目的:將自行構(gòu)建的質(zhì)粒載體pcDNA3.1-h OPG,通過體內(nèi)轉(zhuǎn)染,評價OPG直接基因轉(zhuǎn)染療法對大鼠實驗性牙周炎牙槽骨吸收的影響,為牙周炎以及種植體周炎的生物治療提供實驗依據(jù)。方法:將30只SD大鼠隨機分為3組,即Ⅰ組生理鹽水組(n=10,1 00μg/只)、Ⅱ組pcDNA3.1(-)組(n=10,100μg/只)、Ⅲ組pcDNA3.1-hOPG組(n=10,100μg/只)。通過絲線結(jié)扎、接種牙周炎可疑致病菌、喂高糖軟食誘發(fā)實驗性牙周炎。結(jié)扎28d后處死,通過大體標本、組織學等觀察牙槽骨吸收、OPG及破骨細胞變化。結(jié)果:Ⅲ組結(jié)扎側(cè)OPG表達強度增加,牙槽骨吸收量減少(P<0.05),活化破骨細胞數(shù)降低(P<0.05)。結(jié)論:OPG重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,減少破骨細胞數(shù)量,有效減緩實驗性牙周炎引起的牙槽骨吸收破壞。

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圖3重組質(zhì)粒翻序圖

圖10oPG基因表達量比較

四川大學華西口腔醫(yī)學院博士學位論文表3三組Ct值比較Table3CtnumbereomParisonbetweendifferentgrouPs標本空白組空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組OPG質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組OPGCtGAPDHCt△Ct23.524.514.5l616.58.5一3.5轉(zhuǎn)染48h....

圖13骨吸收陷窩電鏡圖

圖12破骨細胞誘導培養(yǎng)A:培養(yǎng)第3d，相差顯微鏡下見橢圓多核巨細胞出現(xiàn)“t’’(x40);B:培養(yǎng)第10d，細胞爬片TRAP染色多核破骨細胞胞漿呈紅色陽性反應(yīng)“T’’，胞核陰性(‘100)C:高倍卜，見胞漿為紅色不溶性沉淀，胞內(nèi)空泡為未復(fù)染的細胞核，多達數(shù)十個(‘400)。ig.....

圖17三組間4種染色比較(x40)

A:空白組(牙槽骨明顯吸收，RANKL高表達，oPG低表達，較多破骨細胞)B:空白質(zhì)粒組(牙槽骨明顯吸收，RANKL高表達，OPG低表達，較多破骨細胞)C:OPG質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(牙槽骨無明顯吸收，OPG高表達，RANKL低表達，破骨細胞數(shù)相比I、n組明顯減少)Fig.17H....

本文編號：3950415