本文關(guān)鍵詞：Golli-MBP影響T細(xì)胞與口腔黏膜組織細(xì)胞生物學(xué)功能的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 少突膠質(zhì)細(xì)胞譜系基因-髓鞘堿性蛋白 鈣離子 增殖 凋亡 動(dòng)物模型

【摘要】：目的：研究少突膠質(zhì)細(xì)胞譜系基因-髓鞘堿性蛋白(Genes of the Oligodendrocyte lineage-Myelin Basic Protein, Golli-MBP)對(duì)T細(xì)胞胞內(nèi)Ca2+及凋亡、增殖能力的影響,初步嘗試建立口腔扁平苔蘚(Oral lichen planus, OLP)動(dòng)物模型,從而為進(jìn)一步研究OLP等免疫相關(guān)性疾病的病因及發(fā)病機(jī)制打下基礎(chǔ)。方法：Golli-MBP過表達(dá)慢病毒載體感染Jurkat細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real time PCR, qPCR)和免疫蛋白印記技術(shù)(western blot, WB)分析Golli-MBP mRNA及蛋白表達(dá)情況；CCK-8法和Annexin V/FITC 7-AAD雙熒光染色分別檢測(cè)Jurkat細(xì)胞增殖能力、凋亡能力；采用鈣離子熒光探針Fluo-3檢測(cè)Jurkat細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度變化；Golli-MBP過表達(dá)慢病毒載體注射于敘利亞金黃地鼠頰囊黏膜下,HE染色觀察敘利亞金黃地鼠口腔黏膜組織結(jié)構(gòu)改變；免疫組化法觀察敘利亞金黃地鼠口腔黏膜組織中增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表達(dá)；TUNEL法觀察敘利亞金黃地鼠口腔黏膜組織細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果：Golli-MBP過表達(dá)慢病毒載體成功感染Jurkat細(xì)胞,感染后Jurkat細(xì)胞Golli-MBP mRNA及蛋白表達(dá)升高；Golli-MBP OE組Jurkat細(xì)胞增殖能力顯著下降(p0.01),凋亡能力也明顯下降(p＜0.01); Golli-MBP OE組鈣離子內(nèi)流顯著減小(p＜0.01); Golli-MBP未能誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物口腔黏膜產(chǎn)生肉眼可見的OLP病損變化；HE染色未見OLP特征性組織學(xué)結(jié)構(gòu)改變；7天實(shí)驗(yàn)組上皮層細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組無明顯差異(p0.05),14天實(shí)驗(yàn)組上皮層細(xì)胞凋亡率低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；7天及14天實(shí)驗(yàn)組上皮層細(xì)胞增殖率低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論：Golli-MBP過表達(dá)可抑制Jurkat細(xì)胞增殖、凋亡能力和抑制Ca2+內(nèi)流,且能夠調(diào)控?cái)⒗麃喗瘘S地鼠頰囊黏膜上皮細(xì)胞增殖和凋亡,但未能成功建立OLP動(dòng)物模型。
【關(guān)鍵詞】：少突膠質(zhì)細(xì)胞譜系基因-髓鞘堿性蛋白 鈣離子 增殖 凋亡 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R781.5
【目錄】：

• 縮略詞表7-9
• 中文摘要9-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-15
• 第一部分 GOLLI-MBP過表達(dá)慢病毒載體對(duì)T細(xì)胞內(nèi)鈣離子的影響15-29
• 1 材料和方法15-24
• 2 結(jié)果24-27
• 3 討論27-29
• 第二部分 GOLLI-MBP過表達(dá)慢病毒載體對(duì)T細(xì)胞凋亡、增殖能力的影響29-34
• 1 材料和方法29-30
• 2 結(jié)果30-32
• 3 討論32-34
• 第三部分 GOLLI-MBP過表達(dá)慢病毒載體介導(dǎo)建立口腔扁平苔蘚動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)初探34-45
• 1 材料和方法34-39
• 2 結(jié)果39-43
• 3 討論43-45
• 總結(jié)45-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 文獻(xiàn)綜述52-60
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況60-61
• 南京醫(yī)科大學(xué)研究生成績(jī)單61-62
• 致謝62

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1 廖馨;Golli-MBP影響T細(xì)胞與口腔黏膜組織細(xì)胞生物學(xué)功能的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：698680