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碳酸飲料對去勢大鼠頜骨骨折愈合的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-13 07:08

  本文關(guān)鍵詞:碳酸飲料對去勢大鼠頜骨骨折愈合的影響


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【摘要】:目的通過建立骨質(zhì)疏松大鼠頜骨骨折動(dòng)物模型,觀察長期飲用碳酸飲料對SD大鼠頜骨骨折愈合過程的影響,從骨痂區(qū)組織形態(tài)學(xué)觀察、骨密度和影像學(xué)表現(xiàn),以及BMP-2和IL-1表達(dá)的情況,探討碳酸飲料對去勢大鼠頜骨骨折愈合的影響,為臨床中長期飲用碳酸飲料對骨質(zhì)疏松性頜骨骨折愈合提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法3月齡雌性SD大鼠50只,隨機(jī)分成去勢組(40只)和假手術(shù)組(10只)。去勢組通過手術(shù)摘除雙側(cè)卵巢的方法,假手術(shù)組僅切除卵巢周邊同樣大小的脂肪組織。2個(gè)月后,測兩組骨密度,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,證明造模成功。將去勢組隨機(jī)分為2組,實(shí)驗(yàn)組和對照組,實(shí)驗(yàn)組用碳酸飲料喂養(yǎng),每只每次20ml,每天2次,對照組飲用純凈水,在碳酸飲料飼養(yǎng)的4w、8w、12w每組隨機(jī)選取5只檢測脛骨骨密度,12w時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。然后,實(shí)驗(yàn)組與對照組制作左側(cè)下頜骨骨折模型,用雙面金剛砂片在下頜體后部做一垂直于下頜骨的切口(長3mm,寬1mm),不破壞下頜骨的連續(xù)性。在骨折后2w、4w、8w每組分別處死5只大鼠,截取左側(cè)下頜骨。首先對樣本進(jìn)行X線觀察和骨密度檢測。然后將骨組織固定12-24h,再脫鈣約60d,最后經(jīng)過石蠟包埋,切片等操作,分別進(jìn)行HE組織切片染色和免疫組化BMP-2、IL-1的染色。對切片進(jìn)行圖像的采集與分析,進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。使用IPP5.0軟件對BMP-2和IL-1表達(dá)的平均光密度值(MOD)以及骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)(骨小梁面積比和平均寬度)進(jìn)行測量。采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1去勢手術(shù)后2個(gè)月,去勢組脛骨骨密度明顯低于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2喂食碳酸飲料12周時(shí),實(shí)驗(yàn)組大鼠脛骨骨密度(BMD)明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3頜骨骨折后,2周、4周、8周兩組間X線比較:2周時(shí),實(shí)驗(yàn)組和對照組都可以看見下頜骨下頜升支處明顯的骨折區(qū)域,兩組均為低密度影像,骨痂不明顯,觀察兩組無差異。4周時(shí),對照組骨折線模糊,骨折區(qū)域密度增高;實(shí)驗(yàn)組骨折線仍然明顯,骨折區(qū)域密度稍有增高,但不如對照組。8周時(shí),對照組骨折線消失,骨痂基本充滿骨折區(qū)域;實(shí)驗(yàn)組仍能看到模糊的骨折線,與對照組相比,骨折區(qū)域與周圍組織界限清楚。4頜骨骨折后,2周、4周、8周時(shí),實(shí)驗(yàn)組左側(cè)下頜骨骨痂骨密度均低于對照組(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5 HE染色觀察:2周時(shí),兩組新生的骨小梁排列紊亂,在骨小梁周圍有成骨細(xì)胞,與對照組比較,實(shí)驗(yàn)組骨小梁較少。4周,對照組新生小梁骨不斷增加,成骨細(xì)胞開始轉(zhuǎn)化為骨細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組骨小梁也有所增多但不如對照組。8周,對照組骨小梁改建成熟,骨小梁粗大,排列一致。實(shí)驗(yàn)組骨小梁轉(zhuǎn)化緩慢,仍然可見骨小梁變細(xì),并且粗細(xì)不一,同時(shí)分布稀疏,見有斷裂現(xiàn)象。6骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué):骨小梁面積比值和骨小梁平均寬度在骨折后2、4、8周各時(shí)間段內(nèi)實(shí)驗(yàn)組均低于對照組(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組和對照組各組內(nèi)骨折后2、4、8周骨小梁的面積比和骨小梁平均寬度的數(shù)值隨時(shí)間的增加而增長。7骨痂組織中BMP-2檢測結(jié)果:測量實(shí)驗(yàn)組和對照組BMP-2陽性表達(dá)的平均光密度值,在骨折后第2、4、6、8周實(shí)驗(yàn)組均低于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組在骨折后2周、4周、8周BMP-2的平均光密度值依次降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。8骨痂組織中IL-1檢測結(jié)果:測量實(shí)驗(yàn)組和對照組IL-1陽性表達(dá)的平均光密度值,在骨折后第2、4、8周實(shí)驗(yàn)組高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組在骨折后2周、4周、8周IL-1的平均光密度值依次降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論1本實(shí)驗(yàn)通過去勢法成功建立大鼠骨質(zhì)疏松模型。2實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)長時(shí)間飲用碳酸飲料的實(shí)驗(yàn)組脛骨段骨密度低于對照組,說明碳酸飲料可以加重去勢大鼠的骨質(zhì)疏松。3碳酸飲料能影響骨折愈合過程中BMP-2和IL-1的合成和分泌,抑制BMP-2的表達(dá)和促進(jìn)IL-1陽性表達(dá)。4實(shí)驗(yàn)證實(shí)長時(shí)間飲用碳酸飲料的去勢大鼠頜骨骨折愈合情況較差,愈合所需時(shí)間較長。
【關(guān)鍵詞】:碳酸飲料 骨質(zhì)疏松 骨折愈合 骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 白細(xì)胞介素-1
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R782.4
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 英文縮略表10-11
  • 引言11-13
  • 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-35
  • 1.1 材料與方法13-20
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-20
  • 1.2 結(jié)果20-26
  • 1.2.1 X線片觀察20-21
  • 1.2.2 骨密度測量21-22
  • 1.2.3 骨痂組織形態(tài)學(xué)觀察22-23
  • 1.2.4 骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析23
  • 1.2.5 BMP-223-25
  • 1.2.6 IL-125-26
  • 1.3 討論26-32
  • 1.3.1 骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型的建立26-27
  • 1.3.2 骨折模型的建立27
  • 1.3.3 下頜骨骨折愈合的特點(diǎn)27-28
  • 1.3.4 碳酸飲料與骨質(zhì)疏松的關(guān)系28-29
  • 1.3.5 骨質(zhì)疏松性骨折愈合過程29-30
  • 1.3.6 碳酸飲料對去勢大鼠骨折愈合的影響30
  • 1.3.7 BMP-2 與骨質(zhì)疏松性骨折愈合30-31
  • 1.3.8 IL-1 與骨質(zhì)疏松性骨折愈合31-32
  • 1.4 小結(jié)32
  • 參考文獻(xiàn)32-35
  • 第2章 綜述 骨質(zhì)疏松性骨折愈合研究進(jìn)展35-48
  • 2.1 骨質(zhì)疏松模型的建立35-38
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物35-36
  • 2.1.2 骨質(zhì)疏松模型建立的方法36-38
  • 2.2 頜骨骨折模型的建立38
  • 2.3 雌激素38-39
  • 2.4 飲食因素39-40
  • 2.5 細(xì)胞因子40-42
  • 2.5.1 BMP-240-41
  • 2.5.2 IL-141-42
  • 參考文獻(xiàn)42-48
  • 結(jié)論48-49
  • 致謝49-50
  • 導(dǎo)師簡介50-51
  • 作者簡介51-52
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集52

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