目的探討酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2 interacting protein-1,CKIP-1)對人牙周膜干細胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化能力的影響。方法收集正常人牙周膜組織,通過組織塊培養(yǎng)法分離培養(yǎng)hPDLSCs,將P4代細胞分為空白對照組、陰性對照組(感染對照載體)、CKIP-1siRNA慢病毒組(感染CKIP-1 siRNA慢病毒)以及CKIP-1組(感染CKIP-1過表達慢病毒)。對各組細胞進行成骨誘導培養(yǎng)21 d,茜素紅染色觀察細胞礦化結(jié)節(jié)形成情況,并用分光光度計法對礦化結(jié)節(jié)進行定量分析,同時利用qPCR技術(shù)檢測各組Runt相關轉(zhuǎn)錄因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨鈣素(osteocalcin,OCN)、核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)等...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 hPDLSCs原代培養(yǎng)
        1.2.2 hPDLSCs鑒定
        1.2.3 分組及慢病毒感染
        1.2.4 茜素紅染色及礦化結(jié)節(jié)的定量分析
        1.2.5 qPCR檢測成骨調(diào)控因子和BMP信號通路相關因子mRNA水平
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 hPDLSCs的鑒定
    2.2 慢病毒感染后hPDLSCs的CKIP-1 mRNA水平
    2.3 慢病毒感染后對hPDLSCs成骨分化能力的影響
    2.4 成骨相關調(diào)控因子水平
    2.5 BMP信號通路檢測
3 討論



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