第一部分TCDD致胎鼠腭裂miR-381-3p的下調(diào)抑制MEPM細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究目的:檢測(cè)TCDD致胎鼠腭裂模型中miR-381-3p的表達(dá)變化,并探討其是否與TCDD抑制胎鼠腭間充質(zhì)細(xì)胞(mouse embryonic palatal mesenchymal(MEPM)cells)成骨分化相關(guān)。方法:使用隨機(jī)數(shù)字表將32只孕鼠在胚胎日第10.5天(embryonic day10.5,E10.5)完全隨機(jī)分為對(duì)照組和TCDD組,TCDD處理組在胚胎日第10.5天時(shí),給予孕鼠TCDD(28μg/kg)一次性灌胃,對(duì)照組孕鼠同樣根據(jù)體重給予相同體積的玉米油一次性灌胃。兩組在E13.5和E14.5分別從孕鼠子宮內(nèi)取出胎鼠剪取腭突組織,用于提取組織miRNAs和總蛋白。MEPM細(xì)胞在體外用含TCDD10nmol/L的完全培養(yǎng)基處理第0、0.5、1、2和3天后分別提取細(xì)胞miRNAs和總蛋白。MEPM細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-381-3p抑制物(inhibitor)和模擬物(mimics)48h后分別提取細(xì)胞miRNAs和總蛋白。miR-381-3p在腭突組織和MEPM細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量使用實(shí)時(shí)熒光...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1E13.4和E14.5對(duì)照組與TCDD組胎鼠腭部形態(tài)學(xué)表現(xiàn)（放大20倍）箭頭指向腭中線

注：P表示完整腭部，表示兩側(cè)腭突間隙Pindicatethecompletefusionpalate,indicatethegapbetweentwosidepalates圖1-1E13.4和E14.5對(duì)照組與TCDD組胎鼠腭部形態(tài)學(xué)表....

圖1-2E13.4和E14.5時(shí)miR-381-3p在TCDD組和對(duì)照組(control)腭突組織的表達(dá)量

13.4和E14.5時(shí)miR-381-3p在TCDD組和對(duì)照組(control)腭突組織的表達(dá)量TCDD組與相同時(shí)間對(duì)照組比較P值＜0.05-2RelativeexpressionofmiR-381-3pinTCDDandcontrolgro....

圖1-3E14.5時(shí)，RUNX2和OPN蛋白在TCDD組和對(duì)照組(control)腭突組織表達(dá)量

了解TCDD是否對(duì)腭骨發(fā)育有抑制作用。E14.5，TCDD組RUNX2蛋白在突表達(dá)量為0.69±0.06較對(duì)照組1.0±0.05下降（P＜0.05），OPN蛋白表6±0.03亦低于對(duì)照組1.0±0.03下降（P＜0.01）見圖1-3。

圖1-4TCDD(10nmol/L)處理MEPM細(xì)胞0、0.5、1、2和3天后miR-381-3p相對(duì)表達(dá)量變化

（P＜0.01）；第2天和第3天表達(dá)回升至對(duì)照組（第0天）水平甚至高（P＞0.05）。由此可見，MEPM細(xì)胞受到TCDD干擾后miR-381降后回升至正常水平。見圖1-4。

本文編號(hào)：3934286