牙齦卟啉菌(Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis，簡(jiǎn)稱(chēng)Pg)是牙周炎的重要優(yōu)勢(shì)致病菌，牙齦蛋白酶是P.gingivalis的重要致病因子。牙齦蛋白酶K(gingipain K，簡(jiǎn)稱(chēng)KGP)基因全長(zhǎng)由6.4Kbp組成，前22個(gè)氨基酸為信號(hào)肽，接下來(lái)23～229殘基是N-端前序列，230～739個(gè)氨基酸為成熟肽蛋白酶結(jié)構(gòu)域(KGPcd)，740～1723的氨基酸為β亞單位即凝集素結(jié)構(gòu)域。KGPcd為KGP的生物活性部分，β亞單位其保守的位點(diǎn)幾乎存在于所有P.gingivalis，并具有粘附、凝集功能。由于近年來(lái)分子生物學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展，牙齦蛋白酶基因已被克隆和測(cè)序，對(duì)其蛋白質(zhì)分子中的各個(gè)功能區(qū)、抗原表位及相應(yīng)的編碼基因片段已有了更深入的了解，為研制疫苗提供了可靠的依據(jù)。 本課題為研究基因免疫在預(yù)防牙周炎中的作用，采用分子生物學(xué)技術(shù)，對(duì)P.gingivalis KGPcd進(jìn)行了克隆、原核表達(dá)和純化，并制備了抗KGPcd抗體；同時(shí)構(gòu)建KGPcd真核表達(dá)質(zhì)粒，并免疫SD大鼠，觀察其在防治牙周炎中的作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：KGPcd可作為基因候選疫苗，有減...

【文章頁(yè)數(shù)】：108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
正文
    第一部分 P.gingivalis KGPcd基因克隆、表達(dá)、純化及抗體制備
        1 kgpcd基因克隆及其序列分析
        2 KGPcd在大腸桿菌中的表達(dá)
        3 抗KGPcd抗體的制備
    第二部分 KGPcd基因疫苗的制各及預(yù)防牙周炎的實(shí)驗(yàn)研究
        1 真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)
        2 pcDNA3.1(+)／kgpcd免疫原性研究
        3 基因疫苗預(yù)防牙周炎的實(shí)驗(yàn)研究
全文總結(jié)
簡(jiǎn)歷和發(fā)表文章
致謝
附錄



本文編號(hào)：3982020