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基質(zhì)衍生細胞因子-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢進行牙髓再生的研究

發(fā)布時間:2017-09-12 23:43

  本文關(guān)鍵詞:基質(zhì)衍生細胞因子-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢進行牙髓再生的研究


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【摘要】:目的:通過在根管內(nèi)植入基質(zhì)衍生細胞因子-1α (stromal cell derived factor-1α, SDF-1α)組織學(xué)評價根管在皮下異位和頜骨原位兩種不同組織生理學(xué)環(huán)境下SDF-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞進入根管的趨化能力,并觀察根管內(nèi)再生組織的組織學(xué)結(jié)構(gòu),探討SDF-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢并參與牙髓再生的可行性,為非細胞移植的牙髓再生尋找新途徑。方法:1.皮下異位實驗;臨床收集因正畸需要拔除的前磨牙,制備成長5mm的牙根段,實驗組牙根段根管內(nèi)植入復(fù)合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架,對照組牙根段根管內(nèi)僅植入多肽水凝膠膠原支架。選取6-8周齡15只免疫缺陷小鼠(裸鼠),背部作一1cm長縱行切口,鈍性分離皮下組織,每只裸鼠背部左右兩側(cè)分別各植入一對照組、實驗組牙根段樣本,6周后取材,對樣本進行組織學(xué)觀察。2.頜骨原位實驗:選取10-12月齡中華田園犬3只,建立犬恒牙無髓根管模型。每只實驗犬上頜6顆前牙隨機分成兩組,實驗組根管內(nèi)植入復(fù)合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架,對照組根管內(nèi)僅植入多肽水凝膠膠原支架,冠部均采用MTA+玻璃離子雙層嚴密封閉。術(shù)后6周處死動物、取材,蘇木精-伊紅(hematine-eosine, HE)染色及免疫組織化學(xué)染色檢測DSPP和CD34在再生組織內(nèi)的表達情況。結(jié)果:1.收集植入裸鼠背部的牙根段樣本,實驗組根管開放端見紅色組織再生,HE染色觀察實驗組牙根段根管內(nèi)有大量細胞和血管形成,細胞呈長梭形成纖維細胞樣,細胞形態(tài)清晰,胞核小而細長,著色深。根管內(nèi)見管腔形態(tài)不規(guī)則的血管樣組織形成,內(nèi)含紅細胞,并可見少量的上皮細胞。對照組牙根段內(nèi)見均質(zhì)疏松狀物質(zhì),未見細胞、血管等組織結(jié)構(gòu)。2.收集實驗犬實驗樣本,HE染色顯微鏡下可見實驗組根管腔內(nèi)生成含大量細胞和血管的疏松結(jié)締組織。根管內(nèi)細胞形態(tài)呈長梭形,類似成纖維細胞樣形態(tài),胞核小而細長,著色深,胞質(zhì)較少,并貼附于天然牙本質(zhì)壁。根管內(nèi)新生血管樣組織可見管腔形態(tài)不規(guī)則,內(nèi)皮細胞襯于管腔內(nèi)側(cè)。對照組HE染色顯微鏡下觀察根管腔內(nèi)見均質(zhì)疏松狀物質(zhì),未見細胞、血管等組織結(jié)構(gòu)。DSPP抗體免疫組織化學(xué)染色鏡下觀察顯示,實驗組根管內(nèi)牙髓樣新生組織中細胞胞漿呈棕色陽性表達。CD34抗體免疫組織化學(xué)染色鏡下觀察顯示,實驗組根管內(nèi)血管樣新生組織內(nèi)襯細胞染色呈棕色陽性表達。結(jié)論:1.根管預(yù)備后管腔內(nèi)植入SDF-1α,在皮下異位環(huán)境下SDF-1α具有誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢的能力。2.頜骨原位根管中植入SDF-1α可誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢進入根管并誘導(dǎo)牙髓樣組織再生。3. SDF-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢進入根管的生物學(xué)活性有望為非細胞移植的牙髓再生治療提供思路。
【關(guān)鍵詞】:基質(zhì)衍生細胞因子-1 α 牙根段 裸鼠 犬無髓根管模型 細胞歸巢 牙髓再生
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R781
【目錄】:
  • 個人簡歷4-6
  • 英文縮略詞表6-7
  • 中文摘要7-9
  • 英文摘要9-12
  • 前言12-16
  • 實驗一 根管管腔中基質(zhì)衍生細胞因子-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢的研究16-28
  • 1、材料與方法16-21
  • 2、結(jié)果21-24
  • 3、討論24-27
  • 4、小結(jié)27-28
  • 實驗二 基質(zhì)衍生細胞因子-1 α誘導(dǎo)內(nèi)源性細胞歸巢進行牙髓再生的原位研究28-40
  • 1、材料與方法28-32
  • 2、結(jié)果32-37
  • 3、討論37-40
  • 4、小結(jié)40
  • 結(jié)論40-41
  • 參考文獻41-46
  • 文獻綜述46-67
  • 綜述參考文獻56-67
  • 致謝67-68
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文68

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本文編號:840232

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