目的:牙髓干細胞(dental pulp stem cells,DPSCs)是存在于牙髓組織中的未分化或低分化的成體干細胞,具有一定的增殖能力和分化潛能,在一定條件下,可分化為成骨細胞、成牙本質細胞樣細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等。臨床上深齲、磨損等慢性損傷誘導DPSCs遷移至損傷部位,分化成為成牙本質細胞樣細胞,產生修復性牙本質以保護牙髓。組蛋白甲基化調控的表觀遺傳修飾在調控成骨分化方面起著重要作用,含十字形結構域蛋白-3(Jumonji domain-containing3,Jmjd3),是一種高度特異性的組蛋白去甲基化酶,主要功能是使組蛋白H3第27位賴氨酸殘基(H3K27)脫甲基以激活基因轉錄。大量研究表明,Jmjd3調節(jié)多種細胞的成骨分化,但對Jmjd3是否參與DPSCs的成牙本質向分化了解甚少。NF-κB(Nuclear Factor-kappa B)是一種普遍存在的轉錄因子,廣泛參與免疫、炎癥、腫瘤、分化等生理病理過程。研究發(fā)現(xiàn),NF-κB在炎癥、腫瘤、創(chuàng)傷中可以誘導Jmjd3的表達,但其在分化中是否能調節(jié)Jmjd3的表達尚無報道。本研究以DPSCs為主要研究對象,檢測Jmj...

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 儀器設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 DPSCs的分離提取
        2.2.2 細胞培養(yǎng)與成牙本質分化誘導
        2.2.3 流式細胞術
        2.2.4 成骨分化鑒定
        2.2.5 成神經分化鑒定
        2.2.7 ALP染色
        2.2.8 細胞轉染
        2.2.9 RNA提取、反轉錄及q PCR
        2.2.10 Western Blot
    2.3 統(tǒng)計分析
3 實驗結果
    3.1 DPSCs的提取及鑒定
        3.1.1 DPSCs的原代分離培養(yǎng)
        3.1.2 流式細胞術鑒定細胞表面標記物
        3.1.3 DPSCs多向分化
    3.2 Jmjd3在DPSCs成牙本質向分化過程中表達上調
        3.2.1 DPSCs向成牙本質細胞樣細胞分化
        3.2.2 分化過程中Jmjd3的表達上調
    3.3 Jmjd3 活性抑制劑GSK-J4 抑制DPSCs的成牙本質向分化
        3.3.1 DSPP、DMP1 表達下調
        3.3.2 DPSCs的礦化水平降低
    3.4 NF-κB對 Jmjd3 表達及DPSCs成牙本質向分化的影響
        3.4.1 分化激活NF-κB信號通路
        3.4.2 BAY11-7082 促進Jmjd3 表達及DPSCs成牙本質向分化
        3.4.3 沉默NF-κB p65 促進Jmjd3 表達及DPSCs成牙本質向分化
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究結果
致謝
個人簡歷



本文編號：3978306