發(fā)布時間：2024-03-23 15:57

　　牙齒的發(fā)育礦化是上皮和間充質(zhì)相互作用的結(jié)果，研究表明，眾多的基因參與了牙齒的發(fā)育礦化過程，包括生長因子及其受體、信號分子、轉(zhuǎn)錄因子和細胞外基質(zhì)蛋白等。轉(zhuǎn)錄因子是一類可以通過與下游靶DNA結(jié)合，從而調(diào)控下游基因轉(zhuǎn)錄的分子，它們接受來自生長因子等方面的信號，再將這些指令具體地傳遞給直接執(zhí)行功能的蛋白分子。cbfal是一種成骨分化特異性轉(zhuǎn)錄因子，可以誘導(dǎo)成骨前體細胞合成和分泌ALP、OC、OPN、BSP等礦化相關(guān)蛋白，向成骨細胞分化。最近國外學(xué)者發(fā)現(xiàn)cbfa1在牙齒發(fā)育過程有表達；基因敲出的小鼠不僅全身骨發(fā)育異常，還出現(xiàn)牙齒發(fā)育障礙，而且牙齒特異的成釉蛋白基因的啟動子上也發(fā)現(xiàn)了cbfa1結(jié)合位點。本課題采用細胞培養(yǎng)、PCR、基因重組、基因轉(zhuǎn)染、免疫組織化學(xué)、反義核酸等方法研究cbfa1在牙齒發(fā)育礦化中的作用，在牙乳頭細胞中探討幾種生長因子對cbfa1的作用以及cbfa1對礦化相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控，從而在轉(zhuǎn)錄水平闡明牙齒發(fā)育礦化的分子調(diào)控機制，為進一步研究奠定基礎(chǔ)。 首先我們從小鼠牙胚組織中成功地克隆到了小鼠cbfa1全部編碼區(qū)，約1.7kb，進一步證實了cbfa1在牙胚組織中的存在；根...

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
    綜述一 牙胚發(fā)生和形成的分子機制
    綜述二 成牙本質(zhì)細胞分化的分子機制
    綜述三 核心結(jié)合因子a1的研究進展
研究內(nèi)容
    第一部分 核心結(jié)合因子a1的cDNA克隆、蛋白表達和多克隆抗體的制備
        實驗一 小鼠核心結(jié)合因子a1成熟肽編碼區(qū)的cDNA克隆及序列分析
        實驗二 小鼠核心結(jié)合因子a1部分編碼區(qū)在大腸桿菌中的表達和純化
        實驗三 小鼠核心結(jié)合因子a1多克隆抗體的制備和鑒定
    第二部分 核心結(jié)合因子a1在牙齒組織和細胞中的表達
        實驗一 核心結(jié)合因子a1在牙胚發(fā)育過程中的表達
        實驗二 核心結(jié)合因子a1在人牙乳頭細胞中的免疫組織化學(xué)研究
    第三部分 核心結(jié)合因子a1對牙乳頭細胞作用機制的研究
        實驗一 穩(wěn)定表達核心結(jié)合因子a1的人牙乳頭細胞模型的建立和鑒定
        實驗二 核心結(jié)合因子a1對牙乳頭細胞增殖和礦化能力的影響
        實驗三 核心結(jié)合因子a1對牙乳頭細胞表達細胞外基質(zhì)蛋白的影響
    第四部分 幾種生長因子對核心結(jié)合因子a1的調(diào)控機制
        實驗一 幾種生長因子對體外培養(yǎng)的牙乳頭細胞表達核心結(jié)合因子a1的研究
        實驗二 核心結(jié)合因子a1在BMP₂調(diào)控細胞外基質(zhì)蛋白表達中的作用
全文總結(jié)
展望
致謝
課題完成所在實驗室情況
簡歷
參考文獻
附圖



本文編號：3936148