本文關(guān)鍵詞：模擬微重力對(duì)變異鏈球菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸及合成胞外多糖影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究發(fā)現(xiàn),微重力環(huán)境下一些條件致病菌的毒力和致病性增加或減弱。齲病是在以細(xì)菌為主的多種因素作用下發(fā)生的口腔常見(jiàn)疾病,其中變異鏈球菌是目前公認(rèn)的主要致齲菌之一。本研究旨在觀察模擬微重力環(huán)境對(duì)變異鏈球菌的生長(zhǎng)、形態(tài)學(xué)、產(chǎn)酸能力、合成胞外多糖能力及gtfs mRNA表達(dá)的影響,探討模擬微重力環(huán)境下變異鏈球菌致齲能力的變化,為維護(hù)航天員的口腔健康提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。采用高截面縱橫比容器(high aspect ratio vessel,HARV)建立模擬微重力細(xì)菌培養(yǎng)模型。模擬微重力組及對(duì)照組分別在培養(yǎng)2h、4h、6h、8h、10h、12h、16h、20h和24 h時(shí)取菌懸液,用分光光度計(jì)測(cè)定菌液的OD600nm吸光度值。每組設(shè)3個(gè)樣本,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,取平均值,繪制生長(zhǎng)曲線,觀察模擬微重力環(huán)境對(duì)變異鏈球菌生長(zhǎng)的影響。模擬微重力組及對(duì)照組分別在培養(yǎng)24 h時(shí)取菌懸液,收集菌體,固定后采用掃描電鏡和透射電鏡觀察模擬微重力環(huán)境下變異鏈球菌形態(tài)學(xué)的變化。模擬微重力組及對(duì)照組培養(yǎng)24h時(shí),用精密pH計(jì)測(cè)定菌液的pH值,并計(jì)算pH的變化值ΔpH(即初始pH值減去培養(yǎng)24h時(shí)菌液pH值)。每組設(shè)3個(gè)樣本,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,取平均值。通過(guò)ΔpH間接反映模擬微重力環(huán)境對(duì)變異鏈球菌產(chǎn)酸能力的影響。模擬微重力組及對(duì)照組培養(yǎng)24h時(shí),利用稀釋涂布平板法測(cè)定兩組樣本中的細(xì)菌量,采用蒽酮法測(cè)定兩組樣本中水溶性多糖(water soluble glucan,WSG)和水不溶性多糖(water insoluble glucan,WIG)的含量,計(jì)算細(xì)菌合成胞外多糖的能力:細(xì)菌合成胞外多糖的能力=合成胞外多糖的量/細(xì)菌的量,觀察模擬微重力對(duì)變異鏈球菌合成水不溶性及水溶性胞外多糖能力的影響。模擬微重力組及對(duì)照組培養(yǎng)24h時(shí),分別收集模擬微重力及對(duì)照組菌液,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)方法檢測(cè)模擬微重力對(duì)變異鏈球菌的gtfsmrna表達(dá)的影響。本文獲得主要結(jié)果如下:1.模擬微重力組及對(duì)照組均生長(zhǎng)良好,具有靜止期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期,生長(zhǎng)曲線呈類(lèi)似“s”形。模擬微重力條件下變異鏈球菌培養(yǎng)2h~4h后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,約12h進(jìn)入平臺(tái)期;對(duì)照組在4h后才進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,16h進(jìn)入平臺(tái)期。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,模擬微重力組與對(duì)照組相比,2h、4h、6h、8h、10h和12h的od600nm值升高,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);16h、20h和24h的od600nm值無(wú)明顯變化,其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。掃描電鏡圖片顯示,與對(duì)照組相比,模擬微重力組變異鏈球菌有較明顯的形態(tài)學(xué)改變。對(duì)照組細(xì)菌形態(tài)規(guī)則,結(jié)構(gòu)完整,呈球桿狀,表面不光滑,菌體之間存在較多的不定形膠凍樣物質(zhì),模擬微重力組菌體表面較光滑,細(xì)菌間的不定形物質(zhì)明顯少于對(duì)照組。透射電鏡觀察可見(jiàn)微重力環(huán)境下變異鏈球菌的超微結(jié)構(gòu)有顯著改變。對(duì)照組可見(jiàn)細(xì)菌莢膜、細(xì)胞壁、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)清晰完整,形態(tài)正常,分裂后的細(xì)菌形態(tài)對(duì)稱;模擬微重力組細(xì)菌的莢膜部分減少,分裂狀態(tài)下的細(xì)菌兩極不對(duì)稱。2.培養(yǎng)24h時(shí),模擬微重力組及正常對(duì)照組的Δph的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。模擬微重力條件下變異鏈球菌合成水溶性和水不溶性胞外多糖的量均少于對(duì)照組細(xì)菌的產(chǎn)糖量,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),合成水溶性和水不溶性胞外多糖的能力較對(duì)照組相比均有明顯抑制,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3.模擬微重力環(huán)境下培養(yǎng)24h時(shí),變異鏈球菌gtfb,gtfc,gtfdmrna表達(dá)均明顯降低,與對(duì)照組之間均有顯著差異(p0.05)�；谝陨辖Y(jié)果,本文得出如下結(jié)論:1.模擬微重力環(huán)境下變異鏈球菌生長(zhǎng)的靜止期縮短,對(duì)數(shù)期提前,模擬微重力環(huán)境培養(yǎng)2h~12h時(shí)變異鏈球菌具有生長(zhǎng)加快的趨勢(shì)。模擬微重力環(huán)境下變異鏈球菌有較明顯的形態(tài)學(xué)改變。2.模擬微重力環(huán)境下培養(yǎng)24h時(shí),變異鏈球菌菌液的ph值無(wú)明顯變化,變異鏈球菌合成水溶性和水不溶性胞外多糖的能力受到明顯抑制。3.模擬微重力環(huán)境下培養(yǎng)24h時(shí),變異鏈球菌gtfB,gtfC,gtf D mRNA表達(dá)受到明顯的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：模擬微重力 變異鏈球菌 生長(zhǎng) 胞外多糖
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R781.1
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-16
• 實(shí)驗(yàn)一 模擬微重力對(duì)變異鏈球菌生長(zhǎng)及形態(tài)學(xué)的影響16-24
• 1 引言16
• 2 材料與方法16-19
• 3 結(jié)果19-21
• 4 討論21-23
• 5 結(jié)論23-24
• 實(shí)驗(yàn)二 模擬微重力對(duì)變異鏈球菌產(chǎn)酸及合成胞外多糖能力的影響24-32
• 1 引言24
• 2 材料與方法24-27
• 3 結(jié)果27-29
• 4 討論29-31
• 5 結(jié)論31-32
• 實(shí)驗(yàn)三 模擬微重力對(duì)變異鏈球菌gtfs mRNA表達(dá)的影響32-41
• 1 引言32
• 2 材料與方法32-36
• 3 結(jié)果36-38
• 4 討論38-40
• 5 結(jié)論40-41
• 全文總結(jié)41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 附錄47-49
• 致謝49-50
• 綜述50-57
• 參考文獻(xiàn)55-57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 周學(xué)東,黃正蔚,李繼遙,肖悅,劉天佳;黃芩對(duì)三種主要致齲菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸及產(chǎn)胞外多糖的影響[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年03期

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  本文關(guān)鍵詞：模擬微重力對(duì)變異鏈球菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸及合成胞外多糖影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：417643