目的:牙髓干細(xì)胞(dental pulp stem cells,DPSCs)是存在于牙髓組織中的未分化或低分化的成體干細(xì)胞,具有一定的增殖能力和分化潛能,在一定條件下,可分化為成骨細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等。臨床上深齲、磨損等慢性損傷誘導(dǎo)DPSCs遷移至損傷部位,分化成為成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞,產(chǎn)生修復(fù)性牙本質(zhì)以保護(hù)牙髓。組蛋白甲基化調(diào)控的表觀遺傳修飾在調(diào)控成骨分化方面起著重要作用,含十字形結(jié)構(gòu)域蛋白-3(Jumonji domain-containing3,Jmjd3),是一種高度特異性的組蛋白去甲基化酶,主要功能是使組蛋白H3第27位賴(lài)氨酸殘基(H3K27)脫甲基以激活基因轉(zhuǎn)錄。大量研究表明,Jmjd3調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的成骨分化,但對(duì)Jmjd3是否參與DPSCs的成牙本質(zhì)向分化了解甚少。NF-κB(Nuclear Factor-kappa B)是一種普遍存在的轉(zhuǎn)錄因子,廣泛參與免疫、炎癥、腫瘤、分化等生理病理過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn),NF-κB在炎癥、腫瘤、創(chuàng)傷中可以誘導(dǎo)Jmjd3的表達(dá),但其在分化中是否能調(diào)節(jié)Jmjd3的表達(dá)尚無(wú)報(bào)道。本研究以DPSCs為主要研究對(duì)象,檢測(cè)Jmj...

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 DPSCs的分離提取
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)與成牙本質(zhì)分化誘導(dǎo)
        2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)
        2.2.4 成骨分化鑒定
        2.2.5 成神經(jīng)分化鑒定
        2.2.7 ALP染色
        2.2.8 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.9 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及q PCR
        2.2.10 Western Blot
    2.3 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 DPSCs的提取及鑒定
        3.1.1 DPSCs的原代分離培養(yǎng)
        3.1.2 流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面標(biāo)記物
        3.1.3 DPSCs多向分化
    3.2 Jmjd3在DPSCs成牙本質(zhì)向分化過(guò)程中表達(dá)上調(diào)
        3.2.1 DPSCs向成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞分化
        3.2.2 分化過(guò)程中Jmjd3的表達(dá)上調(diào)
    3.3 Jmjd3 活性抑制劑GSK-J4 抑制DPSCs的成牙本質(zhì)向分化
        3.3.1 DSPP、DMP1 表達(dá)下調(diào)
        3.3.2 DPSCs的礦化水平降低
    3.4 NF-κB對(duì) Jmjd3 表達(dá)及DPSCs成牙本質(zhì)向分化的影響
        3.4.1 分化激活NF-κB信號(hào)通路
        3.4.2 BAY11-7082 促進(jìn)Jmjd3 表達(dá)及DPSCs成牙本質(zhì)向分化
        3.4.3 沉默NF-κB p65 促進(jìn)Jmjd3 表達(dá)及DPSCs成牙本質(zhì)向分化
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究結(jié)果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3978306