目的:牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)作為一種關(guān)鍵的牙周致病菌,被認(rèn)為是動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)形成的促進(jìn)因素之一。我們前期研究發(fā)現(xiàn)P.gingivalis通過上調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞中巨噬細(xì)胞移動抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)的分泌,促進(jìn)細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1)的表達(dá)及單核-內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,且MIF的受體CD74和CXCR4均影響ICAM-1表達(dá)和單核-內(nèi)皮細(xì)胞黏附。提示MIF可能通過與受體CD74或CXCR4結(jié)合而參與P.gingivalis增強血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附活性的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)。本研究擬進(jìn)一步探索CD74和CXCR4與MIF之間的相互作用關(guān)系及P.gingivalis、CXCR4對血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)特性的影響,旨在闡明P.gingivalis感染增加內(nèi)皮細(xì)胞黏附活性的機制,探討P.gingivalis影響AS發(fā)生的可能途徑。方法:細(xì)胞免疫熒光染色法檢測P....

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3免疫共沉淀分析CD74/CXCR4受體復(fù)合體的形成

圖2RNA干擾效率檢測質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后EA.hy926細(xì)胞中CXCR4的表達(dá)情況。與NC組相比，shRNA組CXCR4表達(dá)明顯降低（P﹤0.05），NC組與對照組表達(dá)無明顯差異。A：qRT-PCR分析CXCR4的mRNA表達(dá)水平；B：Westernb....

圖2RNA干擾效率檢測

圖2RNA干擾效率檢測質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后EA.hy926細(xì)胞中CXCR4的表達(dá)情況。與NC組相比，shRNA組CXCR4表達(dá)明顯降低（P﹤0.05），NC組與對照組表達(dá)無明顯差異。A：qRT-PCR分析CXCR4的mRNA表達(dá)水平；B：Westernb....

圖4CCK-8法檢測P.gingivalis感染前后對照/NC/shRNA組細(xì)胞的增殖

.240±0.073），細(xì)胞死亡明顯增加，與NC組（1.854±0.019）相（P﹤0.05）。方差分析P.gingivalis與CXCR4沉默兩處理因素間的交互作用充分證據(jù)認(rèn)為二者間存在交互作用影響血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能義（F=0，P=0.997﹥0.05，表1....

圖5流式細(xì)胞儀分析對照/NC/shRNA組細(xì)胞周期分布情況

gingivalis感染細(xì)胞模型（MOI=100），檢測450nm處的OD值，繪制細(xì)胞增殖無明顯差異，54h時shRNA組細(xì)胞進(jìn)入平臺期，68h時對照臺期。與對照組相比，P.gingivalis感染使EA.hy926細(xì)胞增殖減慢；沉默使shRN....

本文編號：3929847