牙齦卟啉菌(Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis，簡稱Pg)是牙周炎的重要優(yōu)勢致病菌，牙齦蛋白酶是P.gingivalis的重要致病因子。牙齦蛋白酶K(gingipain K，簡稱KGP)基因全長由6.4Kbp組成，前22個氨基酸為信號肽，接下來23～229殘基是N-端前序列，230～739個氨基酸為成熟肽蛋白酶結(jié)構(gòu)域(KGPcd)，740～1723的氨基酸為β亞單位即凝集素結(jié)構(gòu)域。KGPcd為KGP的生物活性部分，β亞單位其保守的位點幾乎存在于所有P.gingivalis，并具有粘附、凝集功能。由于近年來分子生物學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展，牙齦蛋白酶基因已被克隆和測序，對其蛋白質(zhì)分子中的各個功能區(qū)、抗原表位及相應(yīng)的編碼基因片段已有了更深入的了解，為研制疫苗提供了可靠的依據(jù)。 本課題為研究基因免疫在預(yù)防牙周炎中的作用，采用分子生物學(xué)技術(shù)，對P.gingivalis KGPcd進行了克隆、原核表達和純化，并制備了抗KGPcd抗體；同時構(gòu)建KGPcd真核表達質(zhì)粒，并免疫SD大鼠，觀察其在防治牙周炎中的作用，實驗結(jié)果表明：KGPcd可作為基因候選疫苗，有減...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
正文
    第一部分 P.gingivalis KGPcd基因克隆、表達、純化及抗體制備
        1 kgpcd基因克隆及其序列分析
        2 KGPcd在大腸桿菌中的表達
        3 抗KGPcd抗體的制備
    第二部分 KGPcd基因疫苗的制各及預(yù)防牙周炎的實驗研究
        1 真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及其在哺乳動物細胞中的表達
        2 pcDNA3.1(+)／kgpcd免疫原性研究
        3 基因疫苗預(yù)防牙周炎的實驗研究
全文總結(jié)
簡歷和發(fā)表文章
致謝
附錄



本文編號：3982020