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多孔氧化鋯種植體的制備及其成骨效果

發(fā)布時(shí)間:2017-07-15 07:07

  本文關(guān)鍵詞:多孔氧化鋯種植體的制備及其成骨效果


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【摘要】:氧化鋯陶瓷材料因其具有良好的生物相容性及物理機(jī)械性能等優(yōu)點(diǎn)而成為一種理想的修復(fù)材料。但是,氧化鋯種植體的表面處理方式依然有限,傳統(tǒng)的噴砂處理會(huì)引入裂紋,增加氧化鋯種植體斷裂風(fēng)險(xiǎn)。如何粗化種植體表面,增加骨整合的程度和速度依然是亟待解決的問題。本課題將氧化鋯涂層涂覆于氧化鋯坯表面,高溫?zé)Y(jié)后形成多孔的沒有外部引入裂紋的多孔表面,旨在研究其對(duì)成骨細(xì)胞的影響。本研究包括兩部分實(shí)驗(yàn),其分別是:1多孔處理對(duì)氧化鋯種植體表面理化性能的影響;2多孔處理對(duì)氧化鋯種植體生物性能的影響。目的:1研究多孔處理對(duì)氧化鋯種植體表面形貌、元素組成及表面粗糙度的影響。2研究多孔處理對(duì)氧化鋯種植體生物性能的影響。材料和方法:制備直徑15mm、厚度1.5mm的氧化釔穩(wěn)定的多孔氧化鋯瓷片,采用相同尺寸的未經(jīng)多孔處理的氧化鋯瓷片和純鈦片做為對(duì)照組。未經(jīng)多孔處理氧化鋯片及純鈦片分別采用400目、600目、800目水砂紙拋光,經(jīng)無水乙醇超聲清洗10min、高溫高壓(121.3℃、103.43k Pa)滅菌消毒30min后備用。采用以下方法對(duì)多孔氧化鋯瓷片與未經(jīng)多孔處理的氧化鋯瓷片、純鈦片進(jìn)行測試:1表面理化性能測試:掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM)及能譜儀(energy dispersive spectrometer,EDS)測量經(jīng)多孔處理氧化鋯片與未經(jīng)多孔處理氧化鋯片、純鈦片三種試件的表面形貌和表面成分;白光干涉顯微鏡(white light interferometric microscopy)及接觸式粗糙度儀測量三種試件的表面三維形貌和表面粗糙度。2生物性能試驗(yàn):將多孔氧化鋯瓷片和未經(jīng)多孔處理的氧化鋯瓷片、純鈦片各30片分別置于24孔板中,每孔接種4萬個(gè)MC3T3-E1小鼠成骨細(xì)胞。采用普通培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)3天后更換分化培養(yǎng)基。更換培養(yǎng)基后于第3天、第7天時(shí)終止培養(yǎng)(n=5),分別提取各孔總RNA,并逆轉(zhuǎn)錄為c DNA。然后利用實(shí)時(shí)熒光定量QPCR法測定ALP、OCN、OPN、RUNX2、SATB2基因的相對(duì)表達(dá)量。部分樣本細(xì)胞接種后分別在第1天、第3天和第5天時(shí)去培養(yǎng)基并用PBS溶液沖洗3次,然后用2.5%的戊二醛固定并進(jìn)行乙醇梯度脫水。SEM測量生長于多孔氧化鋯瓷片和未經(jīng)多孔處理的氧化鋯瓷片、純鈦片表面的細(xì)胞形態(tài)。部分樣本在細(xì)胞接種后第1天和第3天時(shí)去培養(yǎng)基并用PBS溶液沖洗2次,采用MTT溶液染色后用異丙醇進(jìn)行溶解,然后采用酶聯(lián)免疫檢測儀(enzyme-linked immunometric meter)分別檢測溶解后溶液的OD值。結(jié)果:1多孔氧化鋯瓷片表面具有1~20μm大小的孔結(jié)構(gòu),其表面粗糙度為0.57μm,與純鈦0.50μm的粗糙度相似,遠(yuǎn)大于未經(jīng)多孔處理的氧化鋯瓷片0.20μm的粗糙度;2實(shí)時(shí)熒光定量QPCR檢測顯示純鈦組與未經(jīng)多孔處理的氧化鋯組表面成骨細(xì)胞的ALP、OCN、OPN、RUNX2、SATB2基因表達(dá)量兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)氧化鋯種植體表面進(jìn)行多孔處理后,生長在其表面的成骨細(xì)胞ALP、OCN、OPN、RUNX2、SATB2基因表達(dá)量隨時(shí)間的增加而升高,并明顯高于未經(jīng)多孔處理的氧化鋯,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。細(xì)胞形貌顯示三組材料的細(xì)胞形態(tài)無明顯差異且具有相似的細(xì)胞附著,而多孔氧化鋯組表現(xiàn)出較高的細(xì)胞增殖能力。結(jié)論:1氧化鋯陶瓷與純鈦具有相似的成骨細(xì)胞行為;2表面多孔處理技術(shù)能夠促進(jìn)氧化鋯種植體的骨結(jié)合。
【關(guān)鍵詞】:氧化鋯種植體 表面處理 骨結(jié)合 成骨細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R783.1
【目錄】:
  • 縮略詞3-4
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-10
  • 第1章 引言10-12
  • 第2章 多孔氧化鋯試件的制備及其理化性能研究12-24
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品13
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)器材13
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-15
  • 2.2.1 多孔氧化鋯試件的制備13-14
  • 2.2.2 掃描電子顯微鏡和能譜儀對(duì)試件表面形貌及成分的測定14-15
  • 2.2.3 白光干澀顯微鏡和粗糙度儀對(duì)樣品表面三維形貌及表面粗糙度的測定15
  • 2.2.4 數(shù)據(jù)分析15
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-19
  • 2.3.1 掃描電鏡觀察結(jié)果15-17
  • 2.3.2 表面能譜分析結(jié)果17-18
  • 2.3.3 三維形貌觀察結(jié)果18
  • 2.3.4 表面粗糙度測量結(jié)果18-19
  • 2.4 討論19-22
  • 2.5 小結(jié)22-24
  • 第3章 多孔氧化鋯的生物性能研究24-42
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)材料24-25
  • 3.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞24
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)樣品與試劑24-25
  • 3.1.3 實(shí)驗(yàn)器材25
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)方法25-32
  • 3.2.1 小鼠MC3T3 E1成骨細(xì)胞培養(yǎng)25-27
  • 3.2.2 細(xì)胞接種方法27-29
  • 3.2.3 細(xì)胞總RNA提取29
  • 3.2.4 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)29-30
  • 3.2.5 擴(kuò)增反應(yīng)并測定基因相對(duì)表達(dá)水平30-31
  • 3.2.6 采用MTT檢測方法進(jìn)行細(xì)胞定量分析31-32
  • 3.2.7 掃描電鏡測量表面細(xì)胞形態(tài)32
  • 3.3 數(shù)據(jù)分析32
  • 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-39
  • 3.4.1 表面細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果32-33
  • 3.4.2 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-34
  • 3.4.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測結(jié)果34-39
  • 3.5 討論39-41
  • 3.6 小結(jié)41-42
  • 第4章 結(jié)論與展望42-44
  • 4.1 結(jié)論42-43
  • 4.2 進(jìn)一步工作的方向43-44
  • 致謝44-46
  • 參考文獻(xiàn)46-50
  • 綜述 氧化鋯種植體的研究進(jìn)展50-58
  • 參考文獻(xiàn)54-58
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果58

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本文編號(hào):542836

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