建細胞炎癥模型。通過MTS法檢測化合物茄尼醇對RAW264.7細胞的毒性后,利用構建的細胞炎癥反應模型,對茄尼醇進行抗炎和抗氧化作用的研究。實驗分為陰性對照組,LPS組,LPS+VitC組,LPS+VitE組,LPS+不同濃度茄尼醇組(3.75uM、7.5uM、15uM、30uM、60uM)。細胞培養(yǎng)液被收集后ELISA檢測各組炎癥因子TNF-α、IL-1β、PGE2表達水平；收集細胞,羥胺法和DTNB法檢測SOD、GSH-Px的活性,TBA法檢測MDA含量。以上實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件包對實驗結果進行統(tǒng)計學分析。[結果]1.建模4周后大鼠牙周組織中大量炎性細胞浸潤,上皮釘突伸長,牙槽骨不規(guī)則吸收,深牙周袋形成,表明牙周炎模型建立成功。在藥物分別干預2W、4W、6W后,茄尼醇組牙槽骨喪失程度和破骨細胞活躍程度有減輕趨勢,與牙周炎組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。炎癥因子和氧化應激指標在大鼠血漿中的變化：與正常組相比,牙周炎組IL-1β、TNF-α、PGE2的表達均明顯增加(P0.05),給藥后,牙周炎大鼠血漿中IL-1β、 TNF-α、PGE2的表達水平均顯著降低(P0.05),同時SOD、GSH-Px活性升高, MDA的含量降低(P0.05)。2.1mg/mlLPS作用RAW264.7細胞24h后,炎性因子IL-1β、TNF-α、PGE2的表達和MDA的含量均顯著增加,SOD和GSH-Px的活性降低。茄尼醇各濃度組均明顯降低TNF-α、IL-1β、PGE2的表達,呈濃度依賴性,同時增加了抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性,降低了MDA的含量。[結論]應用茄尼醇可以顯著降低炎癥因子TNF-α、IL-1β、PGE2的表達水平,還可以不同程度的提高SOD、GSH-Px抗氧化酶的活性,降低MDA的含量,但對減輕牙槽骨喪失和抑制破骨細胞的活化作用不明顯。
【關鍵詞】：茄尼醇 牙周炎 自由基 炎癥因子 抗氧化酶
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R781.4
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-17
• 實驗一 茄尼醇對大鼠實驗性牙周炎炎癥及自由基水平的影響17-55
• 實驗材料與方法17-29
• 結果29-48
• 討論48-54
• 結論54-55
• 實驗二 茄尼醇對LPS誘導的RAW264.7細胞的作用研究55-80
• 實驗材料與方法55-65
• 結果65-76
• 討論76-79
• 結論79-80
• 全文總結80-81
• 問題及展望81-82
• 參考文獻82-89
• 綜述89-102
• 參考文獻96-102
• 攻讀學位期間獲得的學術成果102-103
• 致謝103

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本文編號：935212