發(fā)布時(shí)間：2024-03-04 04:39

　　目的:本研究旨在探討乏氧狀態(tài)下循環(huán)張應(yīng)力誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞(h PDLCs)增殖和成骨分化的影響及其發(fā)生機(jī)制。材料與方法:收集青少年(年齡12-18歲)因正畸需要而拔除的健康雙尖牙。刮取牙根中1/3牙周膜組織,組織塊法培養(yǎng)原代細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)分為四組:分別是常氧組(對(duì)照組)、常氧加力組、乏氧組和乏氧加力組。使用CO2三氣培養(yǎng)箱使細(xì)胞生活在20%O2、5%CO2、75%N2的常氧環(huán)境中,或2%O2、5%CO2、93%N2的乏氧環(huán)境中。胰蛋白酶消化后接種至FX-5000?張應(yīng)力加載裝置中的Bio Flex?細(xì)胞加力板中培養(yǎng)。細(xì)胞粘附生長(zhǎng)匯集至80%后開始循環(huán)張應(yīng)力(CTS)的加載,加載參數(shù)為:細(xì)胞被拉長(zhǎng)10%,頻率0.5 Hz,加載時(shí)間12、24和48 h。檢測(cè)指標(biāo)為:1)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),2)透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu);3)低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)和成骨相關(guān)因素(OPN,RUNX2,OSX)的表達(dá)情況;4)MAPK信號(hào)通路分子的表達(dá)情況結(jié)果:CTS作用12 h后h PDLCs的排列即發(fā)生了變化,細(xì)胞隨CTS的方向重新定向,細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量在各組中無顯著差異。透射電鏡觀察...

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圖1hPDLCs來源鑒定

圖1hPDLCs來源鑒定（A抗波形絲蛋白抗體陽(yáng)性；B抗角蛋白抗體陰性200×）倒置顯微鏡下觀察到CTS作用12h后hPDLCs的排列即發(fā)生了變化，拉伸的細(xì)胞隨著CTS的方向重新定向，細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量在各組中沒有顯著差異（圖2）。

圖2乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)hPDLCs的形態(tài)影響

（A抗波形絲蛋白抗體陽(yáng)性；B抗角蛋白抗體陰性200×）倒置顯微鏡下觀察到CTS作用12h后hPDLCs的排列即發(fā)生了變化，拉伸的細(xì)胞隨著CTS的方向重新定向，細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量在各組中沒有顯著差異（圖2）。圖2乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)hPDLCs的形態(tài)影響（倒置顯微....

圖3乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響

且CTS加載后線粒體腫大和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張更為顯著，其程度以乏氧加力組最為顯著，細(xì)胞線粒體呈現(xiàn)空泡化（圖3）。圖3乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響（電鏡觀察乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響。A常氧組（對(duì)照組）；B常氧加力組；C乏氧組；D乏氧加力組。M線粒體....

圖1乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)hPDLCs增殖的影響

34圖1乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)hPDLCs增殖的影響（流式細(xì)胞儀觀察乏氧狀態(tài)下CTS對(duì)hPDLCs增殖的影響。A常氧組（對(duì)照組）；B常氧加力組；C乏氧組；D乏氧加力組。**p<0.01和***p<0.001實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較。###p<....

本文編號(hào)：3918912