促進(jìn)牙髓干細(xì)胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化與極化是組織工程牙再生的重要研究內(nèi)容。在牙本質(zhì)再生研究中,DPSCs的分化與極化決定了再生牙本質(zhì)的組織結(jié)構(gòu),進(jìn)而影響再生牙本質(zhì)發(fā)揮機(jī)械性能和傳導(dǎo)刺激信號等生理功能。目前尚缺乏有效促進(jìn)DPSCs分化與極化的牙本質(zhì)再生生物材料。在組織工程研究中,材料的微觀形貌在調(diào)控種子細(xì)胞的生物學(xué)行為并影響再生組織的組織結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用。具有管狀微結(jié)構(gòu)的材料因含有開放的通道并能誘導(dǎo)種子細(xì)胞生長和分化而被用于再生具有相似結(jié)構(gòu)的組織。牙本質(zhì)是一種含有密集排列的天然管狀結(jié)構(gòu)(牙本質(zhì)小管)的硬組織,研究其管狀結(jié)構(gòu)在生理環(huán)境下的功能及其對DPSCs形態(tài)和功能的影響,將有望以牙本質(zhì)為基礎(chǔ)形成具有調(diào)控種子細(xì)胞形態(tài)和功能的生物材料,進(jìn)而對組織工程牙本質(zhì)再生產(chǎn)生重要意義。鑒于以上,在第二章中我們首先研究了生理環(huán)境下的牙本質(zhì)管狀結(jié)構(gòu)在促進(jìn)修復(fù)性牙本質(zhì)形成中對藥物的傳導(dǎo)作用。實(shí)驗(yàn)將負(fù)載攜帶人BMP2基因的重組腺病毒(AdCMV-hBMP2)明膠海綿置于大鼠磨牙近髓窩洞內(nèi),觀察牙本質(zhì)小管傳導(dǎo)AdCMV-hBMP2轉(zhuǎn)染牙髓細(xì)胞的能力以及促進(jìn)修復(fù)性牙本質(zhì)...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2.1AdCMV-EGFP轉(zhuǎn)染大鼠牙髓1天和3天后綠熒光蛋白的表達(dá)

圖2.1AdCMV-EGFP轉(zhuǎn)染大鼠牙髓1天和3天后綠熒光蛋白的表達(dá)。2.4.2AdCMV-hBMP2轉(zhuǎn)染牙髓細(xì)胞促進(jìn)修復(fù)性牙本質(zhì)形成取實(shí)驗(yàn)組與對照組大鼠上頜骨，脫鈣并常規(guī)HE切片觀察。我們發(fā)現(xiàn)，在第7天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組磨牙髓腔側(cè)已經(jīng)形成薄層修復(fù)性牙本質(zhì)，其表面....

圖2.2轉(zhuǎn)染AdCMV-hBMP2和AdCMV-EGFP后髓腔內(nèi)形成修復(fù)性牙本質(zhì)的組織學(xué)表現(xiàn)

僅在牙本質(zhì)髓腔側(cè)表面小范圍內(nèi)形成了局灶性的修復(fù)性牙本質(zhì)（圖2.2A,E）。術(shù)后14天時(shí)，在實(shí)驗(yàn)組中所形成的修復(fù)性牙本質(zhì)面積明顯增加，以窩洞制備區(qū)域?qū)?yīng)的髓角處最厚�？梢娧辣举|(zhì)小管形成，但數(shù)量較少，且排列紊亂（圖2.2D,H）。在對照組中，髓角處形成的修復(fù)性牙本質(zhì)也增多，....

圖2.3牙髓暴露時(shí)轉(zhuǎn)染AdCMV-hBMP2的大鼠牙髓表面修復(fù)性牙本質(zhì)形成情況

驗(yàn)分別在第7天和第14天時(shí)通過HE切片觀察大鼠髓腔內(nèi)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的面積和組織形態(tài)。在轉(zhuǎn)染第7天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組髓腔側(cè)已經(jīng)出現(xiàn)新生的修復(fù)性牙本質(zhì)層，這些牙本質(zhì)中含有成牙本質(zhì)細(xì)胞，為骨樣牙本質(zhì)。而對照組中僅在髓腔局部形成了少量修復(fù)性牙本質(zhì)。這提示所轉(zhuǎn)染的hBMP2已....

圖3.1第二代DPSCs形態(tài)觀察

3.2.10統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)按照均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示，采用單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1DPSCs培養(yǎng)與鑒定利用酶消化法聯(lián)合倒置貼壁法分離DPSCs，在組織培養(yǎng)24小時(shí)后于培養(yǎng)瓶底即可見少量單細(xì)胞....

本文編號：3978479