各種原因引起的牙槽骨吸收萎縮是口腔醫(yī)學領(lǐng)域最常見的臨床表現(xiàn)之一，不僅影響顏面美觀，咀嚼、發(fā)音和進食功能以及后續(xù)的義齒修復，還嚴重影響患者的身心健康。目前存在的治療牙槽骨吸收和萎縮的方法有：自體或異體骨移植、骨替代物移植、干細胞組織工程骨以及應(yīng)用牽張成骨技術(shù)等。但是因為自體骨來源有限，異體骨移植可引起免疫排斥反應(yīng)和其他疾病的風險；骨替代物移植和干細胞組織工程骨成骨能力有限；牽張成骨技術(shù)價格昂貴、技術(shù)復雜等問題，因此希望尋找一種安全、有效、簡便、易行的方法來治療牙槽骨的吸收萎縮。 目前，應(yīng)用骨形成蛋白（BMP）促進萎縮的牙槽骨成骨能力已經(jīng)取得了一定的進展，但是由于體內(nèi)應(yīng)用其半衰期短、需要應(yīng)用毫克量甚至更多量才能實現(xiàn)其促進骨形成的作用，致使價格昂貴。轉(zhuǎn)基因治療骨再生是借助轉(zhuǎn)基因技術(shù)，利用外源基因在自體細胞內(nèi)表達并分泌骨形成蛋白達到治療骨破壞性疾病的目的。研究表明，通過轉(zhuǎn)染骨折部位的細胞，使其分泌內(nèi)源性BMP促進骨再生效果要好于直接應(yīng)用外源性重組蛋白。因此，轉(zhuǎn)基因治療促進骨形成將是一種趨勢并在臨床治療中發(fā)揮重要作用。 傳統(tǒng)的給藥方式是利用病毒載體通過注射給藥，缺陷是存在生物安全隱患，并且需要多...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
第1章 文獻綜述
    1.頜骨吸收和損傷的治療方法
        1.1 骨或骨替代物移植治療頜骨吸收和損傷
        1.2 應(yīng)用化學藥物治療頜骨吸收和損傷
        1.3 牽張成骨技術(shù)治療頜骨吸收和損傷
        1.4 干細胞組織工程學治療頜骨吸收和損傷
        1.5 轉(zhuǎn)基因技術(shù)治療頜骨吸收和損傷
    2.基因復合物的轉(zhuǎn)運體系
        2.1 微粒
        2.2 合成微粒的材料
        2.3 PLGA 微粒在運輸藥物或生長因子中的應(yīng)用
        2.4 PLGA 微粒在 BMP-2 蛋白運輸中的應(yīng)用
    3.本研究的思路
第2章 載 BMP-2 基因 PLGA 微球的制備與表征
    2.1 材料和儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 溶液配制
        2.2.2 PLGA 微球的制備
        2.2.3 PLGA 微球形態(tài)學觀察
        2.2.4 包封率、載藥率的測定
        2.2.5 微球 DNA 體外釋放，微球降解形貌
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 不同條件所制備微球的性能
        2.3.2 微球的表面形態(tài)
        2.3.3 微球 PBMP-2 基因體外釋放
        2.3.4 微球的體外降解實驗
    2.4 討論
第3章 載 CAPI/DNA 復合物 PLGA 微球的表征在體內(nèi)異位成骨的研究
    3.1 實驗主要儀器和試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 載 EGFP 基因和 BMP-2 基因 PLGA 微球（PLGA@CAPI/DNA）的制備
        3.2.2 PLGA@CAPI/DNA 的表征（TEM）
        3.2.3 體外研究 PLGA@CAPI/EGFP 對 MC3T3-E1 細胞的作用
        3.2.4 體內(nèi)動物實驗研究 PLGA@CAPI/PBMP-2 在大鼠肌囊異位成骨的作用
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 CAPI/DNA 復合物的粒徑與尺寸
        3.3.2 TEM 檢測
        3.3.3 PLGA@CAPI/EGFP 體外轉(zhuǎn)細胞實驗
        3.3.4 體內(nèi)異位成骨實驗結(jié)果
    3.4 討論
    結(jié)語
第4章 載 PEI/DNA 復合物的 PLGA 微球的制備與表征
    4.1 實驗主要儀器及試劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 載 PEI/DNA 復合物的 PLGA 微球的制備與表征
        4.2.2 PLGA@PEI/PBMP-2/FITC 微球轉(zhuǎn)染 MC3T3-E1 細胞的實驗研究
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 PLGA@PEI/PBMP-2/FITC 的形貌分析
        4.3.2 載 PEI/DNA/FITC 復合物 PLGA 微球和 MC3T3 細胞共培養(yǎng)結(jié)果
    4.4 討論
第5章 PLGA@PEI/BMP-2 在體內(nèi)外成骨作用的研究
    5.1 實驗主要儀器及試劑
    5.2 實驗方法
        5.2.1 ELISA 檢測共培養(yǎng)后人 BMP-2 分泌量
        5.2.2 PLGA @PEI/PBMP-2 對 MC3T3-E1 細胞分化的作用
        5.2.3 PLGA@PEI/PBMP-2 對大鼠顱蓋骨缺損修復的影響
        5.2.4 統(tǒng)計學分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 ELISA 結(jié)果
        5.3.2 茜素紅染色結(jié)果和 RT-QPCR 結(jié)果
        5.3.3 明膠海綿復合載基因 PLGA 微球
        5.3.4 大鼠顱蓋骨缺損模型
        5.3.5 MICRO-CT 結(jié)果
        5.3.6 組織學分析
    5.4 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在學期間取得的科研成果
致謝



本文編號：3913160