本文關鍵詞：采用組織芯片方法篩選口腔黏膜白斑惡變相關蛋白

  更多相關文章： 口腔黏膜白斑 口腔鱗狀細胞癌 免疫組化 蛋白免疫印跡 Protein X Protein Y

【摘要】：目的:口腔黏膜白斑(Oral leukoplakia,OLK)是指口腔內白色病變而未被診斷為其他的具體疾病者,如扁平苔蘚、白色水腫等�？谇击[狀細胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)是世界上第六常見的癌癥,占口腔惡性腫瘤的90%以上。世界上每年因口腔鱗狀細胞癌發(fā)病死亡的病例有將近500,000例,并且其預后較差,5年生存率約為50%左右�？谇击[狀細胞癌主要是由口腔癌前病變,尤其是口腔黏膜白斑受煙草等致癌物質反復刺激所致。然而,口腔黏膜白斑惡變?yōu)榭谇击[狀細胞癌的機制目前還不明確。因此尋找口腔黏膜白斑惡變的分子標志物,對預防口腔鱗狀細胞癌的發(fā)生和早期診斷具有重要的現(xiàn)實意義。在本次工作中,我們前期建立了口腔鱗狀細胞癌的細胞模型OSCC-BD細胞系,通過基因芯片篩選出口腔黏膜白斑細胞系及其誘導惡變的OSCC-BD細胞系之間的差異基因組,經(jīng)過RNA水平的驗證,并進一步在這兩種細胞系及臨床病理組織中進行驗證,以尋找口腔黏膜白斑惡變的分子標志物,為全面揭示口腔黏膜白斑惡變機制及早期治療靶點提供新線索。方法:分別體外培養(yǎng)口腔黏膜白斑細胞及其誘導惡變的OSCC-BD細胞,提取兩種細胞總蛋白,通過蛋白免疫印跡法(Western Blotting,WB)檢測Protein X和Protein Y在兩種細胞系中的表達情況。進一步選取中國醫(yī)學科學院腫瘤醫(yī)院病理科180例口腔鱗狀細胞癌患者石蠟包埋臨床組織,構建口腔鱗癌組織及其癌旁正常組織的臨床組織芯片,通過免疫組織化學法(immunohistochemistry,IHC)檢測Protein X和Protein Y在OSCC癌組織及癌旁正常組織間的表達差異,并分析其表達情況與臨床病理特征之間的關系。結果:采用WB檢測結果提示:Protein X在口腔黏膜白斑細胞誘導惡變的OSCC-BD細胞中高表達,在癌前的口腔黏膜白斑細胞細胞中不表達;Protein Y在OSCC-BD細胞中不表達,在癌前的口腔黏膜白斑細胞細胞中高表達。采用IHC在臨床組織芯片中的檢測結果提示:Protein X的表達主要位于細胞質中,Protein X在OSCC癌組織及其癌旁正常組織中的陽性表達率分別為75%(135/180)和39%(71/180),Protein X在OSCC癌組織中的表達顯著高于其在癌旁正常組織中的表達,兩組間有統(tǒng)計學差異(P0.001);Protein Y的表達主要位于細胞核中,Protein Y在OSCC癌組織及其癌旁正常組織中的陽性表達率分別為20%(35/180)和33%(60/180),Protein Y在這兩種組織中的表達有統(tǒng)計學差異(P=0.002,P0.05)。結論:Protein X可能積極參與了口腔黏膜白斑惡變的過程,Protein Y對惡變可能有一定的抑制作用,本研究為進一步探索口腔黏膜白斑惡變的相關分子標志物和早期治療靶點提供了研究基礎和科學依據(jù)。
【關鍵詞】：口腔黏膜白斑 口腔鱗狀細胞癌 免疫組化 蛋白免疫印跡 Protein X Protein Y
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R781.5
【目錄】：

• 摘要7-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-23
• 1.實驗材料15-20
• 1.1 研究對象15-16
• 1.2 細胞株及培養(yǎng)條件16
• 1.3 主要試劑16-17
• 1.4 重要試劑的配制17-18
• 1.5 主要儀器設備18-20
• 2.研究方法20-23
• 2.1 蛋白免疫印跡（Western Blotting，WB）檢測細胞模型中蛋白表達20-21
• 2.2 免疫組織化學法（Immunohistochemistry，，IHC）檢測臨床組織中蛋白表達21-22
• 2.3 統(tǒng)計分析22-23
• 結果23-26
• 1.Protein X和Protein Y在DOK惡變細胞模型中的表達23
• 2.Protein X和Protein Y在臨床組織芯片中的表達23-26
• 討論26-30
• 結論30-31
• 參考文獻31-34
• 綜述 組織芯片與腫瘤生物標志物研究進展34-51
• 參考文獻44-51
• 附錄51-52
• 致謝52-53

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉光壽;;口腔黏膜白斑與吸煙的因果分析[J];中國當代醫(yī)藥;2010年04期

2 高杰;;口腔黏膜白斑的臨床治療效果[J];求醫(yī)問藥(下半月);2013年01期

3 張艷琴;;口腔黏膜白斑的臨床治療分析[J];中國醫(yī)藥指南;2013年13期

4 夏華;;口腔黏膜白斑的臨床特點探討[J];中國醫(yī)藥指南;2014年04期

5 王勤濤,彭式韞,周威,黃明霞;中老年人口腔黏膜白斑的回顧性分析[J];臨床口腔醫(yī)學雜志;2003年07期

6 張文,馮延民;口腔黏膜白斑癌變機制研究的歷史與現(xiàn)狀[J];長春中醫(yī)學院學報;2004年01期

7 梅雪林,劉明春;某大學職工口腔黏膜白斑調查報告[J];中國校醫(yī);2005年03期

8 龐玲娟;陳小華;李汝瑤;秦蓉暉;馬莉;;口腔黏膜白斑臨床病理觀察[J];廣州醫(yī)藥;2007年01期

9 張行濤;張鑫文;徐勇剛;;56例老年口腔黏膜白斑的回顧分析[J];中華老年口腔醫(yī)學雜志;2007年01期

10 岳煒;孫正;;口腔黏膜白斑中西醫(yī)治療的臨床現(xiàn)狀[J];四川中醫(yī);2007年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 秦紅霞;馬麗華;韓冰;石愛梅;;Survivin在口腔黏膜白斑和鱗狀細胞癌中表達的研究[A];中華口腔醫(yī)學會第六屆全國口腔黏膜病學術會議論文集[C];2004年

2 藍愛仙;關曉兵;孫正;;口腔黏膜白斑癌變的相關危險因素分析[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結合大會論文匯編[C];2008年

3 葛姝云;婁佳寧;;口腔黏膜白斑癌變過程細胞增殖和凋亡的實驗研究[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結合大會論文匯編[C];2008年

4 馬麗華;秦紅霞;韓冰;石愛梅;;人口腔黏膜白斑及鱗狀細胞癌中c-myc蛋白、hTERT表達的研究[A];中華口腔醫(yī)學會第六屆全國口腔黏膜病學術會議論文集[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 成都中醫(yī)藥大學 蒲昭和;口腔黏膜白斑會癌變嗎？[N];保健時報;2006年

2 山東 梁棟;老年人口腔黏膜白斑的治療[N];民族醫(yī)藥報;2003年

3 四川 副研究員 蒲昭和;口腔黏膜白斑會癌變嗎[N];家庭醫(yī)生報;2003年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馬肖彥;新型口腔黏膜白斑惡變細胞模型的建立及惡變相關差異基因組檢測的研究[D];大連醫(yī)科大學;2016年

2 張延廣;采用組織芯片方法篩選口腔黏膜白斑惡變相關蛋白[D];大連醫(yī)科大學;2016年

3 陳竹雯;口腔黏膜白斑惡變差異蛋白質組學研究以及大學生齲病流行病學調查分析報告[D];大連醫(yī)科大學;2014年

本文編號：845530