本文關(guān)鍵詞：Neuropilin-1誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化及其機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： NRP1 口腔鱗狀細(xì)胞癌 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 遷移侵襲 NF-κB

【摘要】：口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)是最常見的口腔惡性腫瘤,具有較強(qiáng)的局部浸潤和轉(zhuǎn)移能力,惡性程度往往較高。上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的影響。神經(jīng)纖毛素1(Neuropilin-1,NRP1)是一種多功能的跨膜糖蛋白,研究表明其表達(dá)程度與腫瘤的發(fā)生,生長和預(yù)后密切相關(guān)并且可能參與了某些腫瘤細(xì)胞EMT的進(jìn)程。NRP1誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生EMT可能是其侵襲轉(zhuǎn)移性較強(qiáng)的重要原因。研究目的:1.觀察NRP1在口腔鱗癌中的表達(dá),評價NRP1表達(dá)水平與口腔鱗癌臨床病理以及預(yù)后的關(guān)系。2.明確NRP1上調(diào)后口腔鱗癌細(xì)胞EMT的發(fā)生及生物學(xué)行為的改變;3.探討NRP-1誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生EMT的分子生物學(xué)機(jī)制;材料與方法:1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測60例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本及30例正常口腔粘膜組織標(biāo)本中NRP1的表達(dá)強(qiáng)度、范圍;統(tǒng)計分析NRP1表達(dá)水平與腫瘤臨床病理以及預(yù)后的關(guān)系。2.利用pcDNA3.1-NRP1真核表達(dá)質(zhì)粒及pcDNA3.1空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人口腔鱗癌細(xì)胞系CAL27,HN4及HN6,獲得穩(wěn)定高表達(dá)NRP1的細(xì)胞株(實(shí)驗組)及相對低表達(dá)NRP1的細(xì)胞株(對照組)。觀察質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后兩組細(xì)胞的表型的改變;應(yīng)用RT-RCR和Western Blot方法分別檢測兩組細(xì)胞中NRP1以及上皮和間質(zhì)標(biāo)志物mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)變化;應(yīng)用劃痕實(shí)驗、Transwell侵襲實(shí)驗、單克隆形成實(shí)驗、耐藥實(shí)驗檢測NRP1高表達(dá)后細(xì)胞生物學(xué)行為的改變。3.應(yīng)用RT-RCR和Western Blot方法分別檢測兩組細(xì)胞中NF-κB信號通路相關(guān)蛋白的變化。特異性抑制NF-κB信號通路活性,觀察細(xì)胞的EMT進(jìn)程能否被逆轉(zhuǎn)。結(jié)果:1.免疫組織化學(xué)染色顯示:60例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本中均檢測出NRP1表達(dá),而30例正常組織中僅6例檢測出NRP1表達(dá),顯示NRP1在腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)(p0.001);NRP1的表達(dá)與口腔鱗癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率密切相關(guān)(p0.05);生存分析表明NRP1高表達(dá)組總體生存率明顯低于低表達(dá)組患者(p0.05)。2.NRP1高表達(dá)誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞系發(fā)生了明顯的EMT,表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變,上皮標(biāo)志物E-cadherin和β-catenin表達(dá)下降,間質(zhì)標(biāo)志物vimentin和N-cadherin表達(dá)上升。細(xì)胞的遷移、侵襲、增殖能力以及耐藥性顯著增強(qiáng),細(xì)胞發(fā)生EMT導(dǎo)致遷移侵襲性增強(qiáng)的同時獲得了一定的腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell,CSC)樣特性。3.NF-κB信號通路在NRP1誘導(dǎo)的口腔鱗癌細(xì)胞EMT進(jìn)程中呈現(xiàn)激活狀態(tài),特異性抑制NF-κB信號通路活性,可逆轉(zhuǎn)NRP1高表達(dá)腫瘤細(xì)胞的EMT進(jìn)程,并減弱其遷移、侵襲能力。結(jié)論:本實(shí)驗證明NRP1在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中呈高表達(dá),與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及患者的生存率密切相關(guān)。NRP1可通過激活NF-κB信號通路誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞發(fā)生EMT,增強(qiáng)其遷移侵襲能力的同時使其獲得一定的CSC樣特性。特異性抑制NF-κB信號通路活性,可逆轉(zhuǎn)NRP1所誘導(dǎo)的口腔鱗癌細(xì)胞EMT進(jìn)程,并減弱細(xì)胞的遷移、侵襲能力。
【關(guān)鍵詞】：NRP1 口腔鱗狀細(xì)胞癌 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 遷移侵襲 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.85
【目錄】：

• 縮略詞表4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-14
• 第一部分NRP1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義14-22
• 1 材料和方法14-18
• 2 結(jié)果18-20
• 3 討論20-22
• 第二部分NRP1誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化并改變其生物學(xué)行為22-43
• 1 材料和方法23-34
• 2 結(jié)果34-39
• 3 討論39-43
• 第三部分NRP1誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的機(jī)制探究43-52
• 1 材料和方法43-45
• 2 結(jié)果45-50
• 3. 討論50-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 文獻(xiàn)綜述57-68
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況68-69
• 致謝69

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王新勇;口腔鱗狀細(xì)胞癌18例病理分析[J];山東醫(yī)藥;2004年26期

2 王雷;高文信;馬寧;;血管內(nèi)皮生長因子在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

3 吳修胤;佟冬冬;張風(fēng)河;;微小RNA與口腔鱗狀細(xì)胞癌[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2011年01期

4 馬開宇;馬開陽;黎明;代曉明;李逸松;;基于形態(tài)學(xué)特征提取的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)在口腔鱗狀細(xì)胞癌診斷中的應(yīng)用[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年01期

5 �；刍�;劉洋;周晶琳;;口腔鱗狀細(xì)胞癌機(jī)制研究[J];微量元素與健康研究;2013年01期

6 楊成;新生血管在口腔鱗狀細(xì)胞癌擴(kuò)散中的作用[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;1996年06期

7 簡衛(wèi)國,李凌,武培敬;表皮生長因子受體在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;1998年01期

8 趙世祿;程福強(qiáng);史繁華;;口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床流行病學(xué)研究現(xiàn)狀[J];中國保健營養(yǎng);2013年07期

9 葉平,蔣澤先,張永福;口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域P~(53)和P~(21)表達(dá)差異[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2001年04期

10 安榕榕,傅升,楊文英;腦電圖與腦干聽覺誘發(fā)電位觀察口腔鱗狀細(xì)胞癌對腦功能的影響[J];臨床神經(jīng)電生理學(xué)雜志;2001年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高巍;郭傳tx;;口腔鱗狀細(xì)胞癌延誤診斷相關(guān)因素的前瞻性研究[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

2 吳衍昌;李芳;;熱休克蛋白60在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

3 張強(qiáng);張永福;卓夏陽;賈云香;;口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域病理分級及增殖活性的差異[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

4 僗承翰;林美灄;戴鑓;_5正琪;;發(fā)展奈米金結(jié)合傳統(tǒng)化療藥物以抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌之協(xié)同療法(英文)[A];2013第七屆海峽兩岸毒理學(xué)研討會大會手冊[C];2013年

5 吳洪儒;劉曉勇;王鳳光;汪育苗;;口腔鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移危險因素的Logistic回歸分析[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2006年

6 劉曉勇;吳洪儒;汪育苗;王鳳光;;口腔鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)因素的單因素分析[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2006年

7 李明賀;張茹慧;吳國民;;CD44 podoplanin在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

8 張曄;郭傳tx;俞光巖;;口腔鱗狀細(xì)胞癌脂肪酸代謝的初步研究[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

9 郭傳tx;李羽安;高巖;;口腔鱗狀細(xì)胞癌頸淋巴轉(zhuǎn)移特征再探討[A];海峽兩岸2008口腔癌診治與修復(fù)重建新進(jìn)展研討會論文集[C];2008年

10 張偉偉;熊學(xué)鵬;何三綱;張文峰;;≤40歲年輕女性口腔鱗狀細(xì)胞癌的臨床特點(diǎn)分析[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 衣曉峰　喬蕤琳;哈醫(yī)大二院揭示口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生機(jī)理[N];中國醫(yī)藥報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 賴金火;Id1和NF-κB亞單位p65在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制中的協(xié)同作用研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

2 鄭建偉;口腔鱗狀細(xì)胞癌差異基因的篩選驗證及相互作用的生物信息學(xué)分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 崔婧;口腔鱗狀細(xì)胞癌的生物信息學(xué)分析[D];山東大學(xué);2014年

4 孫曉菊;環(huán)氧合酶-2與口腔鱗狀細(xì)胞癌關(guān)系的初步研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

5 吳國民;口腔鱗狀細(xì)胞癌腫瘤干細(xì)胞的分選和鑒定[D];吉林大學(xué);2011年

6 董作青;Id-1基因沉默抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌生長轉(zhuǎn)移的研究[D];山東大學(xué);2010年

7 張曉英;Gadd45a在口腔鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后及治療中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

8 李男男;口腔鱗狀細(xì)胞癌中CADM1基因表達(dá)及啟動子區(qū)甲基化研究[D];吉林大學(xué);2011年

9 王秋旭;口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶及PTEN蛋白表達(dá)的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

10 景捷;TIMPs對口腔鱗狀細(xì)胞癌β-DG表達(dá)特征影響的研究[D];四川大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉璽章;P-gp、HIF-1α在口腔鱗狀細(xì)胞癌癌組織中的表達(dá)和臨床意義[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 馬賁;HPV感染對口腔鱗狀細(xì)胞癌朗格漢斯細(xì)胞數(shù)量的影響[D];佳木斯大學(xué);2015年

3 儲偉明;Neuropilin-1誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化及其機(jī)制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

4 張強(qiáng);口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域病理學(xué)分級及增殖活性的差異[D];江西醫(yī)學(xué)院;2000年

5 張建運(yùn);β-連環(huán)蛋白及其相關(guān)因子在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

6 殷樹勛;血管內(nèi)皮生長因子在口腔鱗狀細(xì)胞癌表達(dá)的意義[D];青島大學(xué);2001年

7 李秀;明膠酶及其抑制因子在口腔鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)的臨床病理研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

8 周茜;上皮型鈣粘素及相關(guān)蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[D];武漢大學(xué);2005年

9 杜格非;孟加拉紅染色用于早期口腔鱗狀細(xì)胞癌及癌前病變篩檢的臨床研究[D];武漢大學(xué);2004年

10 葉平;口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域的p～53、p～21基因蛋白表達(dá)差異及臨床意義[D];江西醫(yī)學(xué)院;2000年

，

本文編號：840736