發(fā)布時(shí)間：2024-03-21 00:56

　　[目的]：探討牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis, P. g)上清液對(duì)體外培養(yǎng)的兔血管平滑肌細(xì)胞(Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs)增殖和遷移的影響以及對(duì)VSMCs合成分泌IL-1β、IL-6的影響,為研究牙周病與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 [方法]：采用組織貼塊法進(jìn)行VSMCs的原代培養(yǎng),用α-Actin肌動(dòng)蛋白免疫組化染色及透射電鏡進(jìn)行細(xì)胞鑒定,在培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)加入原倍以及稀釋1/2,1/4,1/8,1/16,1/32濃度的P.g上清液,MTT法檢測(cè)不同濃度的P.g上清液對(duì)VSMCs增殖的影響。根據(jù)MTT結(jié)果選擇濃度為4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VMSCs,在分別培養(yǎng)12h,24h,48h后,使用ELISA檢測(cè)培養(yǎng)液上清中的IL-1β、IL-6水平。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,在培養(yǎng)12h,24h,48h后,進(jìn)行RT-PCR,觀察IL-1β、IL-6的表達(dá)情況。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,用爬片法檢測(cè)7d內(nèi)P.g上清對(duì)VSMCs遷移的影響。對(duì)結(jié)...

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.P.g在BHI液中增菌24h后培養(yǎng)液變渾濁

圖3.P.g在BHI液中增菌24h后培養(yǎng)液變渾濁。.原代培養(yǎng)的兔VSMCS的形態(tài)觀察及細(xì)胞鑒定胞形態(tài)觀察:原代取材sd一7d后在倒置顯微鏡下觀察，可見組織塊周圍有細(xì)胞游形態(tài)為長(zhǎng)梭形或多角形，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，可見2一3個(gè)核仁(見圖續(xù)培養(yǎng)可見細(xì)胞復(fù)層分布，并向組織塊周圍擴(kuò)散(見圖....

圖10.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或多角

圖10.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或多角圖11.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細(xì)胞來(lái)源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細(xì)胞，抗肌動(dòng)蛋白a一Actin染色，大部份細(xì)胞胞核為藍(lán)色，長(zhǎng)梭形胞漿染為棕色，為陽(yáng)性反應(yīng)....

圖11.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)

圖10.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或多角圖11.細(xì)胞爬片HE染色，細(xì)胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細(xì)胞來(lái)源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細(xì)胞，抗肌動(dòng)蛋白a一Actin染色，大部份細(xì)胞胞核為藍(lán)色，長(zhǎng)梭形胞漿染為棕色，為陽(yáng)性反應(yīng)....

圖12，抗肌動(dòng)蛋白a一Actin染色陽(yáng)性，胞漿為棕色

細(xì)胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細(xì)胞來(lái)源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細(xì)胞，抗肌動(dòng)蛋白a一Actin染色，大部份細(xì)胞胞核為藍(lán)色，長(zhǎng)梭形胞漿染為棕色，為陽(yáng)性反應(yīng)。提示所培養(yǎng)的細(xì)胞為平滑肌細(xì)胞，結(jié)合原代取材部位，可以證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)....

本文編號(hào)：3933574