發(fā)布時(shí)間：2017-09-13 19:40

  本文關(guān)鍵詞：采用組織芯片方法篩選口腔黏膜白斑惡變相關(guān)蛋白

  更多相關(guān)文章： 口腔黏膜白斑 口腔鱗狀細(xì)胞癌 免疫組化 蛋白免疫印跡 Protein X Protein Y

【摘要】：目的:口腔黏膜白斑(Oral leukoplakia,OLK)是指口腔內(nèi)白色病變而未被診斷為其他的具體疾病者,如扁平苔蘚、白色水腫等�？谇击[狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)是世界上第六常見(jiàn)的癌癥,占口腔惡性腫瘤的90%以上。世界上每年因口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病死亡的病例有將近500,000例,并且其預(yù)后較差,5年生存率約為50%左右�？谇击[狀細(xì)胞癌主要是由口腔癌前病變,尤其是口腔黏膜白斑受煙草等致癌物質(zhì)反復(fù)刺激所致。然而,口腔黏膜白斑惡變?yōu)榭谇击[狀細(xì)胞癌的機(jī)制目前還不明確。因此尋找口腔黏膜白斑惡變的分子標(biāo)志物,對(duì)預(yù)防口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生和早期診斷具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。在本次工作中,我們前期建立了口腔鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞模型OSCC-BD細(xì)胞系,通過(guò)基因芯片篩選出口腔黏膜白斑細(xì)胞系及其誘導(dǎo)惡變的OSCC-BD細(xì)胞系之間的差異基因組,經(jīng)過(guò)RNA水平的驗(yàn)證,并進(jìn)一步在這兩種細(xì)胞系及臨床病理組織中進(jìn)行驗(yàn)證,以尋找口腔黏膜白斑惡變的分子標(biāo)志物,為全面揭示口腔黏膜白斑惡變機(jī)制及早期治療靶點(diǎn)提供新線(xiàn)索。方法:分別體外培養(yǎng)口腔黏膜白斑細(xì)胞及其誘導(dǎo)惡變的OSCC-BD細(xì)胞,提取兩種細(xì)胞總蛋白,通過(guò)蛋白免疫印跡法(Western Blotting,WB)檢測(cè)Protein X和Protein Y在兩種細(xì)胞系中的表達(dá)情況。進(jìn)一步選取中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院病理科180例口腔鱗狀細(xì)胞癌患者石蠟包埋臨床組織,構(gòu)建口腔鱗癌組織及其癌旁正常組織的臨床組織芯片,通過(guò)免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry,IHC)檢測(cè)Protein X和Protein Y在OSCC癌組織及癌旁正常組織間的表達(dá)差異,并分析其表達(dá)情況與臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果:采用WB檢測(cè)結(jié)果提示:Protein X在口腔黏膜白斑細(xì)胞誘導(dǎo)惡變的OSCC-BD細(xì)胞中高表達(dá),在癌前的口腔黏膜白斑細(xì)胞細(xì)胞中不表達(dá);Protein Y在OSCC-BD細(xì)胞中不表達(dá),在癌前的口腔黏膜白斑細(xì)胞細(xì)胞中高表達(dá)。采用IHC在臨床組織芯片中的檢測(cè)結(jié)果提示:Protein X的表達(dá)主要位于細(xì)胞質(zhì)中,Protein X在OSCC癌組織及其癌旁正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為75%(135/180)和39%(71/180),Protein X在OSCC癌組織中的表達(dá)顯著高于其在癌旁正常組織中的表達(dá),兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.001);Protein Y的表達(dá)主要位于細(xì)胞核中,Protein Y在OSCC癌組織及其癌旁正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為20%(35/180)和33%(60/180),Protein Y在這兩種組織中的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.002,P0.05)。結(jié)論:Protein X可能積極參與了口腔黏膜白斑惡變的過(guò)程,Protein Y對(duì)惡變可能有一定的抑制作用,本研究為進(jìn)一步探索口腔黏膜白斑惡變的相關(guān)分子標(biāo)志物和早期治療靶點(diǎn)提供了研究基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：口腔黏膜白斑 口腔鱗狀細(xì)胞癌 免疫組化 蛋白免疫印跡 Protein X Protein Y
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R781.5
【目錄】：

• 摘要7-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-23
• 1.實(shí)驗(yàn)材料15-20
• 1.1 研究對(duì)象15-16
• 1.2 細(xì)胞株及培養(yǎng)條件16
• 1.3 主要試劑16-17
• 1.4 重要試劑的配制17-18
• 1.5 主要儀器設(shè)備18-20
• 2.研究方法20-23
• 2.1 蛋白免疫印跡（Western Blotting，WB）檢測(cè)細(xì)胞模型中蛋白表達(dá)20-21
• 2.2 免疫組織化學(xué)法（Immunohistochemistry，，IHC）檢測(cè)臨床組織中蛋白表達(dá)21-22
• 2.3 統(tǒng)計(jì)分析22-23
• 結(jié)果23-26
• 1.Protein X和Protein Y在DOK惡變細(xì)胞模型中的表達(dá)23
• 2.Protein X和Protein Y在臨床組織芯片中的表達(dá)23-26
• 討論26-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述 組織芯片與腫瘤生物標(biāo)志物研究進(jìn)展34-51
• 參考文獻(xiàn)44-51
• 附錄51-52
• 致謝52-53

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本文編號(hào)：845530