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牙齦卟啉單胞菌對血管內(nèi)皮細胞黏附活性和生物學特性的影響及機制探討

發(fā)布時間:2024-03-16 17:03
  目的:牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)作為一種關鍵的牙周致病菌,被認為是動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)形成的促進因素之一。我們前期研究發(fā)現(xiàn)P.gingivalis通過上調(diào)血管內(nèi)皮細胞中巨噬細胞移動抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)的分泌,促進細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1)的表達及單核-內(nèi)皮細胞的黏附,且MIF的受體CD74和CXCR4均影響ICAM-1表達和單核-內(nèi)皮細胞黏附。提示MIF可能通過與受體CD74或CXCR4結合而參與P.gingivalis增強血管內(nèi)皮細胞黏附活性的細胞內(nèi)信號傳導。本研究擬進一步探索CD74和CXCR4與MIF之間的相互作用關系及P.gingivalis、CXCR4對血管內(nèi)皮細胞生物學特性的影響,旨在闡明P.gingivalis感染增加內(nèi)皮細胞黏附活性的機制,探討P.gingivalis影響AS發(fā)生的可能途徑。方法:細胞免疫熒光染色法檢測P....

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖3免疫共沉淀分析CD74/CXCR4受體復合體的形成

圖3免疫共沉淀分析CD74/CXCR4受體復合體的形成

圖2RNA干擾效率檢測質(zhì)粒轉染后EA.hy926細胞中CXCR4的表達情況。與NC組相比,shRNA組CXCR4表達明顯降低(P﹤0.05),NC組與對照組表達無明顯差異。A:qRT-PCR分析CXCR4的mRNA表達水平;B:Westernb....


圖2RNA干擾效率檢測

圖2RNA干擾效率檢測

圖2RNA干擾效率檢測質(zhì)粒轉染后EA.hy926細胞中CXCR4的表達情況。與NC組相比,shRNA組CXCR4表達明顯降低(P﹤0.05),NC組與對照組表達無明顯差異。A:qRT-PCR分析CXCR4的mRNA表達水平;B:Westernb....


圖4CCK-8法檢測P.gingivalis感染前后對照/NC/shRNA組細胞的增殖

圖4CCK-8法檢測P.gingivalis感染前后對照/NC/shRNA組細胞的增殖

.240±0.073),細胞死亡明顯增加,與NC組(1.854±0.019)相(P﹤0.05)。方差分析P.gingivalis與CXCR4沉默兩處理因素間的交互作用充分證據(jù)認為二者間存在交互作用影響血管內(nèi)皮細胞的增殖能義(F=0,P=0.997﹥0.05,表1....


圖5流式細胞儀分析對照/NC/shRNA組細胞周期分布情況

圖5流式細胞儀分析對照/NC/shRNA組細胞周期分布情況

gingivalis感染細胞模型(MOI=100),檢測450nm處的OD值,繪制細胞增殖無明顯差異,54h時shRNA組細胞進入平臺期,68h時對照臺期。與對照組相比,P.gingivalis感染使EA.hy926細胞增殖減慢;沉默使shRN....



本文編號:3929847

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